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李宏年: 作品数：17 被引量：47H指数：4; 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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女性肺癌组织中癌基因产物的表达被引量：3: 1990年; 人肿瘤的发生与某些原癌基因的活化有密切关系,ras族和myc族基因是人类肿瘤常见的癌基因。许多人曾报道在人的肺癌组织或细胞株中有Ki-ras或/和C-myc基因的放大、突变活化或异常表达。癌基因是通过其产物而起生物学作用的,为了探索癌基因产物在癌变过程中的作用及其应用价值,首先必须得到大量的基因产物,我室曾构建了V-Ki-ras和V-myc的表达质粒。本文主要报道抗V-Ki-ras、V-myc基因产物多克隆抗体的制备及应用多克隆抗体以免疫印迹法检测女性肺癌组织中Ki-ras和C-myc的产物。; 万大方李宏年张萍萍贺丽萍顾健人; 关键词：女性肺癌组织癌基因产物

用^(125)Ⅰ标记单抗检测非吸烟女性肺癌血浆中ras癌基因产物p21蛋白: 1998年; 目的　探讨肺癌发生与癌基因表达产物之间的相互关系。方法　用 (SDS PAGE)WesternBlotting方法结合单克隆抗体的同位素标记技术 ,检测上海市非吸烟女性肺癌患者和非吸烟健康女性对照人群血浆中ras癌基因表达产物p2 1蛋白。结果　肺癌人群 3 8例中 3 5例p2 1蛋白为阳性 ,对照人群59例中 1 7例为阳性。两者相对危险度估计值 (OR)为 2 8.8(χ2 MH=3 6.85)。 3 5例阳性中 2 3例为“ +” ,8例为“ ” ,4例为“ ”。它们的OR分别为 2 1 .5、1 1 2 .0、56.0 (χ2 MH分别是 2 7.45、3 0 .58、1 9.70 )。肺癌人群p2 1表达阳性率明显高于健康人群 ,有非常显著意义 (P <0 .0 0 1 )。结论　本方法有可能作为分子流行病学调查的一个生物学标志 ,并可能有助于临床诊断 ,以及用于环境、职业性高暴露人群及高危个体的健康监护。; 朱莉芳程家蓉李宏年钟礼杰瞿永华; 关键词：RAS基因 P21蛋白女性非吸烟碘125

人巨细胞病毒糖蛋白52kD抗原编码区段在大肠杆菌中高效表达: 1992年; 采用聚合酶链反应,从人巨细胞病毒重组质粒克隆pBH中扩增并分离了含糖蛋白52kD抗原编码区段;扩增产物经纯化和EcoR Ⅰ酶切后,与相同酶切的高效表达质粒pBV-220重组,构成含人巨细胞病毒糖蛋白52kD抗原编码区段的高效表达质粒pHcMV 52;用此重组表达质粒转化大肠杆菌JM101,经增殖和42℃温度诱导以及筛选。阳性克隆经12.5％SDS-PAGE表明,外源基因表达蛋白质量占菌体溶解液中蛋白质总量20％。蛋白质印迹(western blot)杂交证实该表达产物具有免疫原性。; 吴均陈俊杰唐泽媛顾建人万大方马安卿曲淑敏李宏年; 关键词：聚合酶链反应人巨细胞病毒糖蛋白

视网膜母细胞瘤Rb基因表达被引量：4: 1994年; 利用抗Ｒｂ基因蛋白产物的多克隆抗体对１５例视网膜母细胞瘤Ｒｂ基因表达水平进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，并采用激光密度分析仪对结果进行进一步精确的定量分析，表明１５例视网膜母细胞瘤中仅有两例的Ｒｂ基因蛋白表达量与正常视网膜相似，其余１３例几乎没有Ｒｂ基因的表达产物。提示在大多数视网膜母细胞瘤中，Ｒｂ基因的蛋白质产物缺乏。; 邓应平顾健人蒋惠秋万大方李宏年黄倩罗成仁; 关键词：视网膜母细胞瘤 RB基因基因表达

HP8：增强子结合蛋白家族的一个新基因的cDNA克隆被引量：1: 1995年; 以大鼠增强子结合蛋白（Ｃ／ＥＢＰ）ｃＤＮＡ为探针，筛选人胎肝ｃＤＮＡ文库，得到一个含有２４８０碱基命名为ＨＰ８的ｃＤＮＡ克隆，其中８４～１１０９位碱基属编码区，经基因数据库（ＥＭＢＬ，９５．６版本）查对未发现同源基因。该基因编码的蛋白Ｃ－末端含有亮氨酸拉链结构（ｌｅｕｃｉｎｅｚｉｐｐｅｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅ），和Ｃ／ＥＢＰ功能区（Ｃ－末端６０个氨基酸）同源性高达９７％，而上游编码区则与Ｃ／ＥＢＰ及其已知家族同源性很低，表明该基因属Ｃ／ＥＢＰ基因家族新成员。基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实该基因为单拷贝基因，在１４种胎儿组织中显示小肠、皮肤高表达，肾上腺中度表达，肝、肺、肾、甲状腺、胆囊低表达。在５例正常成人肝组织中仅２例低表达，而在１３对肝癌及癌旁肝组织中显示９例癌组织及７例癌旁组织高表达。以上结果提示该基因可能与细胞增殖有关。它的详尽功能的研究正在进行中。; 徐砺新万大方刘彦仿李宏年张萍萍隋延仿顾健人; 关键词：C/EBP 亮氨酸拉链 CDNA

胚胎及成熟组织中Rb基因表达水平的初步检测被引量：3: 1990年; 利用人胚胎及成熟组织做实验材料,通过Western杂交技术检测Rb基因的表达水平;藉以了解Rb基因与细胞生长、增殖及分化的关系。实验结果表明:(1)同一组织或器官随着月龄增加Rb蛋白的表达量逐渐增加;(2)不同的组织或器官Rb基因开始表达的时间顺序不同,Rb蛋白的表达量亦各不相同;(3)中年以后Rb基因的表达量明显降低。; 黄倩顾健人邓应平万大方李宏年马安卿曲淑敏罗成仁方谦逊; 关键词：RB基因基因表达

Rb基因表达质粒的构建被引量：2: 1990年; 采用重组DNA技术成功构建了Rb基因表达质粒。Rb基因片段来源于Rb cDNA克隆P2R4.7的BglⅡ844bp片段,表达质粒载体为PWR-13,受体菌是E·Coli TAP130。Rb蛋白表达量占细菌总蛋白量的5.04%。利用Rb基因表达产物制备的抗Rb多克隆克体,在视网膜母细胞瘤发病机理的研究中初步应用,获得了重要的实验结果。; 黄倩顾健人徐来贾立斌张萍萍万大方李宏年马安卿曲淑敏罗成仁方谦逊; 关键词：RB基因表达质粒

增强子结合蛋白家族的新基因HP8的部分cDNA克隆被引量：2: 1996年; 探讨人的增强子结合蛋白（Ｃ／ＥＢＰ）相关基因。方法以大鼠Ｃ／ＥＢＰｃＤＮＡ为探针，筛选人胎盘ｃＤＮＡ文库。结果得到一个含有１９７５碱基命名为ＨＰ８的ｃＤＮＡ克隆，其中１～６０４位碱基属编码区。经基因数据库查对未发现同源基因。该基因编码的蛋白Ｃ－末端含有亮氨酸拉链结构（ｌｅｕｃｉｎｅｚｉｐｐｅｒｓｔｒｕｃｅｕｒｅ）和Ｃ／ＥＢＰ功能区（Ｃ－末端６０个氨基酸）同源性高达９７％，而上游编码区则与Ｃ／ＥＢＰ及其已知家族同源性很低，表明该基因属Ｃ／ＥＢＰ基因家族新成员。基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实该基因为单拷贝基因。在１４种胎儿组织中显示小肠、皮肤高表达，肾上腺中度表达，肝、肺、肾、甲状腺、胆囊低表达。在３例正常成人肝组织中仅１例低表达，而在５对肝癌及癌旁肝组织中显示２例癌组织及１例癌旁组织高表达。结论以上结果提示该基因可能与细胞增殖有关。; 徐砺新万大方刘彦仿李宏年张萍萍隋延仿顾健人; 关键词：增强子结合蛋白 C/EBP 基因克隆亮氨酸

肝癌和癌旁肝组织中癌基因多肽产物抗体的制备及初步应用研究被引量：1: 1993年; 采用Microgenie微机处理系统分析人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、IGF-Ⅱ受体和C-fms癌基因cDNA的核苷酸顺序亲水性及空间结构,选择不同的氨基酸之间亲水性密集片断,经多肽合成仪以固相法进行全合成。用合成的三种基因多肽片断为抗原,分别免疫家兔制备成抗IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和C-fms基因多肽产物抗体。采用免疫印迹法对3例配对的肝癌及癌旁肝组织进行初步应用研究,结果提示三种基因的异常过量表达与肝癌的发生关系密切。; 杨冬华刘为纹顾健人万大方马安卿李宏年曲淑敏; 关键词：受体癌基因免疫印迹肝肿瘤

过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中的差异性表达被引量：15: 2005年; 目的检测过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中有无差异性表达且有无突变。方法用半定量RT- PCR,Western blot,FISH,PCR-SSCP等方法进行鉴定。结果用半定量RT-PCR检测,有8/14为癌中高表达;Western blot 方法检测,9/15为癌中高表达。免疫组化显示PPARγ在所有的癌旁组织中定位于细胞浆中;而在5个癌组织中定位于细胞核中;突变热点PPARγ外显子3和5在34对肝癌标本中没有突变。结论过氧化物酶体增殖激活性受体γ在肝癌组织中有差异性表达并且在肝癌标本中没有突变。提示PPARγ可能与肝癌的发展有一定的相关性。; 郭鸣雷李锦军李宏年万大方顾健人; 关键词：肝肿瘤基因表达突变

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