中国农业科学院生物技术研究所
- 作品数：3,880 被引量：14,992H指数：56
- 相关作者：姚斌林敏张维陈明郭三堆更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所中国农业大学西南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 水稻生长发育相关蛋白OsD6p1及其编码基因和应用
- 本发明公开了水稻生长发育相关蛋白OsD6p1及其编码基因和应用。本发明属于生物技术领域，具体涉及水稻生长发育相关蛋白OsD6p1及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质为OsD6p1蛋白，可为如下：A1)氨基酸序列是SEQ...
- 杨立文谷晓峰张倩
- 植物细胞工程的回顾与展望被引量：10
- 1993年
- 植物细胞工程是以细胞培养和细胞操作为基础,按照人们的愿望,有计划地控制、改造和利用植物的技术体系以及发展这些技术,主要包括组织及细胞培养、花药花粉培养、原生质体培养、细胞融合与基因转化等方面的内容。目前植物细胞工程领域中,组织及细胞培养技术在快繁、脱毒、远缘杂交胚挽救等方面已广为应用。生产次生物质的植物细胞大量培养,有的已发展成产业。以花药培养为基础的单倍体育种不断发展,并取得了显著的成绩,重要农作物原生质体培养取得了较大的突破。细胞融合与基因转化取得了可喜的进展。
- 王海波程奇
- 关键词：植物细胞工程细胞培养花药基因
- 木聚糖酶XYNB分子中折叠股B1和B2间的疏水作用对酶热稳定性的影响被引量：12
- 2005年
- 对来源于Streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模,并结合嗜热木聚糖酶氮末端芳香族氨基酸疏水作用的结构分析,设计了XYNB的T11Y定点突变,观察XYNB分子中折叠股B1和B2的疏水作用对酶的热稳定性的影响。将突变酶XYNB′在毕赤酵母中表达,表达的XYNB′经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNB′的耐热性比XYNB有明显的提高,但最适温度与原酶一样为6 0℃。另外,XYNB′的最适pH、Km值及比活性均有一定的改变。实验证实了木聚糖酶XYNB的氮端芳香族氨基酸之间的疏水相互作用与其热稳定性相关,为进一步的结构与功能研究提供了优良的基因材料。
- 杨浩萌姚斌罗会颖张王照王亚茹袁铁铮柏映国伍宁丰范云六
- 转基因抗虫棉Bt基因与nptⅡ基因的遗传与表达被引量：3
- 2008年
- 采用花粉管通道法将含有Bt杀虫基因的pG4AB质粒导入受体棉花中23中,通过卡那霉素筛选,Bt免疫检测条检测,PCR扩增对转基因抗虫棉的各个自交世代进行跟踪研究。结果表明,具有卡那霉素抗性的单株能扩增出Bt基因,而且均有Bt杀虫蛋白表达。Bt基因与npt Ⅱ基因均整合进了棉花基因组中,相互之间紧密连锁遗传,均稳定表达,因此报告基因npt Ⅱ可用于研究Bt基因的遗传情况。
- 闫喜中张锐孟志刚孙国清周涛郭三堆
- 关键词：BT基因
- 用重组酶介导扩增技术快速扩增核酸被引量：107
- 2010年
- 体外核酸快速扩增技术是一种可使微量核酸在体外高效快速扩增的技术,自问世以来,被广泛应用于分子生物学、医学和法理鉴定等领域,并被不断改进,以使其功能和适应性更为广泛.重组酶介导扩增法是在现有体外核酸扩增原理的基础上发展起来的恒温体外快速扩增核酸技术.RAA法利用重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶代替了传统PCR的热循环解链过程,实现了在37℃恒温下的核酸快速扩增,无需特殊的辅助仪器,对操作人员的要求也不高,具备简单、节能、便携、快速等特点,有望在不远的将来取代传统的热循环PCR反应.
- 吕蓓程海荣严庆丰黄震巨沈桂芳张志芳李轶女邓子新林敏程奇
- 关键词：重组酶细菌
- 基于结构基础的嗜热细菌贝斯其热解纤维素菌木聚糖酶Cb Xyn10C的热稳定性分子改良被引量：2
- 2023年
- 【背景】作为降解木聚糖的核心酶种,木聚糖酶可以有效促进木质纤维素的消化水解,在动物养殖领域应用广泛。来源于嗜热细菌贝斯其热解纤维素菌(Caldicellulosiruptor bescii)的GH10家族木聚糖酶Cb Xyn10C最适温度为85℃,在80℃条件下具有良好的热稳定性,具有饲料工业应用潜力。【目的】为满足饲料制粒尤其是水产饲料加工过程的工艺要求,进一步提高木聚糖酶Cb Xyn10C的热稳定性并阐明其耐热机理。【方法】以Cb Xyn10C晶体结构为基础,采用刚性氨基酸引入、疏水作用网络重排2种策略对其热稳定性进行理性设计,获得在100℃条件下比活提高的单点突变体后,通过有益突变位点叠加策略进一步提升酶的热稳定性,最后采用分子动力学模拟技术分析其热稳定性提高的分子机制。【结果】共获得了4个稳定性提高的单点突变体A45P、T69P、F309V和A325P,其中突变体A45P效果最优。随着在A45P基础上另外3个突变位点的叠加,酶的热稳定性在不损失酶活的前提下得到了逐步提升。获得的四点突变体A45P/F309V/A325P/T69P的耐热性最好,其最适反应温度和熔解温度Tm值较野生型分别提高了5℃和6.8℃。分子动力学模拟技术分析发现4个位点的突变引入了新的氢键作用力且优化了疏水作用网络,进而导致酶的结构构象更加稳定。【结论】本研究不仅提高了木聚糖酶在饲料工业中的应用价值,而且对基于酶蛋白结构的稳定性分子改造提供了理论支持。
- 张经纬刘晓青田健罗会颖姚斌涂涛
- 关键词：木聚糖酶热稳定性
- 一种快速检测细菌、真菌生长及繁殖的方法被引量：7
- 2002年
- 目的 介绍一种快速检测细菌、真菌生长及繁殖的方法。 方法 用比色法 (colorimetricassay)和自动微孔扫描光谱法 (automaticmicroplatescanningspectrophotometer)检测细菌、真菌的生长、繁殖情况。 结果 细菌或真菌孢子甲产物的异丙醇溶液的吸光值A5 70与细菌或真菌孢子数呈线性关系。 结论 该方法可以用来检测细菌、真菌的生长和繁殖情况 ,具有快速、简便、灵敏的特点 ,特别是对生长缓慢、生长周期较长的真菌 ,其优势更为明显。
- 高伟唐益雄
- 关键词：细菌真菌MTT
- 植物耐旱相关蛋白DSM1及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种植物耐旱相关蛋白DSM1及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和...
- 吴金霞张治国张芊孙学辉路铁刚
- 文献传递
- 胡麻脂肪酸合成代谢相关小RNA的鉴定及功能解析
- MicroRNA(miRNA)是一类内源的约21-24 nt大小的非编码RNA,广泛分布于植物基因组中,通过对靶mRNA的切割或转录后沉默及甲基化目的DNA对生物体内基因的表达起重要调控作用。研究表明MiRNA参与植物的...
- 张天豹龙艳梁凤萍李震裴新梧
- 关键词：胡麻脂肪酸MIRNA
- 文献传递
- 药用丹参的基因工程改良研究现状与展望被引量：3
- 2009年
- 系统介绍了国内外有关药用植物丹参的次生代谢产物基因工程、抗病基因工程、抗逆基因工程及植物生物反应器等方面的研究进展与现状,阐述了利用基因工程技术对丹参品质进行遗传改良的意义和应用前景,为今后丹参品质的基因工程改良研究工作提供借鉴。
- 田鹏李刚强王楠刘德虎
- 关键词：丹参基因工程
