周春喜 作品数:11 被引量:12 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 北京市科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 更多>>
一种基于化学修饰辅助技术和阳离子交换色谱分离蛋白质N-端肽段的方法 蛋白质的末端序列是蛋白质的重要参数,不仅特异性高,而且与蛋白质的功能紧密相关。大多数蛋白质都具有独特的末端序列标签,通过末端的4至5个残基序列就可对其进行鉴定。蛋白质的N-端序列还可以确证蛋白质的N-端加工,如蛋氨酸残基... 周春喜 曹冬 杨兵 张养军 钱小红文献传递 基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法进行肌红蛋白的从头测序 2004年 Peptides were separated by reverse phase liquid chromatography (RPLC) from tryptic digest of myoglohin and sequenced by matrix-assisted laser desorption time of flight-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-TOFMS). The result showed the sequence coverage of myoglobin is up to 79.7%. 周春喜 张养军 李晓海 蔡耘 钱小红关键词:肌红蛋白 氨基酸 基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记定量蛋白质组学方法的建立与优化 被引量:4 2007年 建立了一种基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记,定量蛋白质组学研究方法,优化了影响标记效率的各种条件。在pH8.0的Na2B4O7/H3BO3缓冲体系中,当乙酸酐摩尔浓度25倍过量于肽段摩尔量,22℃反应30 min时,标记即可完全。对多对H6/D6-乙酸酐标记肽段在基质辅助激光解吸电离质谱中的动态范围及定量准确度进行了考察,并通过串联质谱分析确定了乙酰化位点。结果表明:在10倍和30倍动态范围内,线性关系良好(r=0.99,r=0.98),理论值和观测值的偏差分别为0.5%和20%。 刘新 应万涛 周春喜 蔡耘 钱小红关键词:定量蛋白质组学 生物质谱 化学修饰辅助的蛋白质组研究策略的建立与初步应用 本论文针对当前蛋白质组学研究中肽段混合物复杂、蛋白质末端信息难以获得和质谱鉴定可信度低等问题,将磺化修饰或同系物标记技术与色谱或凝胶电泳分离技术相结合,提出了蛋白质标签肽的富集、识别和鉴定的四种策略,并应用于蛋白质混合物... 周春喜关键词:蛋白质组 化学修饰 文献传递 基于生物质谱技术的磺酸化修饰策略及其在蛋白质组学中的应用 被引量:3 2007年 对近几年报道的磺化修饰策略及其应用进行了评述。通过磺化修饰在肽段上引入带负电荷的磺酸基,不仅可以诱导肽段离子的质谱裂解,得到以y系列离子为主的序列信息丰富的串联质谱图,有利于肽段从头测序,还可以改变被修饰肽段的电荷分布,通过离子交换色谱法分离富集磺化修饰的肽段,有助于蛋白质鉴定。 赵丽艳 周春喜 张养军 蔡耘 钱小红关键词:化学修饰 蛋白质组学 生物质谱 基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法进行肌红蛋白的从头测序 蛋白质的序列测定对于蛋白质的鉴定具有重要意义。传统的Edman降解测序法对样品纯度有很高的要求,而且操作比较繁琐。在蛋白质组研究中广泛采用串联质谱法测定蛋白质水解肽段的部分氨基酸序列(肽序列标签),通过数据库检索来鉴定蛋... 周春喜 张养军 李晓海 蔡耘 钱小红文献传递 磺化修饰结合离子交换色谱和生物质谱富集鉴定含组氨酸肽段 被引量:3 2009年 通过在肽段的N端引入磺酸基,从而使含组氨酸的肽段与其他肽段在pH<3.0的条件下产生电荷差异,建立了一种基于强阳离子交换色谱(SCX)结合生物质谱富集鉴定含组氨酸肽段的方法,并以含有组氨酸的标准蛋白质为模型,进行了方法学考察。结果表明,经N端磺酸化后,含组氨酸的肽段能有效地被阳离子交换色谱富集,且在肽的N端引入磺酸基促进了肽的裂解,使之产生简单而信息丰富的二级质谱图,从而得到完美的质谱鉴定结果。这说明磺化修饰结合强阳离子交换色谱用于含组氨酸肽段的富集鉴定是可行的,且具有在蛋白质组研究中应用的潜力。 曹冬 周春喜 张养军 韩春光 邓玉林 钱小红稀土金属标签在定量蛋白质组学中的应用研究 近年来,定量蛋白质组学主要采取以同位素亲和标签(ICAT,Isotope-coded affinity tags)试剂为代表的以质谱检测为核心的稳定同位素化学标记方法。但是受到同位素试剂合成困难,价格高等因素的制约。元素... 刘慧玲 张养军 周春喜 孟庆芳 钱小红文献传递 同系物标记结合凝胶电泳和质谱技术用于蛋白质N端肽鉴定及相对定量 被引量:1 2008年 通过酸酐同系物标记蛋白质的N-末端,经过凝胶电泳分离,使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定,建立了一种基于化学标记和质谱技术的、用于蛋白质的N-末端鉴定和相对定量新方法。标记后的蛋白质的N端肽以相差14 Da的成对峰形式在质谱中出现,而非N-末端肽则是以单峰呈现,从而实现了末端肽的特异性识别;通过端肽的信号强度对3种标记蛋白质的不同比例的混合溶液实现了相对定量分析。 赵丽艳 周春喜 张养军 刘新 蔡耘 钱小红关键词:化学修饰 电泳分离 蛋白质组学 化学修饰辅助技术在蛋白质组研究中的应用 被引量:1 2005年 介绍了化学修饰辅助技术在蛋白质组表达谱、比较蛋白质组、磷酸化蛋白质组、糖蛋白质组和酶蛋白质组研究中的应用,对当前蛋白质组研究中所用到的化学修饰辅助技术进行了评述。 周春喜 张养军 钱小红关键词:蛋白质组 表达谱 比较蛋白质组 磷酸化 糖基化