李玩生
- 作品数:14 被引量:19H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 合作小型猪T细胞受体α链的基因结构及其多样性研究
- 以公开的人类、小鼠和猪TCRα链基因为参考序列,用RT-PCR法从健康的合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中克隆了93个猪TCR α基因(简称STA).测序分析表明,克隆的猪TCRα链的基因都含有可变的信号肽区和V...
- 高建平李玩生曾爽房水祥景志忠
- 关键词:免疫机能
- 文献传递
- 合作小型猪T细胞受体α链的基因结构及其多样性被引量:1
- 2014年
- 目的探讨猪TCR基因分子结构的复杂性及其与人类的相似性。方法以公开的猪TCRα链基因为参考序列设计两对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中克隆了93个猪TCRα基因(简称STA)。结果测序分析表明,克隆的猪TCRα链的基因均含有可变的信号肽区和V区、高变的J区和恒定的C区的基因片段,但基因间的核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的同源性在68.4%-98.7%,这与TCRα链的基本基因结构特征相一致。依据TCRα基因的同源性对其分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区和CDR3区都存在一些变异集中点和变异热点区。用IMGT/V-QUEST分析方法可将合作小型猪TCRαV区(STAV)、J区(STAJ)基因片段与人类的进行比较分析,发现合作小型猪TCRα与人类的遗传演化关系较近,每个序列都能找到与人类对应的TRAV、TRAJ基因片段,甚至V区的相似性可达92%以上。结论近交培育的合作小型猪在正常状态具有应对外界复杂微生物等环境的TCR遗传多样性分子基础,且适合作为人类免疫学及疾病研究的动物模型。
- 高建平李玩生曾爽房永祥冯海燕杨孝朴景志忠
- 关键词:生物信息学多样性
- 猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性分析被引量:1
- 2014年
- 设计猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了82个猪TCRβ基因(简称STB)。测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区的基因片段,绝大部分基因间的核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的相似性在36.6%~99.9%,这与TCRβ链的基本基因结构特征相一致。猪TCRβ基因的分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在同一类基因分子中其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区之间的差异主要由V基因片段的多态性引起,而CDR3区的差异主要由其D、J基因片段的多样性造成。同时发现猪TCRβ与人类的遗传演化关系较近,大部分基因序列都能找到与人类对应的TRBV、TRBD、TRBJ基因片段,但又存在一定的差异性。这表明,猪TCRβ基因既有应对外界复杂微生物环境的免疫多样性分子遗传基础,也有物种间的相似性与特异性。
- 曾爽李玩生房永祥冯海燕陈国华何小兵贾怀杰景志忠
- 关键词:生物信息学多样性
- 猪瘟病毒GSLZ株的分离与鉴定被引量:7
- 2011年
- 采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株。对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株以及国内外分离株的同源性为83.1%~99.8%,预测的抗原表位与中国C株相比发生了漂移。将GSLZ分离株细胞培养物分别接种家兔和仔猪,结果家兔无体温变化,而仔猪可复制出典型的猪瘟临床症状和病理变化。表明,分离的GSLZ株是1株CSFV野毒株,其对仔猪有很强的毒力,但不引起家兔发病,能产生免疫反应。
- 何小兵贾怀杰陈国华房永祥李玩生曾爽景志忠
- 关键词:猪瘟病毒
- 合作小型猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性研究
- 以猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了 82个猪TCRβ基因(简称STB).测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高...
- 景志忠房永祥贾怀杰陈国华何小兵曾爽李玩生冯海燕
- 关键词:生物信息学多样性
- 猪T细胞受体γ链基因的克隆及生物信息学分析
- 2010年
- 目的:克隆猪T细胞受体γ链(pTCR-γ)基因,用以研究猪T细胞受体分子结构与功能。方法与结果:以GenBank上登载的pTCR-γ基因为参考序列,用RT-PCR法从猪外周血淋巴细胞中克隆pTCR-γ基因。序列分析表明,pTCR-γ基因开放读框为1026bp,编码341个氨基酸残基,含有由23个氨基酸残基构成的信号肽序列;与参考序列相比,在核苷酸和推导氨基酸序列上的同源性分别为95.6%和88.8%;系统进化分析发现,该基因与绵羊、恒河猴、人、马、牛的同源性相对较高,与褐鼠、家犬、家鼠、家猫的同源性次之,而与禽类、鱼类的同源性最低;生物信息学结构预测表明猪T细胞受体γ链含2个结构域,其中1个为IG_LIKE1结构域(IGv结构域),由第14~114位共101个氨基酸残基组成;另一个为IG_LIKE2结构域(IGc结构域),由第143~238位共96个氨基酸残基组成。结论:克隆并应用生物信息学技术分析了猪T细胞受体γ链基因序列及编码蛋白的结构特征,为进一步研究γ链的结构与功能奠定了基础。
- 李玩生房永祥曾爽景志忠
- 关键词:基因克隆生物信息学
- 猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒增强亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒抗原免疫水平的研究被引量:2
- 2010年
- 分析CpG基序与猪IFN-γ基因组合的重组表达质粒对口蹄疫灭活抗原的免疫佐剂效应。以亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒为抗原,与含有猪IFN-γ基因和CpG基序的重组质粒配伍,采用肌肉注射法免疫小鼠,加强免疫后检测口蹄疫特异性抗体和中和性抗体水平、T淋巴细胞增殖反应、体内细胞毒性T细胞杀伤反应以及细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ的分泌水平。发现猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒相对单一的因子能诱导更强的体液免疫和细胞免疫反应水平,尤其在中和性抗体和抗原特异性CTL反应方面更为明显。猪IFN-γ和CpG基序在诱导小鼠抵抗亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒免疫方面具有良好的佐剂效应,其重组质粒可望成为一种有前途的新型免疫佐剂。
- 赵娜陈国华房永祥李玩生贾怀杰景志忠
- 关键词:Γ干扰素CPG基序免疫佐剂
- 合作小型猪培育及其免疫学分子遗传特性研究
- 免疫识别是机体产生免疫反应的前提,它包括病原的天然免疫的模式识别以及基于抗原递呈细胞(APC)和T/B细胞的获得性免疫的特异性识别。其中前者主要通过模式识别受体如Toll样受体(TLRs)等,以识别各种病原相关分子模式(...
- 景志忠贾怀杰房永祥莫斯科冯海燕李玩生陈国华段凤云曾爽何小兵
- 关键词:TOLL样受体免疫识别
- 猪γδ T淋巴细胞亚群的研究进展
- 2011年
- 在概述猪γδ T淋巴细胞亚群的发现、组织分布及其细胞所占比例的基础上,重点介绍了其基因结构与多样性以及细胞的功能和抗原识别的机制,以加深对猪天然免疫应答独特性的理解。
- 李玩生曾爽陈国华景志忠
- 关键词:T淋巴细胞T细胞抗原受体基因结构天然免疫
- 合作小型猪免疫识别和应答多样性与特异性分子遗传基础研究
- 机体免疫识别和应答主要与免疫细胞特别是抗原递呈细胞(APCs)和T淋巴细胞上的许多免疫识别和应答关键分子如参与天然免疫的TOLL样受体(TLR)以及参与获得性免疫的主要组织相容性复合物(MHC)、T细胞受体(TCR)和C...
- 景志忠房永祥李玩生莫斯科冯海燕王生富何小兵姚文娟陈国华曾爽贾怀杰
- 关键词:多样性特异性免疫遗传学