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基因芯片分型中荧光标记引物的多重扩增及试验优化被引量：2: 2007年; 基因芯片技术以其平行高效多位点多态性分型的优势，在基础和临床研究中被广泛应用。然而，随着位点增多，扩增目的片段更繁琐，为了提高效率和降低成本，就需要在同一反应体系内进行多重扩增。而多重扩增的关键问题是，同一体系内引物对的最大化，并有效减少非特异扩增。目前，此环节可通过计算机辅助设计和尝试不同引物对组合解决。由于芯片分型以杂交信号强弱为检测指标，扩增片段要载有荧光剂，因此多重扩增必须考虑到荧光标记物——青色素（Cy3）的大分子位阻效应。但是，Cy3的存在不可避免地降低了PCR的效率，为此本研究对相关试验条件进行优化。; 李健丁志平曾婷文思远乔平张敏丽王升启; 关键词：基因芯片技术扩增片段试验条计算机辅助设计

感染/定植耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌住院患者周围环境中分离CRKP菌株的流行特征被引量：7: 2018年; 目的了解医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbidenes-resistant Klebisella pneumoniae,CRKP)的环境流行特点及菌株传播情况,追踪其传播途径。方法选择医院2017年6月-2017年10月4个重症监护室及病区的CRKP感染患者为研究对象,采用一次性棉拭子采集其周边环境物品如床单元、床旁仪器、医疗用品、医护人员衣服、手等标本送检鉴定,将其中的CRKP利用脉冲场凝胶电泳技术(Pulse Field Gel Electrophoresis,PFGE)进行同源性鉴定。结果在相关监护室及病区16例感染患者的周围环境中共采集微生物标本259份,分离鉴定出CRKP 39株,检出率为15.06%;CRKP分离物品以床单元10株占25.64%为主,其次为呼吸垫巾7株占17.95%;42株菌(含3株体液标本)PFGE结果显示,同源性>80%的菌株占83.33%(35/42)。结论医院环境中CRKP有主要的流行类型,可能存在环境的传播,提示应加强对ICU等重点部门的消毒隔离工作,重视环境物品的消毒及医护人员无菌操作,切断医院感染环境传播途径,防止CRKP在医院内的播散。; 白艳玲杜明梅刘伯伟闫中强李璐谢丽君贾宁姚宏武任世旺邢玉斌索继江丁志平刘运喜; 关键词：脉冲场凝胶电泳菌株

影响血气测定的分析前因素分析: 血气分析是现代医学检验领域中的重要检测项目,对危重病人的评估和抢救起着关键作用。正确处理好分析前阶段的每个步骤,对于获取准确的血气分析结果,为临床提供真实有效的信息起着至关重要的作用。; 丁志平白洁周玉; 关键词：血气分析影响因素; 文献传递

生物膜特效清洗剂Matrix^(TM)对呼吸机管路生物膜的清除效率评价被引量：7: 2011年; 目的评价生物膜特效清洗剂MatrixTM对呼吸机管路生物膜的清除效率。方法建立呼吸机管路生物膜模型,使用生物膜特效清洗剂MatrixTM和含酶清洗剂,按照推荐使用浓度完成清洗步骤,用生物膜活菌计数法和ATP生物荧光法评价生物膜特效清洗剂MatrixTM的清洗效果。结果使用生物膜特效清洗剂MatrixTM对呼吸机管路生物膜细菌清除效率达100.00%,ATP生物荧光法检测ATP降低率为99.19%;含酶清洗剂对细菌清除效率为98.08%,ATP生物荧光法检测ATP减少率为90.47%。结论生物膜特效清洗剂MatrixTM比酶清洗剂更能有效去除呼吸管路内生物膜。; 黄佩佳刘岩丁志平; 关键词：生物膜 ATP生物荧光法

部队医院多药耐药鲍氏不动杆菌主要流行克隆谱系的分析被引量：3: 2011年; 目的了解我国部队医院中多药耐药鲍氏不动杆菌的主要流行克隆谱系,揭示分子流行的趋势。方法基于鲍氏不动杆菌的靶标基因ompA、csuE和blaOXA-51-like设计2组特异性引物,并建立了基于序列分型的多重PCR方法;进一步选用该方法鉴定多药耐药鲍氏不动杆菌的主要流行克隆谱系。结果分离自我国6所部队医院的194株多药耐药鲍氏不动杆菌以Group 1序列型为主,所占的比例高达73.7%;除了Group 1序列型外,还发现了属于Group4、Group5、Group8、Group9、Group10序列型的菌株。结论我国部队医院的流行克隆谱系与欧洲克隆谱系Ⅱ具有高度的同源性;该实验研究中未发现属于Group 2和Group3的菌株,说明在我国部队医院中还未发现存在有属于欧洲克隆谱系Ⅰ和Ⅲ的菌株。; 董喆丁志平徐雅萍闫中强沈定霞; 关键词：多药耐药鲍氏不动杆菌多重聚合酶链反应

碱性清洗剂去除生物膜机制探讨被引量：8: 2012年; 目的探讨碱性清洗剂对去除生物膜机制和效果。方法建立模拟污染物胡克污染物模型和生物膜负载片,使用生物膜清洗剂和酶洗剂在其工作条件下去浸润模拟污染物,肉眼观察胡克污染物模型的污染物去除情况,显微电镜观察生物膜负载片生物膜去除情况,并细菌计数法评价不同清洗剂对生物膜去除效果。结果从胡克污染物模型中可以看出,碱性清洗剂对污染物和生物膜的去除作用机制是减弱物体表面黏合力,同含酶清洗剂作用机制不同,生物膜载片对比试验电镜结果可以看到,碱性清洗剂对生物膜是明显地剥离效果;通过细菌计数法可以看到,生物膜清洗剂碱性清洗剂对生物膜去除效果同阳性对照组NaOH一致基本能达到100.0%,普通含酶清洗剂对生物膜的清除效率只有40.0%,差异有统计学意义。结论碱性清洗剂通过减弱生物膜和物体表面黏合力作用完全清除生物膜,去污能力远远高于普通含酶清洗剂,在模拟试验中相比与含酶清洗剂能够显著清除生物膜。; 柴海荣黎晓晖杨丽雅张建辉陈彦丽孙称心郭杰河丁志平; 关键词：生物膜

高龄住院患者鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因的监测被引量：9: 2012年; 目的了解老年病区鲍曼不动杆菌临床分离株携带多重耐药相关基因的情况,为耐药性监测及感染控制提供依据。方法筛选解放军总医院2008-2010年自临床分离的120株不重复鲍曼不动杆菌,患者平均年龄85(65～95)岁。使用Whonet 5.6软件分析其对16种抗菌药物的耐药率;应用聚合酶链反应及测序方法检测10种耐药相关基因(blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1、intI1和intI2),依据耐药基因的检出情况,分析并命名相应的耐药基因谱(RGP)。结果上述120株鲍曼不动杆菌除了对多黏菌素B的敏感率超过90%以外,对其他15种抗生素均具有较高的耐药率(70.8%～97.5%);耐药相关基因blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1和intI1的阳性率分别为100%、81.7%、0.8%、10.8%、91.7%、81.7%、86.7%和83.3%,未检出blaOXA-24-like和intI2;共发现18种耐药基因谱,其中多重耐药谱RGP1(blaOXA-23-like+blaampC+armA+ISAba1+intI 1)所占的比例高达60.8%。结论老年住院患者中分离的鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因携带率较高,多重耐药现象非常严重;应积极、有效、合理地防控和治疗老年住院患者鲍曼不动杆菌感染,医院感染管理专职人员与临床医师对此应予以高度重视。; 董喆徐雅萍龚美亮丁志平闫中强陈黎明; 关键词：老年人鲍氏不动杆菌

老年慢性阻塞性肺疾病患者鲍氏不动杆菌的分子流行特征被引量：4: 2012年; 目的揭示医院老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中鲍氏不动杆菌分子流行的主要特征。方法筛选2009-2011年老年COPD患者中分离的57株鲍氏不动杆菌为试验菌株;使用Whonet5.6软件分析其药敏结果;应用基于序列分型的多重PCR方法鉴定鲍氏不动杆菌的主要流行克隆谱系;利用限制性内切酶ApaI对试验菌株基因组DNA进行酶切和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析;应用PCR及测序方法检测10种耐药相关基因,分析并命名相应的耐药基因谱。结果鲍氏不动杆菌除了对多黏菌素B的耐药率为8.8%外,对其他15种抗菌药物均具有较高的耐药率,为70.2%～98.2%;主要克隆谱系以RGP1序列型为主,所占的比例高达59.6%;在87.0%的相似性水平上,可大致分为18种PFGE图谱,其中主要型别为A型;共发现存在有15种耐药基因谱,其中多药耐药谱RGP1所占的比例高达52.63%。结论在老年COPD患者中分离的鲍氏不动杆菌主要的流行克隆谱系与欧洲克隆谱系Ⅱ具有高度的同源性;多药耐药相关基因的携带率较高,在具有不同遗传背景的鲍氏不动杆菌中存在有水平转移。; 丁志平邢玉斌徐雅萍董喆闫中强龚美亮刘运喜; 关键词：慢性阻塞性肺疾病鲍氏不动杆菌脉冲场凝胶电泳

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丁志平

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