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冯瑞强: 作品数：12 被引量：43H指数：3; 供职机构：江门市人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金南方医科大学南方医院院长基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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乳鼠成骨细胞酵母双杂交cDNA文库构建被引量：1: 2013年; 目的构建乳鼠成骨细胞的酵母双杂交cDNA文库。方法用TRIzol法提取乳鼠成骨细胞总RNA，按照SMART cDNA Library Construction Kit （CLONTECH）说明书反转录合成双链cDNA，Spin Column去除短片段，然后用同源重组的方法将双链cDNA和PGADT7-rec载体共转化到酵母细胞Y187中，建立文库并计算文库滴度。结果提取的总RNA的A260／A280为1．99，琼脂糖凝胶电泳示28SrRNA、18SrRNA2条带，且28S与18S带亮度比值约为2。酵母文库库容为1．68×10^7，重组率为100％。插入片段PCR检测提示大小分布为1．5-4．0kb，平均长度约为3．0kb。结论乳鼠成骨细胞酵母双杂交cDNA文库构建成功。; 林振江建明袁亮冯瑞强付兆宗孟越杨德鸿; 关键词：成骨细胞 CDNA文库酵母双杂交

CITED1 63-84氨基酸片段是影响其细胞定位与成骨作用的关键区域被引量：1: 2013年; 目的生物信息学分析发现CITED1 63-84氨基酸片段为其重要的功能片段,进一步研究CITED1 63-84氨基酸片段突变(丝氨酸突变为丙氨酸)是否影响其进核及成骨分化,探讨其在成骨分化过程中的生物学调控功能。方法 CITED1 63-84突变质粒(9S>A),CITED1质粒及空白质粒分别转染MC3T3-E1细胞,培养2 d,用100 nmol/L PTH(1-34)刺激细胞,行细胞免疫荧光实验,共聚焦镜下观察细胞内CITED1位置变化。将CITED1 63-84突变质粒(9S>A),CITED1质粒及空白质粒按相应体系转染MC3T3-E1细胞,分为两组,一组成骨诱导4周,另一组成骨诱导基础上进行10 nmol/L PTH(1-34)间歇刺激(每48 h刺激4 h)4周,测ALP酶活性及Ca离子浓度并进行ALP及茜素红染色。行RT-PCR实验分析成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC的表达量。结果 PTH(1-34)可促进CITED1进核,将CITED1氨基酸63-84片段突变后,可明显抑制该反应。4周成骨诱导后,CITED1过表达明显抑制成骨细胞分化,ALP及Ca离子浓度明显低于对照组,而CITED1突变质粒(9S>A)过表达ALP及Ca离子浓度明显高于CITED1组,与对照组基本相同。进一步研究表明,CITED1过表达抑制PTH(1-34)诱导的成骨细胞分化,而CITED1突变质粒(9S>A)可逆转该反应。ALP染色及茜素红染色也验证了以上结论。RT-PCR结果提示:CITED1突变质粒(9S>A)过表达成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC明显高于CITED1质粒过表达。结论 CITED1 63-84片段丝氨酸为其重要的功能位点,可影响其细胞进核及成骨分化。; 林振袁亮孟越冯瑞强付兆宗杨德鸿; 关键词：PTH 成骨分化基因突变

鲑鱼降钙素治疗老年男性骨质疏松症的临床疗效观察被引量：2: 2015年; 目的：观察鱼降钙素治疗老年男性骨质疏松症的临床疗效。方法：以2012年8月-2014年12月我院收治的136例确诊为骨质疏松症的老年男性患者为研究对象,使用我院新引进的法国DEXA骨密度检测仪（MEDIX 90）以及现有的大型先进仪器如CT机、MRI等对患者进行检测,随机将所有患者分为对照组以及观察组。对照组采用口服钙尔奇的单纯治疗法,观察组使用鲑鱼降钙素联合口服钙尔奇的治疗方法,并将治疗前后的数据录入统计学软件进行分析。结果：观察组和对照组两组的血钙、血磷及碱性磷酸酶等生化指标均有所改善,差异无统计学意义（P〉0.05）,具有可比性;观察组腰椎骨密度均值在治疗后3个月有显著提高,对照组无明显变化,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组的疼痛缓解率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组生活质量改善情况明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：使用鲑鱼降钙素联合口服钙尔奇能够有效治疗老年男性骨质疏松症,值得临床推广。; 冯嘉威袁金菊何伟东冯瑞强容锡沧; 关键词：老年男性骨质疏松症鲑鱼降钙素

信号选择性甲状旁腺素模拟肽影响小鼠成骨细胞的基因表达谱分析: 背景:　　自从Pommer在1885年提出骨质疏松以来，人们对骨质疏松的认识也随着历史的发展和技术的进步而逐渐深化。早年一般认为全身骨质减少即为骨质疏松，美国则认为老年骨折为骨质疏松。直到1990年在丹麦举行的第三届...; 冯瑞强; 关键词：甲状旁腺素成骨细胞 WNT信号传导通路基因表达谱

开放植骨结合负压封闭引流治疗感染性骨不连的临床研究被引量：3: 2016年; 目的通过对比分析使用开放植骨结合负压封闭引流与传统方法治疗感染性骨不连的疗效,探讨感染性骨不连的治疗方法。方法回顾性分析2009年3月~2014年5月本院收治的43例胫骨感染性骨不连患者的临床及随访资料,按不同的治疗方法,分为开放植骨结合负压封闭引流组（22例）、传统方法治疗组（21例）,总结两组患者伤口愈合时间、骨折愈合时间、住院治疗费用、手术次数、功能恢复等情况,进行比较分析。结果开放植骨结合负压封闭引流组的伤口愈合时间及骨折愈合时间比传统方法治疗组短,而住院治疗费用、手术次数比传统方法治疗组少,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。负压封闭引流组功能恢复优良率为72.72%,传统方法治疗组优良率为38.10%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论开放植骨结合负压封闭引流方法在治疗感染性骨不连方面有较好的疗效,能使患者获得更好的功能恢复,值得临床应用。; 许国华黄新宇何伟东许鸿灏冯瑞强容锡沧; 关键词：不愈合负压封闭引流外固定器

综合治疗绝经后骨质疏松症的疗效观察被引量：29: 2015年; 目的比较观察常规治疗和骨质疏松治疗仪治疗绝经后骨质疏松症患者的临床疗效。方法收集70例绝经后骨质疏松症女性患者,按随机数字分为常规组和综合组,各35例。常规组采用口服钙尔奇D咀嚼片和阿仑磷酸钠;综合组采用口服钙尔奇D咀嚼片、阿仑磷酸钠并配合骨质疏松治疗仪进行治疗,疗程为6个月,观察治疗前后患者骨密度的改变和骨痛缓解情况。结果两组患者治疗前的L2-4、股骨颈、股骨大转子骨密度无显著性差异（P〉0.05）;两组患者治疗前后比较,L2-4、股骨颈、股骨转子骨密度均有不同程度增加（P〈0.05）,治疗后综合组患者骨密度高于常规组（P〈0.05）。在临床疗效方面,综合组和常规组患者的总有效率分别为93.94%、84.38%,两组临床疗效比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论骨质疏松治疗仪结合常规药物治疗可以明显缓解绝经后骨质疏松症患者的骨痛,提高腰椎骨密度,优于常规药物治疗,值得临床推广应用。; 冯嘉威谢国平何伟东梁寒洁冯瑞强容锡沧; 关键词：骨质疏松治疗仪绝经后骨质疏松症骨密度钙尔奇D 阿仑磷酸钠

信号选择性甲状旁腺素模拟肽成骨效应的Wnt信号通路研究被引量：2: 2012年; 目的探讨信号选择性甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)模拟肽在促进小鼠成骨细胞成骨过程中对Wnt信号传导通路相关因子的影响,研究其成骨的作用机制。方法取2～3日龄C57BL乳鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,倒置相差显微镜观察形态变化,ALP染色和茜素红染色对成骨细胞进行鉴定。取贴壁生长的第1代细胞,随机分为4组:PTH(1-34)组、G1R19(1-34)组和G1R19(1-28)组分别加入10 nmol/L PTH(1-34)、10 nmol/L G1R19(1-34)、100 nmol/L G1R19(1-28),空白对照组加入等体积的0.1%三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)。实时定量PCR法检测Wnt信号通路相关基因β-catenin、骨钙素(osteocalcin,OC)、Wnt2、Wnt5b、Wnt7b基因的表达。结果倒置相差显微镜观察示,培养7 d可见细胞排列紧密,为三角形或多边形,呈铺路石样;细胞培养14 d ALP染色可见细胞质中出现蓝染颗粒,成骨诱导培养28 d茜素红染色可见细胞外基质中红色矿化结节形成。实时定量PCR检测发现,各处理组OC、Wnt5b mRNA相对表达量均高于空白对照组,Wnt2 mRNA相对表达量均低于空白对照组;PTH(1-34)组、G1R19(1-34)组Wnt7b mRNA相对表达量高于空白对照组,G1R1(91-34)组高于PTH(1-34)组和G1R1(91-28)组;PTH(1-34)组β-cateninmRNA相对表达量显著高于空白对照组;以上差异均有统计学意义(P<0.05)。其余各因子mRNA表达各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在所检测的Wnt相关因子中,PTH(1-34)和G1R19(1-34)对经典Wnt信号因子作用明显,G1R19(1-28)对非经典Wnt信号因子作用明显。; 冯瑞强江建明李俊青付兆宗林振袁亮杨德鸿; 关键词：甲状旁腺素 WNT信号传导通路

甲状旁腺素模拟肽对脊柱融合的影响: 2012年; 目的观察间断皮下注射信号选择性甲状旁腺素（PTH）模拟肽对大鼠脊柱融合的影响。方法32只雄性SD大鼠行后外侧路脊柱融合术，术后即用FFH模拟肽（Gly2，Arg^19）人甲状旁腺素（hPTH）（1—28）[“G1，R19（1～28）”]、hPTH（1—34）币口（Gly1，Arg19）hPTH（1～34）[“G1，R19（1—34）”]，经手法触诊、X线、融合节段骨矿含量（BMC）和骨密度（BMD）测定、显微CT（Micro—CT）和组织学综合评价各模拟肽对脊柱融合区骨组织生长的影响。结果手法触诊G1，R19（1～28）组、hPTH（1—34）组、G1，R19（1—34）组和空白对照组融合率分别为37．5％、50．0％、87．5％和50．0％；X线评分在G1，R19（1～28）组、hPTH（1～34）组、G1，R19（1～34）组和对照组分别为（1．88±1．36）、（2．58±1．32）、（3．88±0．75）和（2．54±1．32）分；融合节段RMC证实G1，R19（1～34）组明显高于其他3组（P〈0．01）；Micro—CT分析证实融合区骨体积在G1，R19（1～28）组、hPTH（1—34）组、G1，R19（1～34）组和对照组分别为（294．358±49．481）、（343．340±106．744）、（401．010±97．120）和（339．790±44．200）mm2。结论间断皮下注射G1，R19（1～34）能够增加大鼠后外侧路脊柱融合率及融合区的体积，且比hPTH（1～34）的效果更为显著。; 江建明张兆飞付兆宗冯瑞强李俊青杨德鸿; 关键词：脊柱融合甲状旁腺素骨移植

蛋白激酶C激活的荧光共振能量转移分析被引量：5: 2011年; 目的当前,检测蛋白激酶C(PKC)激活的方法尚缺乏灵敏性或直接性,这里我们提供了一种新的直接而灵敏的方法——利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术来构建检测PKC激活的方法。方法将表达PKC激活的报告分子(CKAR)的质粒单独转染或与表达甲状旁腺素1型受体(PTHR1)的质粒共转染HEK293细胞,培养72 h后用激光共聚焦显微镜检测FRET的变化,并以此判断甲状旁腺素或佛波酯是否激活PKC。结果在只转染CKAR质粒的HEK293细胞,佛波酯降低了CKAR分子的FRET效率,并使青色荧光与黄色荧光的比值(C/Y)增加,而PTH(1-34)未能改变C/Y的值。在共转染了CKAR和PTHR1质粒的HEK293细胞,PTH(1-34)则使C/Y增加。结论PKC激活报告分子可用于检测PKC的激活,该方法也可作为PKC相关信号转导的实验平台。; 李俊青江建明冯瑞强蒋晖闫文娟杨德鸿; 关键词：蛋白激酶C 荧光共振能量转移

硫化氢抑制前列腺癌骨转移PC-3细胞增殖和侵袭的体外研究被引量：1: 2013年; 目的探讨硫化氢对前列腺癌骨转移PC-3细胞增殖和侵袭的影响及其可能机制。方法分别用0、1、2、4 mmol/LNaHS(硫化氢载体)作用前列腺癌骨转移PC-3细胞36 h,CCK-8比色法法检测细胞存活率,transwell法检测细胞侵袭能力,ELISA法检测细胞MMP-2和MMP-9分泌能力,Western-Blot法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果硫化氢对PC-3细胞生长的影响:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1.0 mmol/L NaHS组细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,细胞存活率降低,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞的生长,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。硫化氢对PC-3细胞侵袭的影响:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1 mmol/L NaHS组细胞侵袭数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,细胞侵袭数减少,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞的侵袭,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。ELISA法检测PC-3细胞MMP-2和MMP-9分泌能力:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1 mmol/L NaHS组细胞MMP-2和MMP-9分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,MMP-2和MMP-9分泌量减少,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞MMP-2和MMP-9的分泌,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Western blot检测PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白表达:1、2、4 mmol/L NaHS组,Bcl-2表达降低,Bax表达升高,呈浓度依赖性。结论 2 mmol/L浓度以上的NaHS能影响Bcl-2和Bax表达和MMP-2 MMP-9分泌来抑制PC-3细胞的生长和侵袭。; 黄新宇杨远良许国华容锡沧冯瑞强; 关键词：硫化氢前列腺癌骨转移 PC-3细胞增殖

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