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李海泉
作品数:
3
被引量:5
H指数:2
供职机构:
南通大学附属医院
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串联siRNA干扰沉默结肠癌SW480细胞APRIL基因表达
被引量:2
2012年
目的检测串联siRNA对SW480细胞中增殖诱导配体(APRIL)基因的影响。方法设计并筛选针对APRIL基因的4条shRNA片段(sh644、shl451、shl938、sh2231),分别将其连接至pGenesil-1.1质粒表达载体,形成pGsh644、pGsh1451、pGshl938、pGsh2231单一表达载体,同时将4条shRNA连接至pGenesil4-T质粒形成pG4串联siRNA表达载体。阳离子脂质体法转染至结直肠癌细胞株SW480。实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测SW480细胞中APRILmRNA和蛋白表达水平。结果经酶切和测序鉴定,构建的串联siRNA质粒载体符合要求。几条siRNA均可有效抑制SW480细胞APRIL基因的表达,APRILmRNA的抑制率分别是pGsh644(56.2%)、pGshl451(49.5%)、pGshl938(50.9%)、pGsh2231(49.2%)、pG4(79.3%)。蛋白质表达抑制率分别为pGsh644(56.9%)、pGshl451(48.7%)、pGshl938(50.1%)、pGsh2231(46.4%)、pG4(87.5%)(P〈0.05)。其中以pG4抑制效应最强。结论与传统单一的siRNA表达载体相比,串联siRNA表达载体大大地敲低了结直肠癌细胞株中APRIL基因的表达,为针对结直肠癌APRIL基因的基因治疗提供研究基础。
卢美红
李海泉
汪桂华
王敬春
丁伟峰
王惠民
关键词:
增殖诱导配体
APRIL调节基质金属蛋白酶的表达对结直肠癌细胞转移侵袭能力的影响
被引量:1
2012年
目的研究增殖诱导配体(aproliferation.inducingligand,APRIL)对结直肠癌(colorec—talcancer,CRC)细胞转移侵袭能力和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)表达的影响,以进一步明确APRIL在CRC转移中的作用。方法APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA—APRIL)转染人CRC细胞SW480,APRIL重组蛋白(rhAPRIL)刺激CRC细胞HCT-116,Transwell小室转移及侵袭试验分析APRIL对CRC细胞转移及侵袭能力的影响;RT-PCR、ELISA检测MMPs的表达变化。结果siRNA.APRIL转染的SW480细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著减少(P〈0.05),rhAPRIL刺激的HCT-116细胞TransweH小室试验转移及侵袭细胞数显著增多(P〈0.05);MMP-2、MMP-9及TIMP-1mRNA,分泌型的MMP-2、MMP-9蛋白表达在转染或刺激前后差别均有统计学意义(P〈O.05);MMP的抑制剂GM6001处理后,SW480对照组和rhAPRIL刺激后的HCT-116细胞Transwell小室侵袭细胞数显著减少(P〈O.05)。结论APRIL通过调节MMPs的表达促进结直肠癌的侵袭和转移,可为结直肠癌转移的干预及治疗提供新的靶点。
汪桂华
王峰
丁伟峰
王旭东
徐锦
李海泉
王惠民
关键词:
增殖诱导配体
结直肠癌
基质金属蛋白酶
医学实验室血清球蛋白不确定度评定
被引量:2
2015年
目的以医学实验室血清球蛋白为例,研究如何用top-down法评定测量不确定度,为临床决策提供一定依据。方法应用top-down法评定不确定度,先评定出有证参考物质(CRM)总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)的不确定度,再把这两项的不确定度合成,即为球蛋白(Glb)不确定度。结果浓度为70.10 g/L的TP、37.2 g/L的Alb的相对合成不确定度分别为1.77%、1.83%。Glb相对合成不确定度为2.55%,相对扩展不确定度为5.10%(k=2)。结论用top-down法评定Glb不确定度具有可行性,其可判断患者两次测量结果是否具有统计学差异,对患者的临床诊断和治疗具有潜在指导作用。
赵芳
季伙燕
李海泉
王建新
苏建友
沈荣春
王惠民
邵可可
关键词:
测量不确定度
血清球蛋白
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