江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室
- 作品数:71 被引量:62H指数:3
- 相关作者:王欣范洋洋更多>>
- 相关机构:中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点开放实验室黄山学院生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种家蚕丝腺体外培养和基因瞬时表达分析的方法被引量:1
- 2018年
- 家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺组织的方法,取健康家蚕5龄2 d的幼虫,用75%乙醇进行表面消毒,灭菌水冲洗,剪开腹部表皮固定,用镊子轻轻拉出丝腺组织,用75%乙醇快速漂洗、PBS缓冲液冲洗2~3次,放入含有800μL TC-100培养基的12孔细胞培养板的培养孔中,每孔4条丝腺组织,27℃培养;将0.64μg增强荧光蛋白基因表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-SV40]加入到25μL不完全TC-100培养基中孵育15 min后转染丝腺组织,48 h后用荧光显微镜观察,培养基清澈,丝腺组织外形完好、发出亮绿色荧光,表明egfp在丝腺中得到了表达。为进一步验证体外培养丝腺的转染效果,将家蚕miR-0031*的抑制物(inhibitor)和阴性对照(inhibitor negetive control)各10μL按照同样方法配成转染液,加入到放有丝腺组织的培养孔中,48 h收集丝腺组织,提取总RNA,荧光定量PCR检测靶基因BmFib-L的表达量,结果显示,inhibitor抑制miR-0031*的表达,促使BmFib-L的表达量上升,表明用体外培养丝腺进行转染等试验是可行的。该方法的建立为研究蚕丝蛋白基因表达调控的分子机制提供新的技术途径,也为家蚕其他组织的体外培养和研究提供借鉴。
- 陈艳花沈兴家
- 关键词:家蚕丝腺体外培养转染
- 家蚕追寄蝇的相关研究
- <正>家蚕追寄蝇(Exorista sorbillans Wiedemann)是家蚕蝇蛆病的病原,俗称多化性蚕蛆蝇。蚕蛆蝇将卵产于蚕体表面,孵化后幼虫钻入蚕体内寄生而引起的病害。蝇蛆病对蚕业生产危害较大,世界主要养蚕国均...
- 唐顺明王闪闪ZUFAN BEKELE KASSA王耒耒张彩红徐娇王雪珍王梅仙朱娟沈中元沈兴家
- 6个种源地不同桑树品种叶柄解剖结构与水分运输能力初探被引量:3
- 2019年
- 叶柄是水分和营养物质在茎和叶间运输的重要组织。采用石蜡切片技术和木材离析技术,分析6个种源地不同的桑树品种一年生扦插苗叶柄的显微结构特征,对叶柄的水分运输能力和抗蒸腾能力进行评价,并对桑树的抗旱性进行探讨。结果显示在6个桑品种中,吴堡桑的叶柄角质层和厚角组织厚度较小,但维管束最为发达,具有较高的维管束面积占比、中等水平的导管直径和最大的导管长度,水分运输能力最强,同时还能保持对栓塞较强的抵抗性,推测其抗旱能力可能较强,适宜种植在较为干旱的地区;育711号的叶柄角质层较薄,云果桑1号叶柄的厚角组织最薄,这2个品种的叶柄具有较多的维管束,但其维管束面积占比、导管孔腔面积以及导管直径在6个品种中较小,故抗蒸腾能力与水分运输能力均较低,其抗旱能力可能相对较弱,更加适合在水分充足的环境中生长。研究结果为阐释桑树叶柄结构、水分运输能力与桑树抗旱能力之间的关系提供了一定的实验依据。
- 沈萩荻吴艳刘利曹旭程嘉翎
- 关键词:桑树叶柄水分运输
- 基于昆虫孵化酶基因及其内含子缺失的进化初步分析
- 昆虫在当代动物分类种群中占据了重要位置,是探讨进化生物学理想的实验材料.孵化酶广泛存在于各物种胚胎发育过程中,并在个体发育中扮演重要角色.最近在鱼类基于昆虫孵化酶基因及其内含子缺失角度探讨了进化分析,获得了有意义的结果....
- 查艳唐顺明陈加佳刘龙山沈兴家
- 关键词:昆虫孵化酶氨基酸序列基因结构进化生物学
- 文献传递
- 家蚕品种秋丰×白玉耐氟性状的遗传分析及耐氟主效基因的初步定位被引量:1
- 2019年
- 家蚕品种秋丰×白玉是一对耐氟性较强的夏秋用蚕品种,其中以亲本白玉A的耐氟性最强。以白玉A与耐氟性较弱的皓月B为亲本组配各种杂交世代进行耐氟性的遗传分析,结果表明在一定浓度的氟化物添食范围内,其耐氟性遗传呈显性遗传,受主效基因控制,并且具有部分伴性遗传效应和明显的杂种优势。利用SSR分子标记对耐氟性状进行连锁分析,初步确定耐氟主效基因与第12连锁群中的2个标记(chr12-2990-1和chr12-2990-2)紧密连锁。
- 裘智勇裘智勇王宝林夏定国沈兴家夏定国
- 关键词:家蚕耐氟性
- 家蚕山梨醇脱氢酶基因转录特性分析
- 为了明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和Bm SDH-2b)的转录特性。用5′RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆家...
- 朱娟谢雨辰陈艳荣唐顺明易咏竹沈兴家
- 关键词:家蚕启动子滞育转录起始位点
- 文献传递
- 家蚕核型多角体病毒经口感染因子1编码基因的转录及亚细胞定位分析
- 2019年
- 杆状病毒在感染循环中产生的包涵体衍生病毒(occlusion-derived virus,ODV)介导病毒经口感染。由至少9种经口感染因子(per os infectivity factor,PIF)形成的复合体介导ODV感染昆虫中肠上皮细胞。为深入研究经口感染因子1(PIF1)的作用机制,克隆了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)陕西分离株的pif1基因,序列分析显示其编码蛋白与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的PIF1氨基酸序列一致性为85%,含有2个RGD基序;5′RACE分析发现pif1转录起始位点位于起始密码子上游53 bp处,含有病毒晚期启动子的保守序列ATAAG;定量PCR分析显示pif1在感染晚期开始大量转录,一直持续到感染极晚期;利用瞬时表达系统将PIF1与EGFP融合表达,通过激光共聚焦显微镜观察荧光分布位置,结果发现荧光均匀分布于细胞质中,而在病毒感染后荧光进入细胞核中,表明PIF1在其他病毒因子参与下,被运输至细胞核中。研究结果为今后深入研究BmNPV PIF1在ODV经口感染中的作用奠定了基础。
- 黄金山黄金山
- 关键词:家蚕核型多角体病毒转录亚细胞定位
- 家蚕BmELAV-like RNA结合蛋白家族表达谱研究分析
- 多细胞生物中,转录、转录后和翻译水平调控在基因表达过程中具有重要作用。RNA结合蛋白(RNA binding protein, RBP)是一类重要的转录及转录后调控因子,主要通过一个或多个RNA结合区域,与单链或者双链R...
- 顾佳蕙Daniel,Adjibolosoo赵诣汪生鹏李木旺孙霞
- 关键词:转录后调控RNA结合蛋白家蚕表达谱
- 文献传递
- 环介导等温扩增技术的原理及其在农业中的应用
- 环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的能在恒定温度条件下实现核酸序列快速扩增的技术.由于该技术快速、便捷、高效、低成本等方面的优势,目前已...
- 蒋涛曾光远沈兴家
- 关键词:农业科学分子诊断基因检测环介导等温扩增技术
- 文献传递
- 家蚕滞育关联基因的研究进展被引量:2
- 2021年
- 昆虫滞育是受基因控制与外界环境多种因素影响的生物学过程,涉及基因众多,调控网络复杂,目前其分子机制仍未清晰。国内外滞育调控的相关研究多数基于家蚕、果蝇、麻蝇等模式昆虫。介绍了家蚕滞育关联基因的研究现状及进展,包括分类、生理功能、基因间互作、部分基因涉及的信号通路及研究热点等,为促进其在农林害虫的防治途径或天敌保护利用等方面的应用提供参考。
- 陈艳荣朱娟朱娟
- 关键词:家蚕滞育生物钟基因