徐培林
- 作品数：35 被引量：205H指数：8
- 供职机构：中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学石油与天然气工程更多>>
- 草甘膦降解酶基因和含该基因的载体
- 本发明提供一种从苜蓿根瘤菌M010中克隆到的草甘膦降解酶基因(Gld)以及含有该基因的载体和转化子。含有该基因的序列总长为2670bp。含有Gld序列的转化子XLI－pCRGld的蛋白粗提物，具有降解草甘膦释放无机磷的活...
- 徐培林步怀宇何鸣李绿砚张擎
- 文献传递
- 油菜转抗草甘膦、抗虫基因获得双抗植株被引量：31
- 2005年
- 以草甘膦为筛选剂,用农杆菌介导法将编码5烯醇式丙酮酸莽草酸3磷酸合成酶(EPSPS)的aroAM12基因和编码苏云金杆菌毒蛋白的Btslm基因导入到甘蓝型油菜优良品种湘油15号中。在用草甘膦对转化体进行筛选的基础上,对转基因再生植株进行了PCR检测、Southernblot和Westernblot分析,结果证明外源基因确已导入到该油菜品种中,而且表达了相应的蛋白。对转基因植株进行抗草甘膦、抗虫性鉴定的结果表明,转基因植株具有抗草甘膦、抗虫的双重特性。研究结果还表明抗草甘膦的aroAM12基因在植物基因转化中,既可以用作抗除草剂基因,又可以代替常用的抗生素标记,用作植物筛选标记基因。
- 王景雪赵福永徐培林田颖川
- 关键词：油菜
- 根癌农杆菌介导的转aroAM12基因棉花植株的草甘膦抗性被引量：48
- 2004年
- 以中棉35无菌苗下胚轴为外植体,采用农杆菌介导法将含有通过基因优化技术获得的草甘膦抗性突变基因aroAM12导入棉花中。以aroAM12为选择标记,利用草甘膦直接筛选获得65棵再生植株。PCR和Southernblot分析表明,经过草甘膦筛选出的T0代植株均整合有aroAM12基因。Western blot分析表明整合进的aroAM12基因得到了有效表达,且不同植株之间的表达不尽相同。大棚喷洒的实验结果表明T0代转化植株具有很高的草甘膦抗性。对T1代棉花的草甘膦抗性遗传分析表明,aroAM12基因以盂德尔方式遗传。
- 谢龙旭李云锋徐培林
- 关键词：农杆菌棉花草甘膦
- 一个源自新疆黑油山土壤宏基因组的碱性蛋白酶的表征及提高其表达量的研究
- 蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称，在细胞代谢过程中扮演着重要作用.蛋白酶在自然界中的来源非常广泛，动物、植物、真菌、细菌、古细菌和病毒中均含有蛋白酶.基于其pH特性，蛋白酶分为酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶三类....
- 巩伯梁肖月徐培林李刚
- 关键词：蛋白酶随机突变
- 血小板生成素Ⅱ对失血性小鼠死亡率的影响
- 2001年
- 目的 探讨血小板生成素Ⅱ (thrombopoietin ,TPOⅡ )体内的生物学活性对失血性血小板减少小鼠死亡率的影响。方法 以Babl/c纯系小鼠为实验对象 ,实验前采尾静脉血 ,了解小鼠血小板正常值。实验中通过腹腔连续 7d分组注射提纯的TPOⅡ配体Ⅰ、人工合成的TPOⅡ配体Ⅱ及重组的人血小板生成素 (rhTPO) ,并于第 7天及第 14天采眶静脉血 0 .5ml,测定小鼠外周血小板数量 ,同时观察小鼠的死亡情况。结果 用药后第 7天 ,TPOⅡ配体Ⅰ实验组小鼠外周血小板数明显高于同期阴性对照组 (P <0 .0 5 ) ,与rhTPO阳性对照组相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;第 14天 ,TPOⅡ的两个实验组的血小板数均较同期阴性对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,与阳性对照组相比 ,差异亦无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而且随实验时间的延长 ,TPOⅡ实验组及阳性对照组血小板数均呈升高趋势。在第 7天眶静脉采血后 ,各组小鼠均陆续出现死亡 ,但TPOⅡ实验组及阳性对照组小鼠死亡率明显低于阴性对照组(P <0 .0 5 )。结论 TPOⅡ可促进小鼠外周血小板的产生 ,在一定程度上降低了失血性血小板减少的小鼠的死亡率。
- 陈运贤钟立业钟雪云刘天浩欧瑞明赵洪云林旭滨姚麟苏薇薇徐培林
- 关键词：血小板小鼠死亡率
- 草甘膦抗性基因及含该基因的载体和转化子
- 本发明提供一种从苜蓿根瘤菌Rhizobium melilotiIMAS AS1.166 M010中克隆到的草甘膦抗性基因(Glr)以及含有该基因的载体和转化子。该基因的序列总长为1059bp。含有Glr序列的农杆菌穿梭质...
- 李绿砚步怀宇徐培林
- 文献传递
- 油菜农杆菌介导转化体系的优化
- 2019年
- 以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3d,可明显提高子叶外植体和下胚轴外植体出愈率和抗性芽苗分化率,有利于获得较高的转化效率;在基因转化中,AgNO3的最佳使用浓度为30μmol/L,最佳的农杆菌侵染菌液OD600为0.4,共培养基pH值5.4是油菜农杆菌介导转化中优化的转化条件。
- 张姗姗耿思宇徐培林王景雪
- 关键词：甘蓝型油菜农杆菌预培养
- 农杆菌介导的以草甘膦为选择标记的中棉35遗传转化
- 采用农杆菌介导转化法对具有重要经济性状的中国陆地棉品种中棉35进行了遗传转化。为了提高抗草甘膦基因 aroA-Ml 在转基因植株的表达效率,构建载体时选取了 CaMV 35S 作为启动子,并在其上游融合了一段拟南芥的叶绿...
- 赵福永李云锋徐培林
- 文献传递
- 一种基因优化的方法和以此方法获得的抗草甘膦基因及其表达载体
- 本发明利用DNA序列同源重组的特性和传统PCR扩增法的热循环反应，设计出以两个或两个以上同源性大于50%的基因序列为源模板，并采用两步PCR扩增反应的简便高效的基因优化方法。并以此方法获得了两个发生多点突变的，具有较强草...
- 徐培林何鸣杨中艺
- 文献传递
- 人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略被引量：4
- 2003年
- 利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mpl分子配体的xp1基因,构建pET＿28(b)＿xp1,pBV220＿xp1和pBAD gⅢA＿xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性。表达分析显示BL21 pET＿28(b)＿xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21 pBV220＿xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21 pET＿28(b)＿xp1高;TOP10 pBAD gⅢA＿xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达。
- 张擎葛怡琛潘瑞敏徐培林
- 关键词：血小板生成素受体基因表达表达量
