李瑾昱
- 作品数：16 被引量：53H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西妥昔单抗对非小细胞肺癌A549细胞的抗肿瘤效应及其机制探讨被引量：1
- 2013年
- 目的探讨西妥昔单抗对K-ras突变的非小细胞肺癌A549细胞的体外生长抑制及凋亡诱导作用。方法采用CCK-8法及流式细胞仪分别检测西妥昔单抗对A549细胞的生长抑制作用及凋亡诱导情况;通过基因芯片检测技术比较西妥昔单抗作用组与对照组K-ras突变的A549细胞肿瘤相关基因表达的差异。结果西妥昔单抗对K-ras突变的A549细胞具有生长抑制及凋亡诱导作用。西妥昔单抗作用后,有10个基因表达显著上调,9个基因表达显著下调。Real-timePCR检测验证西妥昔单抗作用后STAT1基因及IGFBP3基因表达显著上调。结论西妥昔单抗对K-ras基因突变的肺腺癌A549细胞具有生长抑制及凋亡诱导作用,STAT1和IGFBP3基因表达上调可能与西妥昔单抗对非小细胞肺癌的作用机制相关。
- 李瑾昱张国庆焦顺昌温新宇孙胜杰
- 关键词：西妥昔单抗寡核苷酸序列分析胰岛素样生长因子结合蛋白质3
- 西妥昔单抗疗效预测指标的研究进展被引量：5
- 2010年
- 李瑾昱焦顺昌
- 关键词：西妥昔单抗KRASEGFR
- 阻断转化生长因子-β信号通路对自然杀伤细胞体外抗肿瘤效应的影响
- 2010年
- 目的将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞阻断其转化生长因子-β(TGF-β)信号,观察对人结肠癌细胞株HT-29的体外杀伤能力。方法将HT-29细胞与TGF-β1共孵育,使其终浓度为10ng/ml,采用AmaxaNucleofector技术分别将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和pIRES2-AcGFP空质粒转染原代NK细胞,活细胞计数试剂盒-8法检测二者对HT-29的体外杀伤活性。结果 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和绿色荧光蛋白空质粒的转染效率分别为18.85%和35.28%;Western blotting、RT-PCR证实DNTβRⅡ在NK细胞表达;与TGF-β1共孵育后,原代NK细胞的杀伤活性减弱(效靶比10∶1时14.40%±2.00%比26.14%±2.50%,P<0.05;效靶比20∶1时19.18%±2.49%比40.81%±3.50%,P<0.05);pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染组NK细胞的杀伤活性高于绿色荧光蛋白对照质粒转染组(效靶比10∶1时21.17%±2.49%比11.48%±1.11%,P<0.05;效靶比20∶1时35.30%±3.78%比17.19%±2.29%,P<0.05)。结论 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞提高了NK细胞的体外抗肿瘤活性,为NK细胞过继性免疫治疗提供了新的方法。
- 杨波刘辉张丽娅李瑾昱白莉孙胜杰焦顺昌
- 关键词：转化生长因子自然杀伤细胞结直肠癌
- 重组人p53腺病毒联合顺铂对肺腺癌A549细胞基因表达的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究重组人p53腺病毒(rAd-p53)联合顺铂对肺腺癌A549细胞基因表达的影响,探讨rAd-p53增强顺铂对A549细胞抑制作用的机制。方法通过基因芯片检测技术,比较rAd-p53联合顺铂与单独顺铂处理后的肺腺癌A549细胞肿瘤相关基因表达的差异,采用SAM软件对结果进行分析。结果 rAd-p53联合顺铂与单独顺铂处理的A549细胞比较,15个基因表达显著上调,28个基因表达显著下调。结论 rAd-p53增强顺铂对A549细胞的抑制作用与导入外源性p53基因后,p53基因表达上调并引起调控细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡的一系列基因的表达变化。
- 汪进良焦顺昌胡毅李瑾昱
- 关键词：重组人P53腺病毒肺腺癌A549细胞株基因芯片
- 表皮生长因子受体表达水平对西妥昔单抗及其介导的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用杀伤肺腺癌A549细胞的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)表达水平对西妥昔单抗及其介导的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)对肺腺癌A549细胞杀伤的影响。方法以肺腺癌A549细胞作为靶细胞,NKTm细胞作为效应细胞,将pEGFR-EGFP质粒用核转染技术导入A549细胞,免疫组织化学法检测转染组与野生组A549细胞表面EGFR蛋白的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8法检测西妥昔单抗以及西妥昔单抗介导的ADCC作用对转染后A549细胞与野生组A549细胞的体外杀伤率。结果免疫组织化学结果显示,野生组A549细胞EGFR表达呈弱阳性,而转染后的A549细胞EGFR表达呈强阳性。西妥昔单抗介导的ADCC作用对转染后高表达EGFR的A549细胞具有更强的杀伤作用(P<0.05),而西妥昔单抗单独作用时,转染组与野生组间的杀伤率差异无统计学意义(P>0.05)。结论细胞表面EGFR蛋白的表达水平能够影响西妥昔单抗介导的ADCC作用对肺腺癌A549细胞的杀伤,而对西妥昔单抗本身的杀伤作用无影响。
- 李瑾昱焦顺昌张国庆孙胜杰
- 关键词：西妥昔单抗表皮生长因子受体
- 重组嵌合受体anti-erbB2 scFv-CD28-ζ全基因合成及其真核表达载体的构建
- 2010年
- 目的通过合成嵌合受体anti-erbB2scFv-CD28-ζ的基因并建立其真核表达载体,为进一步研究增强NK细胞抗瘤活性创造条件。方法在DNA2.0和Gene2Oliga软件辅助下对目的基因密码子及RNA二级结构进行优化并在序列的两端分别引入HindⅢ和EcoRI限制酶切位点,根据基因序列分析的结果化学合成长度为50～70bp的单链oligo,利用PCR将合成的oligo拼接成完整的序列,将合成好的序列装入PMD-18T载体并转染至感受态细胞DH5α,测序验证重组克隆中基因序列。完整的序列经HindⅢ和EcoRI酶切后连接至目的载体PCDNA3.1(+)中,并转染COS-7细胞。结果合成DNA片段长度为1803bp,经测序验证与目的基因嵌合受体anti-erbB2 scFv-CD28-ζ大小、序列一致。结论构建其真核表达载体PCDNA3.1(+)后转染COS-7细胞,实现了anti-erbB2 scFv-CD28-ζ基因在COS-7细胞中的体外转染及瞬时表达。
- 刘辉杨波刘天懿焦顺昌李瑾昱
- 关键词：基因表达转染
- 西妥昔单抗与NK、T混合淋巴细胞联合应用对肺癌细胞的抑制作用
- 2013年
- 目的:探讨西妥昔单抗与NK、T混合淋巴细胞联合应用对肺癌细胞的体外抑制作用。方法:体外诱导和扩增外周血淋巴细胞,流式细胞仪检测扩增后细胞表型。CCK-8法检测西妥昔单抗与NKTm细胞以不同时间点联合应用对A549细胞的抑制率,采用金氏公式计算增效Q值,评价合用的效应强度是否优于单用。结果:西妥昔单抗与NK、T混合淋巴细胞联合应用组的抑制率高于两者单独应用组(P<0.01),联合应用具有协同效应(Q>1.15),西妥昔单抗应用后18小时再给予NK、T混合淋巴细胞组的Q值最高(Q=1.31)。结论:西妥昔单抗与NK、T混合淋巴细胞联合应用对A549细胞的抑制具有协同效应。
- 李瑾昱张国庆孙胜杰焦顺昌
- 关键词：西妥昔单抗自然杀伤细胞T淋巴细胞肺癌
- NSCLC患者P53蛋白异常表达与铂类化疗敏感性的Meta分析
- 目的：探讨NSCLC中P53蛋白表达与对铂类化疗敏感性的关系。
方法：应用Meta分析Dersimonian-Laird分析模型对有关NSCLC中P53蛋白表达与对铂类化疗敏感性的文献进行综合定量评价。
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- 汪进良焦顺昌李瑾昱
- 关键词：P53蛋白铂类药物化疗敏感性META分析
- 文献传递
- 非小细胞肺癌患者p53蛋白异常表达与铂类化疗敏感性的Meta分析被引量：5
- 2008年
- 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中p53蛋白表达与对铂类化疗敏感性的关系。方法应用Meta分析DerSimonian-Laird分析模型对有关NSCLC中p53蛋白表达与对铂类化疗敏感性的文献进行综合定量评价。结果入选16篇文献共1070例患者,p53阳性患者539例,p53阳性率50.4%。铂类化疗有效患者414例,合并有效率38.7%。异质性检验显示χ2=47.57,P<0.0001,文献具有异质性,采用随机效应模型DerSimonian-Laird法进行分析,合并优势比(OR)为1.37,95%可信区间0.84～2.24。结论NSCLC中p53蛋白阴性表达患者对铂类药物化疗敏感性并不明显优于p53蛋白阳性患者。
- 汪进良焦顺昌叶平李瑾昱
- 关键词：非小细胞肺癌P53铂META分析
- NK、T混合淋巴细胞与顺铂以不同时序联合作用于肺癌细胞的体外研究
- 2008年
- 目的:探讨NK、T混合淋巴细胞(NKTm)与顺铂联合应用于肺巨细胞癌PLA-801D细胞的最佳时序方案,为临床治疗提供实验依据。方法:按加入NK、T混合淋巴细胞(NKTm)和顺铂的时序不同分为7个时序组,每个时序组中设单顺铂组,单NK、T混合淋巴细胞(NKTm)组及联合组,MTT法分别测定各组对PLA-801D细胞的抑制率。结果:各时序组中联合组的抑制率高于单顺铂组和单NK、T混合淋巴细胞(NKTm)组(P<0.01),各时序组联合应用的Q值均大于1.15,且先用NK、T混合淋巴细胞(NKTm)4 h后再用顺铂组的Q值最大(Q=2.297)。结论:体外研究表明,NK、T混合淋巴细胞(NKTm)与顺铂联合应用具有协同效应,先用NK、T混合淋巴细胞(NK-Tm)后4 h再用顺铂为最佳时序方案。
- 李瑾昱焦顺昌林星石张国庆汪进良
- 关键词：顺铂
