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大肠杆菌对氟苯尼考分子耐药机制的研究: 利用原核表达体系对贡献大肠杆菌对氟苯尼考、氯霉素及甲砜霉素交叉耐药的floR基因进行表达研究.将克隆到pGEX-4T-2表达载体的floR基因片段在BL21-coden plus(DE3)-RP中诱导表达.SDS-PAG...; 吴蓓蓓杜向党夏春吴聪明沈建忠; 关键词：氟苯尼考原核表达蛋白定位大肠杆菌; 文献传递

氟苯尼考耐药菌的构建及大肠杆菌中FloR蛋白定位被引量：4: 2008年; 通过对floR基因序列的分析,将扩增的包含floR基因上游调控序列及下游终止序列的约1 550 bp DNA片段克隆到pGEM-T easy载体上,成功构建了pGEM-floR质粒,将质粒转入JM109中,药物敏感性试验显示构建的pGEM-floR/JM109基因工程菌对氯霉素和氟苯尼考高度耐药,对四环素和庆大霉素敏感。本试验成功构建了一个基因背景清楚且对氟苯尼考耐药的细菌模型,排除了细菌中其他氟苯尼考耐药基因或泵出蛋白对floR基因贡献细菌耐药表型及进一步试验的影响。分别提取CVM1841、pGEM-floR/JM109、pGEM/JM109和JM109膜蛋白,运用实验室制备的鼠抗GST-FloR1抗体进行免疫印迹反应,蛋白定位显示FloR蛋白位于细菌的细胞膜上。本试验结果证实floR基因编码的蛋白位于细胞膜,并贡献细菌对氯霉素和氟苯尼考的交叉耐药性。; 吴蓓蓓杜向党; 关键词：氟苯尼考基因克隆蛋白定位

大肠杆菌对氟苯尼考分子耐药机制的研究: 利用原核表达体系对贡献大肠杆菌对氟苯尼考、氯霉素及甲砜霉素交叉耐药的floR基因进行表达研究。将克隆到pGEX-4T-2表达载体的floR基因片段在BL21-coden plus(DE3)-RP中诱导表达。SDS-PAG...; 吴蓓蓓杜向党夏春吴聪明沈建忠; 关键词：氟苯尼考原核表达蛋白定位; 文献传递

牛源致病性大肠杆菌耐氟苯尼考floR基因的克隆与序列分析被引量：11: 2005年; 对临床分离的12株牛腹泻大肠杆菌进行了血清型鉴定,毒力因子分析和MICs值测定。利用PCR方法对上述致病性大肠杆菌进行了floR基因的检测,其中5株floR阳性。对其中的3株大肠杆菌的耐氟苯尼考floR基因进行了克隆和序列分析。结果表明,克隆的floR基因所推倒的氨基酸序列与其他12-跨膜外输泵家族在共同的基序上是保守的,在克隆的floR序列与已报道的floR序列间仅存在1个或2个氨基酸替代。; 杜向党吴蓓蓓沈建忠; 关键词：致病性大肠杆菌氟苯尼考血清型鉴定 PCR方法牛腹泻外输泵

牛源致病性大肠杆菌floR基因的克隆、表达及其抗体的制备被引量：1: 2008年; 将耐氟苯尼考大肠杆菌的floR基因部分基因片段插入pGEX-4T-2原核表达载体中,构建以BL21(DE3)Codon Plus为宿主菌的原核表达体系。通过优化诱导条件,确定了floR1基因能在pGEX/BL21(DE3)codon plus中高效表达,且表达的重组蛋白为包涵体形式。对包涵体进行溶解复性后,将复性融合蛋白过GST亲和层析柱得到纯化的GST-FloR1融合蛋白。并以GST-FloR1融合蛋白为抗原免疫小鼠,成功制备出抗GST-FloR1融合蛋白的抗体。抗体的制备为FloR蛋白定位及其对氟苯尼考药物泵出功能抑制的研究奠定了基础。; 吴蓓蓓沈建忠; 关键词：氟苯尼考基因克隆原核表达

抗体对大肠杆菌氟苯尼考主动外排泵的影响及临床耐药菌株监测方法的建立: 自从抗菌药在临床上使用以来，就在人类和动物感染性疾病治疗中起到了重要的作用。但是，随着抗生素和化疗药物的发展以及在临床上的广泛应用和滥用，尤其是兽医临床和饲料中的滥用，造成世界范围内耐药菌株迅速增加，导致抗生素效力逐渐下...; 吴蓓蓓; 关键词：氟苯尼考主动外排泵大肠杆菌耐药性; 文献传递

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吴蓓蓓