宋小红
- 作品数:38 被引量:47H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体
- 本发明公开了一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体,所述抗体通过克隆人源的抗炭疽PA抗原抗体的重链和轻链可变区基因,构建线性表达框,并转染于宿主细胞,通过对PA抗原结合活性和中和活性的筛选而获得。本发明公开的抗体对炭疽芽...
- 陈薇于长明迟象阳李建民徐俊杰刘威岑宋小红张军张晓鹏付玲
- 文献传递
- 埃博拉病毒截短型糖蛋白GPdmucin的表达与纯化
- 2017年
- 目的:确定黏蛋白区缺失的埃博拉病毒包膜糖蛋白(GPdmucin)的最佳表达系统,并获得纯化的GPdmucin。方法:从埃博拉病毒的包膜糖蛋白(GP)全长基因上扩增GPdmucin序列,构建至pET32a、pFast Bac1和pcDNA3.4三种不同表达系统的质粒中,分别在原核、昆虫和哺乳动物表达系统中进行表达,并用特异抗体鉴定表达情况。结果:原核系统表达的GPdmucin不稳定,活性差;在昆虫表达系统中,GPdmucin在细胞内以不溶形式表达;利用Expi293瞬时蛋白表达系统,GPdmucin在哺乳动物细胞中可溶性表达,Ni柱亲和层析获得的目的蛋白纯度达90%以上,且与特异抗体具有很好的结合活性。结论:获得哺乳动物细胞表达系统表达的GPdmucin蛋白,将用于GPcl的制备、GP抗体筛选、疫苗效果评价及病毒致病机理的研究。
- 范鹏飞迟象阳宋小红房婷吴诗坡陈旖王潇霖张冠英于长明陈薇
- 关键词:埃博拉病毒生物学活性
- 一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体,以及所述抗体在制备鼠疫治疗药物中的应用。本发明公开的抗体具有特异的抗原结合性、低免疫原性以及良好的动物保护功能。
- 陈薇李建民张金龙任军李冰宋小红于婷刘树玲
- 文献传递
- 一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体,以及所述抗体在制备鼠疫治疗药物中的应用。本发明公开的抗体具有特异的抗原结合性、低免疫原性以及良好的动物保护功能。
- 陈薇李建民张金龙任军李冰宋小红于婷刘树玲
- 文献传递
- 杀灭芽孢杆菌芽孢的复合制剂
- 本发明公开了一种杀灭芽孢杆菌芽孢的复合制剂。本发明提供的复合制剂,其活性成分是乳酸链球菌素和L-丙氨酸。应用本发明的复合制剂,在常温条件下,在15min内,对芽孢的杀灭率可达99.37%,比常规试剂乳酸链球菌素提高了约5...
- 陈薇李曼侯利华曹晓梅付玲李建民张晓鹏董大勇宋小红
- 文献传递
- 利用SEC-HPLC法测定重组人透明质酸酶的纯度被引量:2
- 2016年
- 目的:建立检测重组人透明质酸酶(rHuPH20)纯度的高效分子排阻色谱法(SEC-HPLC)。方法:利用SEC-HPLC法建立检测rHuPH20纯度的方法,并对方法的专属性、线性、精密度(重复性和中间精密度)、检测限、定量限和耐用性等指标进行评估。结果:空白溶剂在设定的积分范围内无特异峰出现;样品浓度为30~480μg/m L时,数据呈线性关系,决定系数r^2=0.9994;重复性实验峰面积相对标准偏差(RSD)为1.9%;中间精密度实验峰面积RSD为1.1%;检测限为样品浓度10μg/m L时进样体积20μL,即进样量0.2μg;定量限为样品浓度30μg/m L时进样体积20μL,即进样量0.6μg;耐用性实验中,峰保留时间RSD为0.4%,峰面积RSD为1.0%。结论:建立的SEC-HPLC法各项指标符合要求,可用于rHuPH20的纯度检测。
- 吕鹏张金龙宋小红侯利华陈薇
- 关键词:纯度
- 炭疽毒素受体胞外区在毕赤酵母中分泌表达、纯化与活性鉴定被引量:6
- 2005年
- 使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配基PA结合试验和细胞保护试验显示,rATR(CMG2)-EXCELL具有很好的生物活性.rATR(CMG2)-EXCELL的成功表达为今后研究炭疽毒素受体的作用机理、发展新型炭疽治疗药物打下基础.
- 赵剑徐俊杰缪静李冰杨秀旭宋小红陈薇
- 关键词:炭疽杆菌蛋白质表达毕赤酵母
- 一种以人Ad5复制缺陷型腺病毒为载体的寨卡病毒病疫苗
- 本发明公开了一种能够表达寨卡病毒Env蛋白,并且密码子得到优化的核苷酸序列,所述序列可以与密码子得到优化的寨卡病毒prM蛋白以及prM蛋白内源信号肽融合,插入穿梭载体pDC316后,与辅助载体pBHGlox_E1,3Cr...
- 陈薇郭强侯利华吴诗坡宋小红付玲王步森张金龙
- 炭疽保护性抗原与炭疽毒素受体结合特征分析
- 2008年
- 目的:建立检测炭疽毒素保护性抗原(PA)与靶细胞受体(ATR)结合能力的Binding-ELISA方法,并对两者结合特征进行分析。方法:以ELISA实验为基础,建立PA与ATR结合的体外模型,并对实验中的反应条件进行优化。采用Binding-ELISA方法,通过测定不同包被蛋白、不同二价阳离子条件下的D450以及相对饱和度等参数,分析PA与两种ATR的结合特征。结果与结论:以重组PA作为包被抗原时灵敏度更高,包被浓度为2μg/ml;二价阳离子浓度为5 mmol/L。两种受体与PA的亲和力不同,其中CMG2与PA的结合能力更强;并且两者与PA结合时离子依赖特征不同,PA与TEM8的结合能力在Mn2+存在时最强,PA与CMG2的结合能力在Ca2+存在时最强。这一结果与国外报道相符,进一步说明Binding-ELISA方法用于定性分析炭疽毒素与其受体结合能力的可行性,为评价以抑制PA与ATR结合为靶点的毒素抑制剂提供了有效的手段。
- 张军赵剑董大勇宋小红徐俊杰陈薇
- 关键词:炭疽毒素酶联免疫吸附试验
- 抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体的制备及活性分析被引量:1
- 2013年
- 目的在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法将具有保护活性的鼠源单克隆抗体(mAb)的轻、重链可变区基因,分别与人κ型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建轻重链嵌合抗体基因,克隆到T载体上进行序列测定确证。然后分别构建含有嵌合轻、重链基因的表达载体pcDNA3.1-L和pcDNA3.1-H。构建完成的表达载体电转化CHO-S细胞,G418筛选获得稳定表达细胞株。扩大培养、收集上清用MabSelect Sure亲和层析填料纯化。纯化后的抗体进行SDS-PAGE、ELISA、Western blot分析以及小鼠体内保护活性评价。结果 PCR鉴定及测序结果表明pcDNA3.1-H和pcDNA3.1-L构建完成,序列正确;Dot blot结果表明获得表达量高的稳转株细胞;SDSPAGE及Western blot法证明抗体纯化获得成功,ELISA结果表明该抗体具有结合与F1抗原的活性;小鼠体内攻击实验表明其保护活性与鼠mAb大致相同。结论成功在CHO-S细胞中表达了具有中和活性的抗F1人-鼠嵌合抗体。
- 张金龙任军于婷宋小红付广成刘树玲张章李冰李建民
- 关键词:鼠疫F1嵌合抗体中国仓鼠卵巢细胞