佟巍 作品数:109 被引量:287 H指数:9 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 中国国际公共关系协会项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
SARS-CoV感染后人ACE2转基因小鼠肺组织一氧化氮合酶的变化 2008年 目的利用人血管紧张素转换酶2(ACE2)转基因小鼠模型研究一氧化氮(NO)在严重急性呼吸综合症(SARS)发病中的作用。方法用PUMC01株SARS-CoV感染野生型及人ACE2转基因小鼠,免疫印迹、免疫组化及分光光度法观察两组动物在感染后3、7d肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血清NO的变化。结果免疫印迹显示,在接种病毒后3d和7d的转基因小鼠肺组织iNOS蛋白密度明显增高。免疫组化显示,接种病毒后3d和7d转基因小鼠肺组织巨噬细胞增多,iNOS表达呈明显的阳性反应。生化测定血清NO结果显示,接种病毒后3d,与攻毒前及相同时间的野生型小鼠相比,NO水平明显升高。结论NO在SARS发病的病理生理过程中可能发挥重要的作用。 杨秀红 邓巍 鲍琳琳 于浩 蒋虹 佟巍 高虹 魏强 秦川关键词:严重急性呼吸综合征 一氧化氮 一氧化氮合酶 SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立 被引量:31 2006年 目的建立SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。方法巢式RT-PCR扩增SIV病毒RNAgag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEMT载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒。该质粒经限制性内切酶NotⅠ酶切后,进行体外转录,转录出的RNA产物(RS)纯化后10倍系列稀释,作出标准曲线,作为SIV病毒RNA荧光定量检测的外标准品。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100 copies/μL。结论制备的RS外标准品纯度高,SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。 丛喆 李兆忠 魏强 许琰 蒋虹 佟巍 卢圣栋 涂新明关键词:SIV 实时荧光定量RT-PCR SYBR 重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂预防治疗恒河猴感染SARS-CoV病毒的作用效果试验 [目的]评价重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂对预防治疗SARS—CoV病毒感染恒河猴的作用。[方法]10 只恒河猴随机分为2组,每组5只。分别为试验组(重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂)和对照组(空白干扰素)。分别在攻毒前19h... 高虹 魏强 涂新明 朱华 张扬清 鲍琳琳 邓巍 张兵林 孔琪 黄阑 蒋虹 丛喆 佟巍 刘亚莉 段招军 候云德 秦川关键词:实验动物 SARS 重组人干扰素Α2B 文献传递 RT-PCR方法在实验小鼠肝炎病毒检测中的应用 被引量:2 2004年 实验应用RT-PCR方法对来自不同单位、6个品系、不同等级的84只小鼠进行了MHV检测。结果显示:MHV阳性小鼠35只,阳性率为41.67%;其中普通级小鼠29只,阳性18只,阳性率为62.07%;SPF级小鼠55只,MHV阳性小鼠17只,阳性率为30.91%。 赖国旗 何明忠 谭毅 王胜 潘永全 韦克 何伏秋 蒋虹 佟巍 丛喆关键词:RT-PCR 小鼠肝炎病毒 SARS—CoV中和抗体保护恒河猴等感染SARS-CoV研究 [目的]阐明SARS病毒感染后能否再次感染,疫苗产生的抗体中长期保护效果,被动免疫是否真正安全有效等,为防治SARS提供实验依据。[方法] 实验分4组,分别为一组(SARS恒河猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月... 秦川 魏强 高红 涂新明 蒋虹 邓巍 鲍琳琳 朱华 佟巍 李国生 黄澜 刘亚莉关键词:SARS-COV 动物模型 中和抗体 文献传递 SHIV-KB9感染中国恒河猴动物模型的建立 被引量:4 2011年 目的为了进一步确证SHIV-KB9感染中国恒河猴的病毒浓度范围,测试动物对病毒的适应性,明确该动物模型的可重复性。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出4只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静脉感染实验猴,使用流氏细胞术、血常规、病毒分离、DNA-PCR和RT-PCR等方法确定实验猴是否被感染,以及感染后恒河猴体内病毒复制和免疫细胞损伤情况。结果实验猴的血浆病毒载量、病毒分离结果、CD4+/CD8+比值和CD4+T细胞数等证实,4.8×105 copies/mL以上浓度的SHIV-KB9病毒液能成功感染中国恒河猴。结论本研究进一步明确了SHIV-KB9感染中国恒河猴的有效病毒浓度范围,确定了SHIV-KB9病毒感染中国恒河猴的病毒学、免疫学的测定指标,成功的建立了SHIV-KB9/中国恒河猴动物模型。 王卫 刘强 许琰 冯育芳 丛喆 佟巍 蒋虹 杨贵波 魏强 秦川关键词:恒河猴 艾滋病 TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR法检测SIV/SHIV病毒RNA拷贝数方法的建立 目的建立TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)及SHIV病毒的RNA拷贝数。方法利用TaqMan探针,建立实时荧光定量RT-PCR方法,通过对本室SIV/SHIV病毒RNA定量外标准品... 许琰 冯育芳 王卫 丛喆 蒋虹 佟巍 魏强关键词:SIV 病毒载量 实时定量RT-PCR TAQMAN探针 文献传递 SIVp27抗原双抗体夹心ELISA检测方法的研究 被引量:4 2007年 目的建立检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用。方法使用ProteinA亲和层析柱纯化腹水中的SIVp27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记。经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA法。应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较。结果以稀释至20ug/mL的2E12为包被抗体、1:400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系。模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIVp27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒。结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础。 孙敏 魏强 梁成珠 佟巍 丛喆 蒋虹 涂新明关键词:SIV P27抗原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA SARS恢复猴和灭活疫苗免疫实验猴再次感染SARS-CoV研究 被引量:1 2006年 目的研究SARS-CoV实验感染恢复猴,以及灭活疫苗免疫猴对SARS—CoV再次感染的疾病状况。方法动物分四组,分别为SARS感染恢复动物组,灭活疫苗免疫不同时间2组和SARS模型对照组。动物分别接种病毒,1~7d进行病毒检测和血清学检测,7d后安乐处死动物,进行病理检测。结果实验感染SARS-CoV猴和灭活疫苗免疫猴均产生了中和抗体,猴体内SARS-CoV复制得到一定程度的抑制,病理变化也比SARS-CoV模型组轻。结论SARS-CoV感染恢复猴对SARS-CoV再次感染有一定抵抗作用;灭活疫苗免疫是预防实验猴感染SARS—CoV的有效方法。 魏强 高虹 蒋虹 涂新明 邓巍 丛喆 朱华 佟巍 李国生 张连峰 秦川关键词:SARS-COV 灭活疫苗 恒河猴 食蟹猴 中和抗体 免疫酶染色法(IEA)检测小鼠肝炎病毒抗体方法的建立 被引量:1 1998年 IEA法检测小鼠肝炎病毒抗体方法的建立,并对ELISA法和IEA法检测小鼠肝炎病毒抗体的敏感性进行了比较。共检测小鼠血清197份,两种方法符合率为92.5%。结果表明,IEA法同ELISA法一样,是较为敏感的试验方法,具有简单快速的优点。 佟巍 吴小闲 王欣关键词:鼠肝 肝炎病毒 染色法 免疫 IEA 全文增补中