中国水产科学研究院黄海水产研究所海洋酶与酶工程开放实验室
- 作品数：27 被引量：238H指数：10
- 相关作者：李晶苗小庆更多>>
- 相关机构：青岛海洋大学海洋生命学院青岛大学医学院上海水产大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 锌金属蛋白酶家族的结构与催化机理被引量：6
- 2013年
- 锌金属蛋白酶是一类分布广泛,种类繁多的水解酶家族,是近年来人们研究的热点.一般来说,HEXXH保守序列一直都作为锌金属蛋白酶家族分类的依据.除此之外,不同种类的酶还有一些其它的序列特征.谷氨酸锌蛋白(gluzincin)在锌离子配体处共有2组保守区域;甲硫氨酸锌蛋白(metzincin)则拥有1个延长的保守序列HEBXHXBGBXH,里面包含了第3个His配体.大量的金属蛋白酶晶体结构被解析出来,从中可以发现该类酶的活性中心都包含有1个锌离子.锌金属蛋白酶的催化机理通常认为是锌离子与1个水分子结合活化而成.但是,最近的发现证实了并不是所有的锌金属蛋白酶催化都需要水分子参与活化.在本文中,综述了这些已发表的锌金属蛋白酶家族的分类、结构特征、底物特异性识别和催化机理.
- 郑媛盛军纪晓峰郑兰红孙谧
- 产海洋细菌MP-2酯酶菌株的鉴定及酯酶理化性质的研究被引量：3
- 2009年
- 从渤海海泥样品中分离获得1株新型酯酶菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis。所得的MP-2酯酶的最适作用温度范围50～70℃,在60℃表现出了最高活性,属于耐热酶;最适作用pH为10,属于碱性酶,其pH值作用范围比较窄;具有良好的热稳定性;金属离子Co2+,Li+对酶具有激活作用,Ca2+对酯酶的活力没有显著影响,化学试剂SDS、EDTA及Tween-20对酯酶的抑制效果显著,对常见有机溶剂具有良好的耐受力;该酯酶对碳链长短不同的底物表现出不同的酶活。
- 平芮巾孙谧刘均忠王跃军郝建华张胜军
- 关键词：酯酶
- 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定被引量：31
- 2001年
- 对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明 ,该酶由 2 56个氨基酸组成 ,分子量为 330 0 0 Dar,等电点 p I为 9.4 5,米氏常数 Km为 5× 10 -3 m mol/ L;酶的最适作用p H范围为 9.5～ 10 .5,最适作用温度 30℃ ,具有一定的抗氧化稳定性。Ca2 +、Mn2 对酶有激活作用 ,而 Hg2 +、Ag+对酶有抑制作用。 DFP、NBS严重抑制酶的活性 ,而同时该酶也能被 EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。
- 孙谧修朝阳王跃军陈丽芳张云波洪义国阎晓玲韩艳波李晶陈良
- 关键词：理化性质
- 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的制备工艺研究被引量：11
- 2001年
- 对黄海黄杆菌所产低温碱性蛋白酶的工业生产技术和电泳纯级试剂酶的分离纯化工艺进行了实验。按照设计的中试生产技术 ,每吨发酵液可得酶粉 2 0 kg,粗酶比活大于 2 0× 10 4 U/ g;同时运用一系列纯化手段和条件 ,制备出电泳纯级试剂酶 ,纯化过程蛋白回收率在 7%左右 ,活性回收率在60 %以上 ,比活性也稳定在 1.9× 10 3U/ mg以上 ,激光灰度扫描结果试剂酶纯度大于 99% ,可以作为试剂酶满足进一步生物学研究和实际应用。其产品质量和制造工艺均达到了中试放大规模的要求。
- 王跃军孙谧洪义国张云波沙珍霞阎晓玲苗小庆姜展军
- 关键词：絮凝沉淀分离纯化
- 海洋微生物溶菌酶的纯化与性质研究被引量：33
- 2005年
- 海洋微生物溶菌酶发酵上清液经超滤、CM_SepharoseFF阳离子交换层析和SephadexG_10 0凝胶过滤层析纯化得到电泳纯的溶菌酶,纯化倍数为34 7,活力回收为2 4 1%。对纯化溶菌酶性质研究表明,该酶分子量约为39kD ,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH为8 0 ,在5 0℃以下和pH 5 0～10 0之间都有较好的稳定性,与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性,广谱杀菌,对多种致病菌也有较强的溶菌作用。
- 邹艳丽孙谧王跃军
- 基于改进ILC的蛋白酶发酵过程pH值控制方法
- 2020年
- 针对海洋蛋白酶(MP)发酵过程中,产酶菌株YS-80酸碱度难以稳定控制在最优范围内的问题,提出一种基于改进迭代学习控制(ILC)的pH值控制方法。分析MP发酵过程动力学模型,确定控制变量;对BP神经网络进行训练和测试,得出迭代学习控制器的增益参数与控制误差之间的映射关系,采用优化后的人工鱼群算法(AFSA)实现增益参数的动态跟踪;建立MP发酵过程pH值迭代学习控制模型,解决YS-80产酸曲线和生长曲线未知的难题。仿真结果表明:该控制方法对基质浓度、菌体浓度的跟踪误差小于0.669 g/L,对相对酶活的跟踪误差小于0.98%,鲁棒性与响应速度良好。
- 赵海清王博朱湘临朱熀秋郝建华
- 关键词：PH值
- 一株产低温碱性蛋白酶嗜冷海洋细菌YS-9412-130的分离和培养条件研究被引量：37
- 2000年
- 自海水贝类中取样 ,经分离培养基和酪蛋白培养基复合培养 ,用检测蛋白酶产生水解圈和Folin-酚碱性蛋白酶活性测定相结合的方法从 10 0 0多份样品中初步筛到了产碱性蛋白酶活力高、性能优良的菌株 YS- 94 12 - 130。对其初步研究结果表明 ,该菌只能利用有机氮源生长 ;在接近自然海水盐度、温度 2 0℃、p H在 7.0～ 9.0条件下 。
- 孙谧王跃军张云波洪义国阎晓玲陈毓桢王春波刘晓萍
- 关键词：碱性蛋白酶海洋细菌
- 低温碱性蛋白酶QDAPr的生物信息学分析及同源模建被引量：6
- 2006年
- 对一株来自黄海的假单胞杆菌QD80所产的碱性蛋白酶QDAPr进行了生物信息学分析,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析和检测。最后对模建的结果进行了初步的实验验证。结果表明:该碱性蛋白酶的等电点为8.52,外源性氨基酸为32.9%,二级结构中α螺旋占5.88%,β折叠片占14.6%,与铜绿假单胞菌的碱性蛋白酶的同源性为76%。三维结构检测表明此模型的结构符合立体化学和生物学功能。同源性分析表明该模建模型含有HEXXHXUGUXH的基元(motif),通过BrAc修饰实验初步验证了活性中心的功能。
- 郝建华袁翠王跃军孙谧
- 关键词：碱性蛋白酶生物信息学同源模建
- 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶发酵过程动力学研究被引量：4
- 2001年
- 应用自动控制发酵设备 ,对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130碱性蛋白酶发酵动力学和工艺条件进行了研究。从基本的动力学概念和方程出发 ,通过分批发酵试验摸索了黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130生长与代谢的基本规律 ,证明了发酵过程中低温碱性蛋白酶的形成为生长部分关联型。采用补料分批培养方法限制生长基质浓度 ,确定其一系列参数值 。
- 孙谧王跃军李民张云波洪义国阎晓玲
- 关键词：发酵动力学补料分批培养
- 海洋低温溶菌酶抗肿瘤活性的初步研究被引量：5
- 2001年
- 通过观察海洋低温溶菌酶对体外培养细胞株增殖的影响、对角膜诱生血管的影响、对小鼠肉瘤 S180 (实体型 )及对小鼠肝癌 HAC(实体型 )的抑制作用 ,探讨海洋低温溶菌酶抑制肿瘤生长活性。结果表明 ,该酶与蛋清溶菌酶在抑瘤作用机制上有很大区别 ,海洋低温溶菌酶具有血管生成抑制因子的活性 。
- 张云波孙谧蔡勤王跃军洪义国郝建华
- 关键词：血管生成抑制因子抗肿瘤活性
