原霖 作品数:68 被引量:328 H指数:11 供职机构: 中国动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家科技基础性工作专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
鉴别布鲁菌S2疫苗株的双重实时荧光PCR方法的建立与应用 被引量:2 2021年 为了建立一种鉴别布鲁菌S2疫苗株和其他种类布鲁菌的双重实时荧光PCR检测方法,通过查阅文献,分别设计了特异性扩增布鲁菌IS711插入序列和S2疫苗株缺失序列的2套引物探针,并对引物和探针浓度进行了优化,对其敏感性、特异性和重复性进行了评价,同时,使用该方法对不同类型的临床样品进行了检测。结果表明,用该方法对2种阳性质粒标准品的最低检测限均为10 copies/μL;该方法能特异性鉴别S2疫苗株,其他非布鲁菌的细菌核酸均未有特异性的扩增曲线;批内和批间重复变异系数均小于3%,重复性良好。对112份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法,并可以成功对S2疫苗株的核酸进行鉴别。该研究建立的鉴别布鲁菌S2疫苗株的双重实时荧光PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,具有较好的临床应用价值。 董浩 董浩 原霖 赵明海 刘巍 沈子莹 徐阳 王传彬 王传彬关键词:布鲁菌 实时荧光PCR 猪群健康动态监测与保健 被引量:4 2012年 对在规模化猪场中,如何实施猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、猪圆环病毒病4种垂直传播性疫病的动态监测进行详细阐述。主要采取健康猪群的病原学监测、血清学监测和发病猪群的确诊3种方式,同时根据4种疫病感染猪群的不同特点,明确监测猪群的类型、年龄,检测样品和检测方法,采样数量和时间,为规模化猪场的疫病防控和净化提供参考。 杨汉春(策划) 孙德林(策划) 张金辉(执行) 顾小雪 原霖 遇秀玲 翟新验 田克恭关键词:规模化猪场 猪圆环病毒3型感染的流行情况与检测方法研究进展 被引量:9 2019年 猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)是猪群中流行的一种新型猪圆环病毒。2016—2017年,世界范围陆续报道在猪群中发现PCV3,包括美国、中国、美国、韩国、巴西、波兰和意大利等。PCV3感染多见于具有皮炎肾病综合征(PDNS)和繁殖障碍症状的猪群,目前病毒尚未分离成功。本文综述了已报道的PCV3在世界范围内的流行情况,介绍了当前研究的PCV3分子和血清学诊断方法。 刘颖昳 周智 关婕葳 原霖 侯伯 赵柏林 王传彬 杨林核酸标准物质研究现状 被引量:13 2014年 以核酸扩增为基础的分子诊断技术越来越广泛的应用于医学研究、出入境检验检疫、疫病诊断等领域,核酸标准物质是保证体外诊断检测数据和结果准确一致的重要材料。作者介绍了国内外核酸标准物质的发展历史、研究现状及面临的挑战,展望了核酸标准物质未来发展方向。 原霖 韩焘 翟新验关键词:核酸扩增技术 分子诊断 猪感染埃博拉病毒的研究进展 2015年 埃博拉病毒是一种对人类以及灵长类动物高致死性的病毒,其分为扎伊尔型、苏丹型、本迪布焦型、塔伊森林型和莱斯顿型5个型,其中2009年在猪身上发现了对人不致病的埃博拉病毒,这使得人们重新认识埃博拉病毒。本文就猪感染埃博拉-莱斯顿型病毒(REBOV)的发现、流行病学以及猪感染其他亚型埃博拉病毒的情况进行综述,为进一步研究和防控猪感染埃博拉病毒提供思路。 韩焘 原霖 王静 刘颖昳 翟新验关键词:埃博拉病毒 禽流感病毒核酸检测用定性标准样品的研制 被引量:1 2021年 本研究以禽流感病毒经典毒株A/turkey/Wisconsin/1/1966(H9N2)为原料,通过SPF鸡胚繁殖、外源病毒检测、灭活、冻干和分装等步骤,最终制备成功禽流感病毒核酸检测用定性标准样品。采用荧光定量RT-PCR方法对标准样品进行均匀性评估、稳定性监测和合作定值,并进行了初步临床试用。结果显示,所制备的标准样品纯净、均匀,无外源病毒污染;标准样品在-20℃、4℃、25℃、37℃环境下可分别稳定保存12个月以上、60 d、7 d和3 d;9家单位合作定值结果一致,均为禽流感病毒阳性;临床试用结果良好。上述结果表明,所制备的标准样品可用于禽流感病毒核酸检测用对照品、质量控制以及试剂盒检测方法评价等工作。 刘玉良 王乃迪 高晓艺 黄袁慧 陈玉红 刘洋 顾小雪 原霖 杨林 辛盛鹏 王传彬关键词:禽流感病毒 核酸 猪繁殖与呼吸综合征鉴别诊断技术的研究进展 被引量:4 2016年 当前,猪繁殖与呼吸综合征在我国猪群中的流行现状十分复杂,毒株种类繁多,包括美洲型和欧洲型,美洲型中又包括经典株和高致病性变异株,同时多种弱毒疫苗的使用干扰了该病的诊断。本文对我国PRRSV基因型的流行现状、PRRSV疫苗使用情况进行了概述,并分别对美洲型和欧洲型、美洲型经典株和美洲型变异株、野毒和疫苗毒的鉴别诊断技术进行了分析,为我国猪场有效诊断和防控本病提供参考。 顾小雪 原霖 倪建强 吴佳俊 翟新验 王传彬 刘金华关键词:猪繁殖与呼吸综合征 伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立 被引量:23 2017年 为了建立伪狂犬病病毒(PRV)微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)的检测方法,以伪狂犬病病毒gB基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR方法。对ddPCR反应中的引物浓度、探针浓度、退火温度进行了优化。对建立的ddPCR方法的特异性和敏感性也进行测定,并且应用于临床样品的检测。结果表明,ddPCR的最佳引物浓度为0.9μmol·L^(-1),探针浓度为0.25μmol·L^(-1),退火温度为60℃。ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.998,显示呈良好的线性关系。检测限为6.1copies·μL^(-1),比荧光定量PCR(Real Time PCR,qPCR)的检测限低,变异系数为2.81%,与其他病毒无交叉反应。通过对临床样品的检测,与病毒分离比较,ddPCR方法的敏感性为87.5%,特异性为96.2%,符合率为97%。结果表明新建立的ddPCR方法,敏感性高、特异性强,可用于伪狂犬病病毒的定量检测。 陈亚娜 王静 訾占超 亢文华 汪葆玥 倪建强 原霖关键词:伪狂犬病病毒 英国OIE参考实验室介绍与启示 2017年 目前,英国拥有的世界动物卫生组织(OIE)参考实验室数量居世界前列,其为欧洲乃至全球的动物疫病防控工作发挥了重要的作用。本文介绍了英国OIE参考实验室的组成、构架、主要职能、经费来源与运行管理等体制概况,阐述了其政府支持、交流合作、人才队伍与科研能力等体制优势,分析了对我国的借鉴意义,如合理布局、严控资格条件、完善运行机制、加强国际合作等,以期对我国参考实验室的建立与管理工作提供参考。 原霖 韩焘关键词:OIE 一起猪圆环病毒病的诊断和防治 被引量:1 2019年 猪圆环病毒是猪场常见的免疫抑制病,感染后常导致疫苗免疫效果差,甚至免疫失败。该病常与其他病毒病混合感染,且感染该病后易继发其他细菌性疾病,使疫病控制变得困难与复杂。近年来,猪圆环病毒病单独致病的病例逐渐增多,症状和病理变化更加典型,具有较高的致死率,应引起足够的重视。(一)发病情况北京房山某猪场,存栏210头. 李晓霞 亢文华 原霖 王睿男 韩焘关键词:症状 致死率 病毒 猪场 免疫抑制