朱舜亚
- 作品数：14 被引量：57H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项河北省教委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 双抗体夹心ELISA检测生殖支原体抗原方法的初步建立及临床应用被引量：4
- 2002年
- 目的 :建立检测生殖支原体 (Mycoplasmagenitalium ,Mg)抗原的双抗夹心ELISA方法 ,探讨其临床应用的可行性。方法 :采用不同株Mg单抗用ELISA双抗夹心法检测Mg抗原 ,摸索该方法检测Mg抗原的最佳实验条件。对Mg标准株及 10 8份临床标本进行平行测定 ,观察双抗夹心ELISA方法的敏感性和特异性及该方法与PCR检测方法的符合率。结果 :包被单抗量为 2 0 μg ml,酶标记单抗 1∶2 0 0稀释时 ,P N值最大 ;检测Mg抗原敏感度达 2 μg ml;10 8份临床标本PCR检测阳性率 8.2 6 % (10 10 8) ;双抗夹心ELISA法检测阳性率 7.4 1% (8 10 8) ,两者符合率达 89.71%。结论 :建立的双抗夹心ELISA法检测Mg抗原具有快速、敏感、经济。
- 刘春霞辛颜彬杨雪芬魏云玲朱舜亚
- 关键词：生殖支原体ELISA双抗夹心法聚合酶链反应抗原
- 用于鉴定人类腺病毒55型的引物对、引物探针组合物以及它们的应用
- 本发明公开了一种用于鉴定人类腺病毒55型的引物对、引物探针组合物以及它们的应用。本发明提供的辅助鉴定和/或定量检测人类腺病毒55型的试剂盒，包括序列表的序列1所示单链DNA分子和序列表的序列2所示单链DNA分子组成的特异...
- 秦成峰姜涛刘娟邓永强朱舜亚秦鄂德
- 文献传递
- 应用小鼠杂交瘤细胞检测支原体被引量：1
- 2012年
- 一般支原体都有胸苷磷酸化酶,此酶可将胸苷(Thd)分解为胸腺嘧啶(Thy)和戊糖-1-磷酸酯。培养于HAT培养液的小鼠杂交瘤细胞,利用Thd合成DNA而生长;当HAT培养液中的Thd被支原体的胸苷磷酸化酶分解为Thy后,杂交瘤细胞因不能利用Thy合成DNA而死亡。可根据HAT培养液中杂交瘤细胞的死亡与否来推断检测样品"有"、"无"产胸苷磷酸化酶的支原体存在。
- 肖定华肖志军朱舜亚
- 关键词：支原体胸苷磷酸化酶
- 免疫荧光法检测生殖支原体抗原的研究及临床意义被引量：2
- 2003年
- 目的研究间接免疫荧光技术(IFA)检测生殖支原体(Mg)抗原的敏感性及特异性,并探讨其临床价值。方法 以PCR为对照,采用Mg单克隆抗体作一抗行间接免疫荧光法检测生殖支原体抗原,对标准株及82份临床标本进行检测,比较其检出率和符合率。结果82例标本中IFA检测Mg抗原的敏感度为66.67％,特异度为100％,两种方法Mg检出率IFA为7.33％,PCR为10.95％,两者差异无显著性(P>0.05)。结论IFA检测法具有简便快速、特异性好和直观性强等优点。
- 刘春霞辛颜彬杨雪芬魏云玲朱舜亚马建国
- 关键词：生殖支原体间接免疫荧光PCR尿道炎
- 西尼罗病毒RNA复制子系统的建立与应用
- 2013年
- 目的构建具有复制和表达活性的RNA形式的西尼罗病毒(WNV)复制子。方法在DNA形式的WNV复制子pWNrep的基础上,将其CMV启动子替换成SP6启动子,并在3'UTR端引入PacⅠ酶切位点,构建复制子克隆pSP6-WNrep。同时,将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和海肾荧光素酶(R.luc)报告基因分别插入上述复制子质粒中,获得含有报告基因的复制子pSP6-WNrep/eGFP和pSP6-WNrep/R.luc。将上述克隆线性化后进行体外转录,将转录体RNA转染BHK-21细胞,观察不同时间点绿色荧光蛋白(GFP)的活性和R.luc活性。结果与结论获得了WNV复制子pSP6-WNrep、pSP6-WNrep/eGFP和pSP6-WNrep/R.luc,酶切和测序鉴定结果显示,序列与预期一致。将含有报告基因的复制子转染细胞72 h后仍能观察到荧光信号,R.luc的活性随时间延长而增强。本研究成功构建了WNV Chin-01株的RNA复制子,该复制子能够在哺乳动物细胞中有效复制并表达外源蛋白,为下一步构建WNV单轮感染病毒样颗粒奠定了基础。
- 张富军李晓峰曹飞赵慧邓永强朱舜亚姜涛秦鄂德秦成峰
- 关键词：RNA西尼罗病毒复制子转染
- 用于鉴定人类腺病毒55型的引物组合物以及它们的应用
- 本发明公开了一种用于鉴定人类腺病毒55型的引物组合物以及它们的应用。本发明提供的引物组合物，包括DNA片段‑Ⅰ、DNA片段‑Ⅱ、DNA片段‑Ⅲ和DNA片段‑Ⅳ，均为单链DNA片段，依次如序列1、序列2、序列3、序列4所示...
- 秦成峰姜涛刘娟邓永强朱舜亚秦鄂德
- 文献传递
- 抗SARS冠状病毒药物细胞筛选模型的建立及应用被引量：5
- 2003年
- 目的 :建立抗SARS冠状病毒 (SARS_CoV)药物细胞筛选模型 ,应用于抗SARS_CoV药物的筛选 ,为SARS的防治奠定基础。方法 :将一定数量的细胞接种 96孔板 ,根据药物的作用机制采用不同的给药途径 ,以观察到的细胞病变 (cytopathiceffect,CPE)为指标 ,按照Reed_Muench法 ,计算药物的细胞半数中毒浓度 (TD50 )和抑制细胞半数病变的有效浓度 (IC50 )。结果与结论 :Vero_E6细胞接种SARS_CoV后 2 4h即可出现CPE ,且CPE明显 ,便于观察 ,可作为抗SARS病毒药物细胞筛选模型。依此模型筛选了 3类 87种药物 ,确认 6种药物在Vero_E6细胞上具有抑制SARS病毒的作用。该模型的建立也为其他的抗病毒药物的筛选提供了技术平台。
- 李晓萸朱舜亚魏云玲杨佩英祝庆余秦鄂德
- 关键词：SARS-COVVERO-E6细胞抗病毒药物
- 细菌质粒复制的控制机制
- 2007年
- 通过分析细菌中质粒的存在状态和调控机制的相关研究进展,为研究细菌致病机理、机体免疫防护机制,分析确定菌株的标识基因和标识分子,以及研究质粒表达调控分子机理提供思路,进而为应用基因工程手段构建筛选新的表达载体、研究新型疫苗候选株提供理论基础。
- 赵月峨朱舜亚马永平
- 关键词：质粒
- 用于鉴定人类腺病毒55型的引物组合物以及它们的应用
- 本发明公开了一种用于鉴定人类腺病毒55型的引物组合物以及它们的应用。本发明提供的引物组合物，包括DNA片段-Ⅰ、DNA片段-Ⅱ、DNA片段-Ⅲ和DNA片段-Ⅳ，均为单链DNA片段，依次如序列1、序列2、序列3、序列4所示...
- 秦成峰姜涛刘娟邓永强朱舜亚秦鄂德
- 文献传递
- 携带脑组织特异性microRNA靶序列的重组日本脑炎病毒的构建与鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RNA转染BHK-21细胞,37℃、5%CO2孵箱培养3d后取上清盲传1代观察细胞病变,并通过RT-PCR、细胞蚀斑形成实验和病毒生长曲线等方法对恢复病毒的生物学特性进行鉴定。结果成功在BHK-21细胞中拯救获得了携带miRNA靶序列的重组病毒,与野生型病毒株具有相似的蚀斑形态和生长特性。结论通过反向遗传学技术获得了携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒,为miRNA介导的组织特异性减毒机制研究奠定了基础。
- 曹文媛叶青李晓峰王洪江朱舜亚秦鄂德江振友秦成峰
- 关键词：微RNAS感染性克隆
