李晓冬
- 作品数：8 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导ECV304组织因子基因表达及银杏内酯B的抑制作用被引量：12
- 2002年
- 为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激光共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i 的变化。结果显示 ,4 0mg LmmLDL作用ECV30 4 4h ,能使TF蛋白含量及mRNA水平显著增加 ,并迅速升高 [Ca2 + ]i。抗氧化剂银杏内酯B及PKC抑制剂Staurosporine可拮抗mmLDL的上述诱导反应。以上结果提示 ,mmLDL可诱导ECV30 4TF表达 ,Ca2 + 与PKC参与mmLDL诱导ECV30 4TF基因表达过程 。
- 陆晓茜李晓冬祖淑玉朱广瑾
- 关键词：钙ECV304银杏内酯B基因表达
- TNF-α或mmLDL对人脐静脉内皮细胞PAI-1的影响及其机制被引量：8
- 2002年
- 目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)或弱氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)PAI-1活性和mRNA表达的影响及其分子机制。方法用发色底物法测定HUVECs培养液中PAI-1的活性。用Northern印迹分析法检测PAI-1基因mRNA的表达情况,并分别用蛋白激酶C穴PKC雪或促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)抑制剂干预上述诱导实验。结果TNF-α或mmLDL作用HUVEC后,PAI-1活性和mRNA基因表达均明显增加。促分裂原活化蛋白激酶-激酶穴MAPKK雪的抑制剂PD98059(60μmol/L)能明显阻断TNF-α穴100U/ml雪或mmLDL穴50μg/ml雪对PAI-1活性和mRNA的诱导,但PKC的抑制剂Staurosporine(10nmol/L)和H7(15μmol/L)无显著阻断作用。结论(1)TNF-α或mmLDL能增强血管内皮细胞PAI-1活性与mRNA表达;穴2雪PAI-1活性提高与其mRNA表达增加有关;(3)MAPK途径可能在TNF-α或mmLDL诱导血管内皮细胞PAI-1表达中起重要作用。
- 李晓冬祖淑玉朱广瑾
- 关键词：内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂蛋白激酶C促分裂原活化蛋白激酶
- 内皮细胞抗凝及纤溶功能障碍和动脉粥样硬化被引量：9
- 1999年
- 介于组织与血液之间的内皮细胞具有多种功能，在保护血管完整性和维持血液流动性方面起到关键性作用[1,2]。自本世纪80年代，人们才认识到纤维蛋白原、其它凝血因子、纤维蛋白形成与溶解等都参与动脉粥样硬化的发生发展[3]。现今内皮细胞损伤在动脉粥样硬化发生发展中的重...
- 李晓冬朱广瑾
- 关键词：动脉粥样硬化内皮细胞
- 肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1表达及转录调控的影响被引量：2
- 2003年
- 探讨肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1活性和mRNA表达的影响 ,以及纤溶酶原激活物抑制剂 1基因 5’上游序列的调控元件在该基因转录调控中的作用。体外培养人脐静脉内皮细胞 ,加入不同浓度肿瘤坏死因子α作用不同时间。采用发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制剂 1活性 ,Northern印迹分析法测定纤溶酶原激活物抑制剂 1mRNA水平。基因重组技术构建四个含人纤溶酶原激活物抑制剂 1基因不同长度5’上游序列的荧光素酶报告基因质粒 ,瞬时转染进入内皮细胞 ,并测定荧光素酶的表达情况。运用聚合酶链反应和序列分析法对构建质粒上的三个AP 1元件分别进行定点突变。结果发现 ,不同浓度肿瘤坏死因子α作用人脐静脉内皮细胞后 ,纤溶酶原激活物抑制剂 1活性和mRNA表达量均明显增高 ;当转染质粒含有纤溶酶原激活物抑制剂 1基因上游序列 - 15 0 9 +90和 - 82 3 +90时 ,肿瘤坏死因子α使转染细胞的荧光素酶表达量比对照组明显增高 ;当转染质粒含有 - 5 5 3 +90和 - 4 7 +90时 ,肿瘤坏死因子α的诱导作用不明显。在纤溶酶原激活物抑制剂 15’上游序列的三个AP 1元件突变后 ,肿瘤坏死因子α的诱导作用明显降低。结果提示 ,肿瘤坏死因子α增强血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1活性与mRNA表达 ;?
- 李晓冬朱广瑾王雯祖淑玉
- 关键词：肿瘤坏死因子Α内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1转录调控
- 居留南极对考察队员血中甲状腺素和儿茶酚胺含量的影响被引量：7
- 2001年
- 本文报道了中国第 1 6次南极考察队 (长城站 )队员赴南极前和在南极居留一年二周返回国内后 ,血中甲状腺素和儿茶酚胺含量的变化 ,以探讨考察队员在居留南极期间普遍存在的生理和心理变化的物质基础。 1 6次队 1 0名男性考察队员血样分别用化学发光法检测血清总甲状腺素 (TT3、TT4)和促甲状腺激素 (TSH)的含量 ,用高效液相色谱 -电化学法测定血浆中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素 (NE)和多巴胺 (DA)的含量。结果表明 :长城站 1 6次队 1 0名男性考察队员赴南极前和在南极居留一年二周返回国内后相比 ,血清中甲状腺素TT3含量无显著性差异 ,TT4含量有非常显著性降低 (P <0 0 1 ) ,促甲状腺激素TSH含量有非常显著性升高 (P <0 0 1 ) ;血浆中的NE、DA含量无显著性差异 ,E的含量有显著性降低 (P <0 0 5 )。南极特殊环境对考察队员甲状腺功能具有减退作用 ;对肾上腺髓质E在血浆中含量有降低作用 ;甲状腺和肾上腺髓质系统共同参与南极综合应激反应 ,以调节机体与外界的平衡。
- 徐成丽祖淑玉李晓冬朱广瑾薛全福
- 关键词：考察队员甲状腺素儿茶酚胺血液机体
- mmLDL对人脐静脉内皮细胞PAI-1表达的影响及其转录调控机制
- 2003年
- 目的 :探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)PAI- 1活性和mRNA表达的影响及其转录调控机制。方法 :人脐静脉内皮细胞的培养和鉴定。用发色底物法测定PAI- 1活性。North ern印迹分析法检测PAI- 1mRNA的水平。采用基因重组技术构建含不同长度PAI- 15’上游序列的荧光素酶报告基因质粒 ,瞬时转染进入内皮细胞 ,并检测荧光素酶的表达情况。利用PCR和测序技术 ,对构建质粒上AP - 1元件进行定点突变。Westernblot印迹杂交检测内皮细胞核内激活蛋白 - 1(AP - 1)蛋白水平。结果 :5 0mg/LmmLDL诱导HUVECsPAI - 1活性和mRNA表达量明显增高 ,同时提高核内AP - 1蛋白水平。mmLDL显著诱导构建质粒pGL3-PAI- 1- 15 0 9/+90和pGL3-PAI- 1- 82 3/+90的荧光素酶活性 ,但对质粒pGL3-PAI - 1- 5 5 3/+90和pGL3-PAI- 1- 4 7/+90诱导作用不明显。当PAI- 15’上游序列的 3个AP - 1元件突变后 ,mmLDL的诱导作用明显降低。结论 :(1)mmLDL增强血管内皮细胞PAI- 1活性与mRNA表达 ;(2 )PAI- 1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关 ;(3)PAI- 15’上游序列中 3个AP - 1元件在mmLDL对PAI- 1诱导中具有重要调控作用。
- 李晓冬朱广瑾祖淑玉王雯
- 关键词：脐静脉内皮纤溶酶原激活物抑制物1脂蛋白类
- AP-1在血管内皮细胞PAI-1表达中的作用被引量：1
- 2003年
- 目的研究核转录因子激活蛋白-1(activatorprotein-1,AP-1)在肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)、弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimalmodifiedlowdensitylipoprotein,mmLDL)诱导血管内皮细胞PAI-1基因表达中的转录调控机制。方法进行人脐静脉内皮细胞(humanvascularendothelialcells,HUVECs)的培养和鉴定。采用基因重组技术,构建4个含人PAI-1基因不同长度5'上游序列的荧光素酶报告基因质粒,并结合瞬时转染分析实验,初步确定PAI-1基因上游具有调控作用的是位于-823到-553之间的AP-1元件。为进一步确证AP-1元件的调控作用,采用PCR法对该元件进行定点突变。结果TNF-α能明显诱导构建质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体诱导作用明显降低;mmLDL也能明显诱导质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体的诱导作用不明显。结论在TNF-α、mmLDL作用下,内皮细胞转录表达PAI-1基因过程中,3个AP-1元件起着重要的作用。
- 李晓冬祖淑玉王雯朱广瑾
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制剂内皮细胞
- 肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞PAI-1活性、mRNA的影响以及促分裂原活化蛋白激酶的作用被引量：1
- 2004年
- 目的 研究肿瘤坏死因子 α(TNF α)对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)活性及mRNA水平的影响 ,以及促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)在其中的作用。 方法 进行HUVECs的培养和鉴定。加入不同浓度TNF α ,并选择最佳时间条件。采用发色底物法测定PAI 1活性 ,Northernblot法检测PAI 1mRNA的水平。运用MAPK激酶抑制剂PD980 5 9观察对上述PAI 1l表达系统的作用。 结果 不同浓度TNF α(5× 10 4IU L、1× 10 5IU L、2× 10 5IU L和 4× 10 5IU L)均明显增高HUVECsPAI 1的活性 (P <0 0 1) ,1× 10 5IU LTNF α作用不同时间 (12、18、2 4h) ,PAI 1活性均明显增加 (P <0 0 1)。 1× 10 5IU LTNF α作用 18h时 ,PAI 1mRNA水平为正常对照组的 2 88倍。MAPK激酶抑制剂PD980 5 9能显著抑制TNF α对PAI 1活性和mRNA表达增强的作用。 结论 TNF α增强HUVECsPAI 1活性与mRNA表达 ;PAI 1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关 ;MAPK途径在TNF α诱导PAI 1反应中起着重要作用。
- 祖淑玉李晓冬王雯朱广瑾
- 关键词：肿瘤坏死因子PAI-1MRNA促分裂原活化蛋白激酶
