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南京医科大学基础医学院江苏省生殖医学重点实验室: 作品数：64 被引量：214H指数：8; 相关作者：张健宁于宁妮郭金虎更多>>; 相关机构：扬州大学医学院扬州大学兽医学院南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省重点实验室开放基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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荧光PCR在男性不育相关DAZ基因检测中的运用被引量：2: 2000年; 以带有荧光标记的SpectrumOrange dUTP作为材料 ,应用荧光PCR技术诊断男性精子发生障碍患者外周血DNA中的DAZ基因 ,证实DAZ基因Sy2 5 4片段的缺失与无精症和少精症存在联系 ,为运用分子技术诊断DAZ基因异常等男性不育疾病提供了一种新的方法。该方法可用于临床检测 ,稳定可靠 ,对实验人员更为安全。; 郭金虎王黎熔朱虎林敏周作民沙家豪; 关键词：不育症 DAZ基因

精子发生相关蛋白激酶的功能研究: 为了鉴别精子发生相关基因,我们使用成人和胚胎睾丸探针杂交成人睾丸的cDNA微阵列。在所有成人睾丸高表达的基因中,有一个基因在成人睾丸的表达强度是胚胎睾丸的3.3倍,我们将其命名为NYD-SPK。NYD-SPK核苷酸长度为...; 朱虎沙家豪陈小章; 文献传递

hCG对成年小鼠睾丸Leydig细胞中睾酮生成酶的调节作用被引量：13: 2001年; 目的　从分子水平探讨 h CG对成年小鼠睾丸 L eydig细胞中胆固醇侧链裂解酶 (P45 0 scc)、17α-羟化酶 (P45 0 c17)和 3β-羟甾脱氢酶 (3βHSD)的调节作用。　方法　体外培养成年小鼠睾丸 L eydig细胞 ,分别测定培养1、8h h CG刺激组及对照组细胞培养上清中睾酮含量 ,同时运用半定量 RT- PCR及核酸内切酶酶切方法测定两组细胞中 P45 0 scc、P45 0 c17及 I、VI两型总的 3βHSD的 m RNA水平 ,并测定了 I、VI两型 3βHSD m RNA的比值。　结果　 1.培养 1、8h刺激组睾酮含量均明显高于对照组 (1h P<0 .0 1,8h P<0 .0 0 5 ) ;2 .培养 8h,刺激组 P45 0 scc和P45 0 c17m RNA水平明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;而培养 1、8h刺激组 I、VI两型总的 3βHSD m RNA水平和对照组相比均无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,但 VI型 3βHSD m RNA和 I型 3βHSD m RNA的比值逐渐增高。　结论　 h CG能在转录水平刺激 P45 0 scc、P45 0 c17及 VI型 3βHSD的表达 ,促进睾酮生成。; 祝辉于宁妮林敏周作民沙家豪; 关键词：17Α-羟化酶绒毛膜促性腺激素 LEYDIG细胞睾酮

男性不育症患者精子发生相关基因的分析: 目的评估特发性无精子症和严重少精子症患者中Y染色体微缺失发生的频率,并探讨 AZF检测的临床意义。; 宋宁宏吴宏飞张炜钱立新苏建堂周作民沙家豪; 文献传递

特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子基因表达的比较研究被引量：1: 2010年; 目的探讨男性特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子（AZF）基因表达的临床意义。方法特发性不育患者62例，其中严重少精子症29例，无精子症33例。抽取患者外周血样本检测，8对引物为sY84和sY86（AZFa区），sY127和sY134（AZFb区），sY254和sY255（AZFc区）及内对照SRY（sY14）和ZFY。PCR检测包括MixA：SRY（sY14）-ZFY-sY84-sY134-sY255和MixB：SRY（sY14）-ZFY-sY86-sY127-sY254；穿刺获得患者睾丸标本，Trizol方法提取总RNA，反转录为cDNA。PCR检测包括SRY（sY14）-DFFRY—RBM—DAZ-β-actin。结果外周血PCR结果显示：62例患者中AZF基因微缺失12例（19．4％），其中无精子症组9例，严重少精子症组3例。睾丸组织RT—PCR结果显示：62例均可见SRY阳性表达；RBMmRNA无表达2例，RBM和DAZmRNA无表达1例，DAZmRNA无表达12例，其中3例外周血细胞内DAz基因正常。结论特发性不育患者睾丸组织存在AZF基因表达缺失，睾丸组织RT-PCR检测有助于确定患者病因，结合外周血PCR检测有助于指导睾丸精子穿刺-胞浆内单精子注射治疗。; 宋宁宏杨杰张炜王增军华立新殷长军吴宏飞周作民张晶; 关键词：Y染色体无精子因子聚合酶链反应逆转录聚合酶链反应不育男(雄)性

精子发生中Alu序列的返座作用: 2001年; 目的 :克隆人类精原细胞和初级精母细胞特异表达的基因。　方法 :应用改良的mRNA表达图谱分析技术 ,对正常男性、唯支持细胞综合征和生精阻滞在初级精母细胞病人的睾丸进行mRNA表达图谱分析的差异显示 ,选择唯支持细胞综合征缺失的表达基因并克隆测序。　结果 :正常男性、唯支持细胞综合征和生精阻滞在初级精母细胞症病人的睾丸组织表达图谱存在显著的表达差异 ,目前已获得唯支持细胞综合征缺失的片段 88个。在已分析的 6个片段中 ,1个与人类的Alu序列家族 (Alufamily) 98%同源。　结论 :Alu序列在生精细胞中通过返座作用形成新Alu序列。; 王黎熔李建民单玉喜; 关键词：精子发生

DAZ及DAZH基因与精子发生的相关性分析被引量：8: 1998年; ＤＡＺ基因（ｄｅｌｅｔｅｄｉｎａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ）是无精子因子（ＡＺＦ）的重要候选成分，它的缺失可致无精子或严重少精子症。人第３号染色体上存在着ＤＡＺ的同源基因ＤＡＺＨ（ＤＡＺｈｏｍｏｌｏｇｕｅ），为探讨ＤＡＺ和ＤＡＺＨ基因在精子发生中的作用，我们用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了６６名正常生育男性和９０例原发性不育男性基因组ＤＮＡ的ＤＡＺ、ＤＡＺＨ基因。结果：原发性不育男性中１２例ＤＡＺ缺失（无精子症８例，严重少精子症４例）；正常男性ＤＡＺ无一缺失；在正常男性和不育男性中均有ＤＡＺＨ缺失。结果进一步证实ＤＡＺ为ＡＺＦ的候选成分，而ＤＡＺＨ基因与精子发生似无直接的相关性。; 郑英周作民王黎熔林敏朱虎沙家豪; 关键词：精子发生 DAZ基因聚合酶链反应