中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 作品数:351 被引量:1,782 H指数:19 相关作者: 蔡有余 孙立新 张雪艳 金顺钱 丁芳 更多>> 相关机构: 哈尔滨医科大学附属第一医院 华中科技大学同济医学院 北京协和医学院肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 经济管理 更多>>
散发食管癌组织3,9号染色体部分位点杂合性丢失和频发的微卫星DNA不稳定 被引量:3 1996年 采用10对来自3,9号染色体不同位点的引物,以微卫星DNA长度多态性-PCR-银染法检测36对散发食管癌标本该位点处的杂合性丢失和微卫星DNA不稳定。结果发现在9p22~23,3p23,3p14.2,3p21.3和3q21~22等处有较高频率的杂合性丢失,提示这些位点附近有可能存在抑癌基因。同时,在某些位点发现了较高程度的微卫星序列不稳定,这说明广泛的微卫星序列不稳定不仅存在于家族性肿瘤,而且存在于散发食管癌病例中。 李卫东 王亮 王秀琴 张春林 毛学正 吴旻关键词:杂合性丢失 食管癌 染色体 抑癌基因 癌基因 负性筛选策略与食管鳞癌循环肿瘤细胞检测 被引量:2 2008年 目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性筛选方法,检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞。方法选用负性筛选策略,分步去除7.5ml食管鳞癌外周血样本中的红、白细胞,富集上皮来源的稀有细胞。比较3种免疫磁珠(Miltenyi、AVIVA和Xinzhi磁珠)去除白细胞、富集外周血循环肿瘤细胞的特点和效率。用经典的细胞化学染色鉴定循环肿瘤细胞。结果Miltenyi和AVIVA磁珠去除白细胞、富集肿瘤细胞效果较好。从富集后的食管鳞癌患者外周血稀有细胞中鉴定到形态各异的循环肿瘤细胞。结论负性筛选策略可以有效分离鉴定食管鳞癌患者外周血形态各异的循环肿瘤细胞。 何平 王伟 任传利 乔媛媛 张金强 文峰 周兰萍 刘芳 赵晓航关键词:循环肿瘤细胞 食管鳞癌 遗传流行病学 被引量:3 1998年 产生和发展群体遗传学在1920年被确认为一门学科。1960年它又分为两个分枝,一个与历史过程有关,将遗传学与人类学以及在其他物种的古生物学和分类学结合。另一分枝与同时期人群的遗传有关,将遗传学与流行病学、医学、心理学以及在其他物种的农学相结合。后一分枝在本世纪80年代中期产生了遗传流行病学,并被人们普遍接受。它是遗传学与流行病学相互渗透产生的一门完整的独立的边缘学科,合并了流行病、统计学方法与分子遗传学技术,把许多背景不同的研究者联系到了一起。它是群体遗传学中最年轻和发展最快的分枝。 张卫华关键词:遗传流行病学 研究方法 家庭聚集性 应用RPSB杂交法进行微量标本中基因扩增检测 1994年 采用重复序列PCR将引物间多种基因序列目标“放大”,继而通过狭缝杂交,用特异基因探针在微量标本中可检测基因的扩增。采用本法对20份食管癌家族标本进行c-myc基因扩增检测,其结果与双PCR法所得一致。 朱丹 阎水忠 王亮 张春林 毛学正 吴旻关键词:基因扩增 食管癌 HLA-A02基因型与中国高发区肝细胞癌的密切关联 被引量:16 1999年 目的:探讨HLAA02型及其亚型与启东肝细胞癌的相关性。方法:用PCRSSP法分析启东肝细胞癌和正常人中HLAA02型及其亚型的分布。结果:103例经病理诊断的肝细胞癌中57例为HLAA02型,其比例达到55%,显著高于启东正常人群HLAA02型32%(33/102)的比例,P<0.001。同时揭示包括HLAA02型在内的HLAA位点的等位基因多为杂合型。启东肝细胞癌HLAA02型中A0201亚型所占的比例稍高于正常人群,但没有显著差异。分析比较表明,启东肝细胞癌中HLAA02型的相对集中与当地肝癌中p53基因249密码子突变的高频度发生并没有关联。结论:在乙肝病毒和黄曲霉毒素均为危险因子的启东地区,HLAA02型与肝细胞癌密切相关。 明利华 朱源荣 王晓宏 吴志远 孙宗棠关键词:肝细胞癌 P53基因 点突变 小同功型人硒蛋白P的诱导凋亡活性 被引量:2 2004年 目的 研究小同功型人硒蛋白P(HSelP)的作用。方法 克隆HSelP小同功型基因 ,将位于N端 4 0位的硒半胱氨酸 (SeCys)突变为半胱氨酸 ,测序确定后 ,在感受态大肠杆菌BL2 1中大量表达 ,表达产物HSelP2 80m用阴离子交换层析纯化 ,Westernblot方法鉴定。提取小鼠肝细胞线粒体 ,通过荧光光谱仪检测线粒体悬液 90°光散射强度和罗丹明 12 3荧光光度变化 ,确定不同浓度HSelP2 80m引起的线粒体膜透过性转运孔 (PTP)开放程度和线粒体跨膜电位的变化。结果 成功地将HSelP小同功型中SeCys点突变为半胱氨酸 ,在原核表达系统中获得大量表达。表达产物纯化后纯度达 90 %以上。HSelP2 80m可促进线粒体PTP开放 ,跨膜电位下降 ,且有剂量依赖关系 ,可被PTP的特异抑制剂所抑制。此作用在去除N端 4 0个氨基酸后丧失。结论 HSelP2 80m有促进线粒体PTP开放的作用 ,为进一步研究HSelP的结构和功能提供了线索。 房青 伊瑶 郑艳华 陈佺 宁力 查园园 毕胜利 杨建国 林晨关键词:凋亡 活性 氨基酸 S期激酶相关蛋白2在食管癌中的表达及其意义 2009年 目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-interacing protein 2,SKP2)在食管癌组织中的扩增、表达状态及其临床意义。方法:应用荧光原位杂交、RT-PCR、Western印迹和免疫组织化学方法检测SKP2在食管癌组织中的扩增和表达水平,结合临床病理资料进行统计学分析。结果:食管癌组织中SKP2的扩增频率为46.0%,SKP2扩增与肿瘤淋巴结转移和临床分期具有显著相关性(P<0.05)。在SKP2扩增的食管癌组织中SKP2 mRNA和蛋白的表达水平均明显升高。免疫组织化学检测结果表明,食管癌组织中SKP2蛋白的过表达与肿瘤淋巴结转移和肿瘤分期有显著相关性(P<0.05),与预后无相关性(P>0.05)。结论:SKP2可能具有癌基因的潜能,在食管癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥一定作用。 王小春 徐昕 林德晨关键词:食管肿瘤 S期激酶相关蛋白质类 基因扩增 免疫组织化学 食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1的表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的关系 被引量:3 2009年 目的探讨食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1)表达水平与细胞对吉西他滨(GEM)敏感性的关系。方法选用4个人食管鳞癌细胞系Eca-109、Kyse-150、Kyse-450和9706,采用Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测各细胞系的RRM1表达水平,采用细胞毒性试验检测各细胞系对GEM的敏感性。以50nmoL/L GEM持续培养Kyse-450细胞,检测不同时点存活细胞RRM1表达水平的变化。应用RNA干扰技术下调RRMl表达水平后,检测细胞对GEM敏感性的变化。结果GEM作用48h,Eca-109、Kyse-150、Kyse-450和9706细胞的IC50分别为(0.92±0.17)、(0.48±0.11)、(0.29±0.06)和(0.02±0.01)mmol/L。RT—PCR和Western blot结果均显示,Eca-109细胞系的RRM1表达水平最高,其次是Kyse-150和Kyse-450,9706细胞系的RRM1表达水平最低。50nmol/L GEM持续培养Kyse-450细胞后,存活细胞的RRM1水平随着培养时间的延长而逐渐增高。转染RRM1 siRNA的Kyse-450细胞RRM1蛋白的表达水平显著降低,而对GEM的敏感性提高了4.26倍。结论食管鳞癌细胞系RRM1的表达水平与细胞对GEM的敏感性相关,RRM1表达水平低的细胞对GEM相对敏感。 罗扬 林晨 张雪艳 梁萧 付明 冯奉仪关键词:食管肿瘤 吉西他滨 肝癌细胞系BEL-7402与正常肝组织基因表达概况差异 被引量:1 2005年 目的观察肝癌细胞系的基因表达概况,寻找在肝癌细胞系及正常肝组织中差异表达基因。方法以肝癌细胞系及正常肝组织的总RNA反转录合成含有α32PdATP的cDNA为探针,与Atlas微阵列表达分析膜进行差异杂交,并应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和Northern杂交验证。结果放射自显影结果经AtlasImageTM软件分析显示在所分析的588种已知基因中,TFDP2、Akt1、E2F3等26个在肝癌细胞系中表达上调,TDGF1、BAK、Caspase3等22个表达下调,参与细胞增殖、凋亡、分化、细胞间相互作用、与细胞侵袭相关的基因表达水平发生了明显改变。结论通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变组成了一个肝癌特异的基因表达谱,系统地研究肝癌细胞系的基因表达改变,可为肿瘤早期诊断和治疗提供线索。 刘连新 武林枫 谢向晨 姜洪池 刘芝华 吴旻关键词:肝癌 肿瘤细胞系 BEL-7402 肝组织 微阵列 分子遗传学 基因的秘密 2005年 科学与技术的发展已经使人类进入了太空,登上了月球。人类也释放出了蕴藏在原子核内的巨大能量。但是人为什么是人?人与其他生物根本差异何在?孩子为什么总是或多或少的同父亲、母亲有相似之处?这些关于人类自身的奥秘还有待进一步探索。 吴旻关键词:基因 原子核