徐立新
- 作品数：166 被引量：203H指数：7
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 捻转血矛线虫谷胱甘肽过氧化物酶体外对山羊外周血单核细胞功能的影响被引量：4
- 2014年
- 本文探讨了捻转血矛线虫的谷胱甘肽过氧化物酶(HC29)体外对山羊外周血单核细胞(PBMCs)功能的影响。颈静脉采取无捻转血矛线虫感染的山羊血液,分离单核细胞后加入终浓度为5μg/mL的HC29重组蛋白进行体外培养,通过免疫荧光抗体技术观察重组蛋白与单核细胞的结合情况;HC29刺激山羊外周血单核细胞,用qPCR技术测定各试验组单核细胞中IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、IFN-γ和TGF-βmRNA的转录水平;重组蛋白刺激单核细胞,采用CCK-8法测定细胞的增值情况;将重组蛋白与巨噬细胞共培养,测定巨噬细胞吞噬和分泌NO的情况。结果表明,重组HC29能够与外周血单核细胞结合并刺激细胞因子IL-10和IFN-γ的表达水平显著提高(P<0.01),能够引起单核细胞增值(P<0.01),巨噬细胞吞噬作用增强(P<0.01)和NO分泌增加(P<0.01)。结果表明HC29是捻转血矛线虫的一个重要抗原,主要诱导Th1类免疫反应。
- 高波袁橙宋小凯徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：捻转血矛线虫山羊谷胱甘肽过氧化物酶外周血单核细胞巨噬细胞细胞因子
- 一种刚地弓形虫纳米材料亚单位疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种刚地弓形虫纳米材料亚单位疫苗及其制备方法和应用。该疫苗是将壳聚糖包被刚地弓形虫重组蛋白PSMB1形成纳米粒子，重组蛋白TgPSMB1来自于刚地弓形虫蛋白酶体亚单位1，其氨基酸序列见SEQ ID NO.1所...
- 李祥瑞徐立新宋小凯严若峰于正青
- 文献传递
- 巨型艾美耳球虫抗原Em8对鸡外周血单核细胞功能的影响
- 2015年
- 探讨了巨型艾美耳球虫抗原Em8体外对鸡外周血单核细胞(PBMCs)功能的影响。选取抗原基因Em TFP250中具有较好免疫保护性的Em8基因片段,并对其进行原核表达纯化出重组蛋白。无菌采集未被鸡球虫感染的鸡的外周血,分离出单核细胞,加入终浓度为5μg/m L的Em8重组蛋白进行体外培养,通过免疫荧光抗体技术观察重组蛋白与单核细胞的结合情况;Em8重组蛋白不同浓度体外刺激鸡外周血单核细胞,用q PCR技术测定各实验组单核细胞中IL-4、IL-17D、IFN-γ、TGF-β4的mRNA转录水平;采用CCK-8法测定细胞的增殖情况;Em8重组蛋白不同浓度(低、中、高浓度)体外与巨噬细胞共培养,测定巨噬细胞吞噬和NO分泌功能。结果表明:重组蛋白Em8是巨型艾美耳球虫的重要抗原,发挥广泛而重要的免疫作用。其中,重组蛋白Em8能够与外周血单核细胞结合并能刺激细胞因子IL-17D和IFN-γ的表达水平显著提高(P<0.01),能够引起单核细胞增值(P<0.01),巨噬细胞吞噬作用增强(P<0.01)且NO分泌增加(P<0.01)。
- 隋煜霞涂浩张振超王帅宋小凯徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：巨型艾美耳球虫外周血单核细胞细胞因子
- 一种鸡柔嫩艾美耳球虫复合免疫调节型DNA疫苗
- 本发明涉及一种鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)复合免疫调节型DNA疫苗，属于生物兽药技术领域。利用分子生物学技术分别将鸡柔嫩艾美耳球虫子孢子阶段基因SO7和第二代裂殖子阶段基因MZ5-7T细胞表位集中的...
- 李祥瑞宋小凯严若峰徐立新
- 文献传递
- 利用gateway技术构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA表达文库被引量：4
- 2015年
- [目的]为了寻找可用于研制高效重组疫苗的抗原基因,利用gateway技术构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA表达文库。[方法]首先从新鲜分离的巨型艾美耳球虫孢子化卵囊中提取总RNA并分离纯化mRNA,用Clone MinerTMⅡcDNA文库构建试剂盒构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA初级文库,然后将cDNA从初级文库重组到p VAX1.0上,构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA表达文库,最后用7个已知巨型艾美耳球虫基因的引物鉴定文库。[结果]构建的巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA初级文库总容量为0.92×107CFU,插入片段平均大小为1.63 kb;表达文库总容量为2.32×107CFU,插入片段平均大小为1.64 kb。两种文库的阳性重组率均为100%。能用特异性引物从该表达文库扩增出7个已知的巨型艾美耳球虫基因。[结论]该文库质量高,代表性强,为进一步筛选免疫保护性抗原基因奠定了坚实基础。
- 李梦辉刘连瑞涂浩黄经纬张振超徐立新严若峰李祥瑞宋小凯
- 关键词：巨型艾美耳球虫孢子化卵囊GATEWAY技术CDNA表达文库
- 柔嫩艾美耳球虫5401基因的克隆、序列分析及原核表达
- 分别以孢子化卵囊及第二代裂殖子为材料,应用RT-PCR技术克隆了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)5401基因。测序结果表明该基因序列全长为864bp,序列本身是一个开放阅读框。将克隆得到的基因与国外报道的...
- 黄欣梅徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫克隆原核表达
- 文献传递
- 巨型艾美耳球虫感染对鸡Toll样受体的影响
- 2024年
- 为了探究巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)感染对宿主局部免疫组织盲肠扁桃体和系统免疫组织(脾脏和外周血)中Toll样受体(Toll like receptor,TLR)的影响,用巨型艾美耳球虫感染雏鸡,感染后第0、3、7和11天,采集鸡盲肠扁桃体、外周血和脾脏淋巴细胞,用实时荧光定量PCR检测上述组织中8种鸡TLR的mRNA水平变化。结果显示:TLR4和TLR21 mRNA水平在3种组织中无显著变化;TLR2 mRNA水平在感染后第3天开始在外周血和脾脏中显著下降(P<0.05),在盲肠扁桃体中第3和7天无显著变化,在第11天显著上升(P<0.01)。TLR1、TLR3、TLR5、TLR7和TLR15 mRNA水平在3种组织中显著上升(P<0.05),但应答时间有所差异,具体为TLR1和TLR3 mRNA水平在盲肠扁桃体中在第3天开始上升,而在外周血和脾脏中第7天开始上升;TLR5和TLR15 mRNA水平在外周血和脾脏中第3天开始上升,而在盲肠扁桃体中第7天开始上升。结果表明:巨型艾美耳球虫感染上调宿主3种组织中的TLR1、TLR3、TLR5、TLR7和TLR15 mRNA水平,下调外周血和脾脏中的TLR2 mRNA水平;盲肠扁桃体TLR1和TLR3 mRNA水平上升早于外周血和脾脏,而其TLR5和TLR15 mRNA水平上升晚于外周血和脾脏。本研究为揭示鸡TLR在抗球虫感染中的作用提供依据,也为揭示鸡球虫先天性免疫机制提供参考。
- 潘仰栋刁胤轩蒲响林陆明敏徐立新严若峰李祥瑞宋小凯
- 关键词：巨型艾美耳球虫TOLL样受体先天性免疫鸡球虫病
- 一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用
- 本发明涉及一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用。本发明鉴定出一种可用作该寄生虫感染的诊断用抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫14天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能...
- 严若峰李祥瑞徐立新宋小凯卡力比夏提.艾木拉江陆明敏
- 文献传递
- 毒害艾美耳球虫江苏分离株NA4抗原基因的克隆与序列分析
- 采用直肠接种毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)裂殖子方法对毒害艾美耳球虫卵囊进行纯化,用柔嫩艾美耳球虫子孢子表面抗原TA4基因特异性引物,以纯化E.necatrix孢子化卵囊总RNA为模板,RT-PCR方...
- 严若峰张娜徐立新宋小凯李祥瑞
- 关键词：毒害艾美耳球虫孢子化卵囊
- 文献传递
- 重组捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素免疫山羊皱胃细胞因子表达定位
- 为检测重组雌、雄捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素(rHCo-GAL-f/m)免疫山羊皱胃转录细胞因子。用rHco-GAL-f/m免疫山羊,通过原位杂交法对阴性对照组(A)、攻虫对照组(B)、免疫攻虫组(C)和免疫不攻虫组(D...
- 张立武孙延鸣徐立新严若锋李祥瑞
- 文献传递
