吴鹏
- 作品数:15 被引量:29H指数:3
- 供职机构:太和医院更多>>
- 发文基金:湖北省教育厅重点项目湖北省教育厅资助项目十堰市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 靶向人RIP RNAi真核表达载体构建及在人肝癌细胞Huh7细胞中的表达被引量:2
- 2011年
- 目的:构建靶向人RIP的小分子干扰RNA(siRNA)真核表达载体(pSUPERpuro-RIP),在Huh7细胞系中瞬时表达后,检测其对RIP的沉默效果。方法:设计4对含RIP mRNA特异性序列的60 nt DNA链,通过基因克隆技术将其插入真核表达载体pSUPER-puro,构建重组pSUPERpuro-RIP siRNA载体,以EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及测序验证其正确性。再瞬时转染Huh7细胞,Western blot检测RIP蛋白表达。结果:酶切测序证实载体构建成功,无碱基突变。Western blot结果表明pSUPERpuro-RIP siRNA在Huh7细胞系中有较好的沉默效果。结论:成功构建了靶向人RIP基因的siRNA载体pSUPERpuro-RIP siRNA。
- 吴鹏孙竞李晓强龚克
- 关键词:RIP真核表达载体
- 解脲脲原体及其生物群与泌尿生殖道疾病间的关系被引量:2
- 2006年
- 目的:探究解脲脲原体及其不同的生物群与各类泌尿生殖道疾病间的关系。方法:通过液体培养法对260份泌尿生殖道标本中解脲脲原体感染的情况进行检测,并针对其多条带蛋白基因设计引物,通过聚合酶链反应将检测到的解脲脲原体进行分群。结果:宫颈炎和习惯性流产、早产患者中解脲脲原体的分离阳性率明显高于正常对照组(P<0.01);但不孕症组差异无显著性(P>0.05)。通过分群研究发现,在正常人和不孕症患者中主要以生物群1型感染为主,而宫颈炎患者与习惯性流产、早产患者中分离株主要为生物群2型。结论:解脲脲原体是宫颈炎和习惯性流产、早产的重要致病因素,其生物群2型与这两类疾病的发生密切相关。
- 吴鹏孙竞朱名安李蓓
- 关键词:解脲脲原体泌尿生殖道生物群
- 肝硬化患者血清NO、NOS、IL-6和IL-8含量分析被引量:2
- 2005年
- 吴鹏郭建华朱名安周有利孙竞
- 关键词:肝硬化NONOSIL-6IL-8
- 解脲脲原体多条带抗原在大肠埃希菌中的表达和重组抗原的抗原性分析被引量:1
- 2009年
- 目的利用大肠埃希菌体外表达系统克隆、表达解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)多条带抗原(MB抗原)并对其抗原性进行分析。方法将MB抗原基因的5′端保守性序列克隆到Gateway系统表达载体pDEST17上,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。通过载体携带的6×His标签,纯化体外表达重组蛋白。并将重组蛋白与临床感染Uu的患者血清反应检测重组蛋白的抗原性。结果DNA序列分析证明MB抗原基因5′端414 bp的保守序列成功克隆至表达载体上,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达的重组蛋白与MB抗原大小符合。免疫印迹结果表明,体外重组表达的MB抗原能够与Uu感染的患者血清反应,提示其抗原性良好。结论解脲脲原体MB抗原的体外表达及其良好的抗原性,有助于建立Uu感染的血清学检测方法。
- 孙竞吴鹏李蓓吴均竹
- 关键词:解脲脲原体抗原性
- 消化系肿瘤患者的血浆同型半胱氨酸测定被引量:10
- 2003年
- 孙竞吴鹏张吉才
- 关键词:消化系肿瘤血浆同型半胱氨酸
- 解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条的制备被引量:1
- 2010年
- 目的:获得抗解脲脲原体外膜多条带蛋白(MB蛋白)的多克隆抗体,制备能够用于解脲脲原体检测的上转换发光免疫层析试纸条。方法:以体外表达的解脲脲原体外膜MB蛋白N端保守性序列为抗原,免疫小鼠制备抗MB蛋白的抗体,ELISA检测免疫动物血清抗MB抗体滴度,并以小鼠抗体标记上转换发光体颗粒(UCP颗粒),制备能够检测解脲脲原体的上转换发光免疫层析试纸条。结果:解脲脲原体多条带蛋白免疫动物血清抗MB的IgG抗体滴度均超过1∶25600,以此抗体为基础建立的解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条能够识别1~200μg/L的解脲脲原体MB抗原。结论:初步制备的上转换发光免疫层析试纸条能够检测解脲脲原体。
- 孙竞郭建华李蓓周蕾吴鹏
- 关键词:解脲脲原体免疫血清
- 医院内真菌感染的病原种类和耐药性分析被引量:5
- 2012年
- 目的研究某教学医院侵袭性真菌感染的发病率、耐药性和病原分布特点,为临床医师合理用药提供科学依据。方法回顾分析2008-2010年住院患者真菌培养的检出率、标本来源、菌种分布及其对常见抗真菌药物的耐药性。结果医院内侵袭性真菌感染近3年的检出率19.32%,2008-2010年真菌检出率呈逐年上升的趋势,2008与2009年、2009与2010年差异有统计学意义(χ2=7.61、69.33,P<0.05);感染部位以呼吸道最多,其次为泌尿道;检出的真菌种类以假丝酵母菌属为主,约占99.78%,且白色假丝酵母菌居多,占49.04%。白假丝酵母菌和热带假丝酵母菌对三唑类药物敏感性仍较好,光滑假丝酵母菌及其他两种真菌则对三唑类药物耐药率较高,所有菌株对两性霉素B均较敏感。结论白色假丝酵母菌仍是医院内侵袭性真菌感染的主要病原菌,临床应根据药物敏感试验结果合理使用抗生素,防止侵袭性真菌的发生,延缓其耐药性的进一步发展。
- 孙竞吴鹏孙翼张吉才杨宏伟
- 关键词:医院内真菌感染病原分布耐药性
- 血浆1,3-β-D葡聚糖测定在肺部真菌感染诊断中的价值被引量:1
- 2011年
- 目的探讨血浆1,3-β-D葡聚糖测定(G试验)在肺部真菌感染的诊断价值。方法以十堰太和医院2009年7月~2010年10月在呼吸内科、ICU、神经外科和神经内科住院的肺部感染患者为研究对象,分肺部真菌感染组(真菌组)和非真菌感染组(非真菌组),以太和医院体检中心健康体检者为健康对照组(对照组)。测定三组病人的血浆1,3-β-D葡聚糖值(G试验),通过受试者工作特征(RoC)曲线确定G试验最佳临界值,计算其ROC曲线下面积,结合痰真茼涂片及培养,比较三项检查的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和ROC曲线下面积,评价G试验检壹在肺部真菌感染诊断中的应用价值。结果真菌组、非真菌组和对照组血浆1,3-pD葡聚糖值分别为:52.03±50.98,6.71±5.49,6.63±4.27pg/ml,真菌组明显高于其他两组,差异有统计学意义(P〈0.05),后两组差异无统计学意义(P〉0.05)。通过ROC曲线下面积图确定20.591pg/ml为最佳临界值,其中真菌纽阳性66例,占68.8%;阴性30例,占31.2%。其相对应的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为68.8%,92.0%,94.3%和60.5%。G试验、痰涂片、痰培养三者ROC曲线下面积分别为0.957,0.689,0.591。G试验的灵敏度、特异度和诊断价值均高于痰涂片和痰培养。结论血浆1,3-β-D葡聚糖测定在肺部真菌感染中的诊断价值较高。
- 吴鹏孙翼孙竞
- 关键词:肺部真菌感染
- 解脲脲原体及其生物群与泌尿生殖道疾病间的关系
- 解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)是成人尤其是性成熟妇女泌尿生殖道常见的正常微生物之一,也是泌尿生殖道感染的重要原因。从表型和基因型上可将解脲脲原体分为2个生物群:微小脲原体(Ureapla...
- 吴鹏孙竞朱名安李蓓
- 文献传递
- 视网膜神经节细胞分化调控因子Math5的体外表达与纯化
- 2012年
- 目的体外克隆、表达视网膜神经节细胞分化调控因子Math5,并通过亲和层析的方法进行纯化获得重组表达的Math5蛋白。方法采用限制性内切酶双酶切系统将Math5基因克隆到表达载体pET28a上,并通过载体自身所带6×His标签,利用Ni-NTA纯化出相应的重组蛋白。结果 Math5基因432bp的序列成功克隆到pET28a载体上,通过Ni-NAT纯化出重组表达的Math5蛋白,其纯度为90%,浓度为1.0mg/mL。结论视网膜神经节细胞分化调控因子Math5蛋白的体外表达与纯化为体外蛋白诱导神经前体细胞向视网膜神经节细胞的分化提供蛋白。
- 孙竞吴鹏李蓓
- 关键词:视网膜神经节细胞