西南大学生物技术中心
- 作品数：106 被引量：273H指数：10
- 相关作者：张瑞芝骆星丹覃珊林健文何清君更多>>
- 相关机构：石河子大学农学院贵州大学农学院贵州省教育部绿色农药与农业生物工程重点实验室贵州大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 钙调磷酸酶和Slt2MAPK信号途径在介导球孢白僵菌细胞壁完整性、分生孢子产生和毒力的交互作用
- 钙调磷酸酶和Slt2 MAPK信号途径均介导真菌细胞壁结构完整性、产孢和毒力等生物学过程,而二者在介导这些生物学过程的相互关系尚不明晰。本研究比较分析了钙调磷酸酶和Slt2 MAPK对球孢白僵菌细胞壁结构完整性和生长发育...
- 黄帅帅何张江张世伟张永军
- 关键词：钙调磷酸酶
- 文献传递
- ‘小白杏’自交不亲和SFB基因RNAi表达载体的构建被引量：2
- 2016年
- 【目的】应用RNA干扰(RNAi)技术在分子水平调控杏自交不亲和性状,为培育自交亲和杏品种奠定基础。【方法】基于南疆自交不亲和杏品种‘小白杏’(Prunus armeniaca‘Xiaobaixing’)花粉决定子SFB(S-haplotype-specific Fbox protein)基因3’端c DNA全长序列,选取SFB基因变异区上游距起始密码子61 bp处、大小为29 bp的片段作为干扰序列,棉花基因组DNA 242 bp的序列作为间隔片段,利用融合PCR(Fusion PCR)构建SFB基因发卡结构(intron-containing hairpin RNA,ihp RNA),再酶切连接到植物表达载体p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII上,构建SFB基因RNAi表达载体;用冻融转化法将重组质粒转化至农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中。【结果】测序结果表明臂长29 bp、茎环242 bp的SFB基因ihp RNA结构融合成功,双酶切检验和PCR验证结果表明,该结构正确地插入p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的启动子和终止子之间,说明SFB基因的RNAi表达载体p CAMBIA-RNAi-SFB构建成功;PCR验证和测序结果也表明重组质粒已经成功转入农杆菌LBA4404中。【结论】研究结果表明,应用融合PCR结合酶切连接的方法构建SFB基因的RNAi表达载体是可行的,为RNAi技术在果树自交不亲和性状改良上的应用创造了条件。
- 刘海楠冯建荣罗明刘小芳李文慧白茹
- 关键词：自交不亲和
- 在球孢白僵菌几丁质酶Bbchit1上融合几丁质结合域增强其杀虫活性
- 昆虫病原真菌在侵染宿主的过程中,分泌的几丁质酶对于降解寄主体壁成份,促进菌丝穿透昆虫外壳具有重要作用。分析发现,目前克隆的昆虫病原真菌的几丁质酶均缺乏几丁质结合域结构。本研究以球孢白僵菌几丁质酶基因 Bbchit1为研究...
- 范艳华方卫国郭书娟裴小琼张永军肖月华李德谋罗志兵冯静金凯廖兴刚裴炎
- 文献传递
- 一个具有棉花纤维细胞特异性的启动子SCFP被引量：2
- 2008年
- 为了获得棉花纤维特异启动子,克隆了棉花纤维细胞中表达基因GhSCFP的5′端上游序列,将其分别与GUS和GFP报告基因融合.在转基因烟草中,仅在种皮的最外层细胞中检测到GUS和GFP活性;在转基因陆地棉中,根、叶片、幼茎、花冠、花药和柱头中均未观察到GUS信号,而在开花当天胚珠表面突起的纤维细胞中有明显的GUS活性,直到开花后36d,纤维上仍可观察到GUS信号.本研究结果显示,SCFP启动子具有明显的棉花纤维表达特异性和植物种皮特异性,而且表达强度高.该启动子在棉花纤维发育相关基因的功能研究和棉花基因工程改良中将有重要的应用价值.
- 侯磊刘灏李家宝杨霞肖月华罗明宋水清杨光伟裴炎
- 关键词：启动子棉花烟草
- ‘小白杏’自交不亲和SFB基因的克隆及其表达载体的构建
- 2015年
- 【目的】利用基因工程技术改良杏自交不亲和性状,为培育自交亲和杏品种奠定基础。【方法】以新疆自交不亲和杏品种‘小白杏’(Prunus armeniaca L.‘Xiaobaixing’)的花粉为材料,通过RT-PCR(Reverse Transcription PCR)和3’RACE(Rapid Amplification of c DNA Ends)技术克隆SFB基因(S-haplotype-specific F-box protein)片段。以克隆载体p MD19-T为基础,结合p BS-T上的酶切位点,利用酶切连接的方法将SFB基因的ORF框正向重组到表达载体p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的Kpn I和Sac I酶切位点之间,构建SFB基因正义表达载体p CAMBIA-S-SFB;将SFB基因的ORF框反向重组到表达载体的Kpn I和Sal I酶切位点之间,构建SFB基因反义表达载体p CAMBIA-A-SFB;用电击转化法将重组质粒转化至农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中。【结果】通过RT-PCR和RACE技术获得了1136 bp SFB基因片段(Gen Bank登录中),其中含912 bp ORF框(Open Reading Frame),由它推导的氨基酸序列与蔷薇科SFB基因高度同源,具有F-box结构域、2个变异区和2个高变区的完整结构;表达载体酶切检验结果表明,SFB基因的ORF框正确地插入p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的启动子和终止子之间,表明SFB基因的正、反义表达载体构建成功;特异引物PCR验证结果也表明重组质粒已经成功转入农杆菌LBA4404中。【结论】研究的结果为利用基因工程技术改良杏自交不亲和性状、培育自交亲和杏品种的遗传转化提供了载体。
- 刘海楠冯建荣李文慧罗明刘小芳孙军利
- 关键词：自交不亲和
- 定殖球孢白僵菌提高烟草对病虫害的抗性
- 球孢白僵菌Beauveria bassiana不仅是一种重要的昆虫病原真菌,广泛应用于农业、林业以及一些卫生害虫的生物防治,而且也是重要的植物内生真菌,在促进植物生长和增强植物抗性等方面扮演了重要角色。本研究通过种子接种...
- 覃旭张永军
- 关键词：球孢白僵菌烟草促生抗病抗虫
- 文献传递
- 热诱导FLP重组酶删除转基因烟草外源基因被引量：11
- 2007年
- 利用热激启动子Hsp18．2、nP重组酶基因及其专一识别位点构建了重组酶删除系统的植物表达载体转化烟草。热激处理后转基因植株中FLP重组酶表达并识别两个同向lox P-frt重组酶识别位点，使两位点间的DNA插入片段（包含kn1、gus、nptⅡ基因）从转基因烟草基因组中删除，由kn1基因引起的转基因烟草特殊表型及gus基因产生的蓝色表型消失。
- 高媛媛赵德刚罗克明裴炎LiYi
- 关键词：基因删除
- 棉花PAP1同源基因GhPAP1的克隆和功能分析
- 花色素(anthocyanin)是一类重要的类黄酮色素。它在自然界植物中广泛存在,是给植物叶、花和果实着色的主要色素。棉花红色植株基因(R2)是一个传统的棉花显性遗传标记基因。具有该基因的棉花地上部分(包括叶片、茎、花、...
- 杨帆董静薄少菲王艳军丁慧严倩裴炎肖月华
- 关键词：棉花
- 文献传递
- 球孢白僵菌三种形态孢子表面蛋白与细胞特性和毒力的关系及比较蛋白谱鉴定
- 蒋洪岩宋雨林黄帅帅何张江张永军
- 苦瓜几丁质酶—益母草抗菌肽基因遗传转化黑麦草的研究
- ＜正＞草坪草是用于建设草坪的禾本科以及少数莎草科植物,病虫害是影响草坪草产量和质量的重要因素。几丁质酶通过分解真菌细胞壁以及昆虫围咽膜几丁质,抑制真菌生长和杀灭害虫。抗菌肽是一类新型的抗菌物质,其抗菌谱广、抗菌活性高。本...
- 孔政赵德刚裴炎
- 文献传递
