段玉友 作品数:36 被引量:223 H指数:10 供职机构: 扬州大学农学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省科委自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
鹅源腺病毒Y21G4株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析 刘岳龙 崔治中 徐福洲 段玉友 孙怀昌 秦爱建 何良梅新城疫病毒下-NH糖蛋白和马立克氏病毒gB糖蛋白致病作用 卢景良 崔治中 王莉林 曹殿军 秦爱建 陆长明 张莹 段玉友 该项研究应用单克降抗体(McAb)、基因工程技术手等手段,以严重危害世界养禽业的新城疫(ND)和马立克氏病(MD)为研究对象,通过McAb功能抑制试验和HN、F基因瞬时表达试验,探讨了NDV和MDV糖蛋白的致病作用及其与...关键词:关键词:兽医学 新城鸡疫病毒 马立克氏病毒 病理学 兔出血症病毒形态学的研究 被引量:1 1993年 用氯仿抽提、PEG沉淀、Scpharosc 4B柱层析、超离及蔗糖密度梯度离心等方法纯化了兔出血症病毒。电镜下观察到兔出血症病毒粒子为无囊膜,大小为32~34nm。外观呈现独特的结构。正二十面体对称,髓蕊直径15~17nm,衣壳厚8~9nm。由内、外衣壳组成。外衣壳上按T=3排列着32个壳粒,壳粒呈中空的管状,长5~6nm,直径约4~5nm。中心孔径约2nm。有一环状呈不连续的内衣壳,厚2~3nm,内环上不连续每段约4nm,与壳粒相连。在5、3和2次轴对称时,病毒表面有大的、3个以上特征性的表面凹陷(Surfacc dcpression),这种表面凹陷呈一定的分布。呈五次轴对称时,病毒表周有10个向外管状突起。病毒表周不规则,表面含丰富的突起和大、小的凹陷(dcpression and small indentation)是兔出血症病毒形态学特点之一,其大小和形态,在动物病毒中比较类似于嵌杯样病毒。 段玉友 王永坤 崔治中关键词:兔病 出血症病毒 形态学 I型马立克氏病毒38kD磷蛋白与Ⅱ和Ⅲ型病毒间的交叉免疫反应 被引量:13 1994年 由致病性Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV)特异性的单克隆抗体H_(19)制备亲和层析柱,从感染重组杆状病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞系Sf9细胞中提纯MDV的pp38基因表达产物,以此免疫小鼠制备抗血清,测定其与不同型MDV毒株感染的鸡胚成纤维细胞免疫反应性,同时也用不同型MDV毒株(HVT,Z4)制备的抗血清和自然感染发病鸡血清分别与感染重组病毒的Sf9细胞进行免疫交叉反应.试验结果表明,完整的Ⅰ型MDV来源的pp38基因产物与所试Ⅱ型Z4株和Ⅲ型HVT Fc126毒株在抗原性上有显著交叉反应.这一结果表明,在Ⅱ型和Ⅲ型MDV毒株中可能存在着pp38的类似物. 秦爱建 崔治中 段玉友关键词:马立克氏病 病毒 磷蛋白 交叉免疫 猪MHCⅠ类基因区基因组DNA的RFLP初步分析 被引量:3 1993年 用4种限制性内切酶EeoRI、BamHI、HindⅢ和PstI对纯种二花脸猪和梅山猪白细胞基因组DNA进行内切酶消化和电泳,经Southcrn blot将DNA转移到NC膜上。将来源于猪MHC的Ⅰ类基因猪移植抗原(SLA)基因片段克隆PD1-A DNA(4.3kb)用digoxigcnin标记作为DNA探针,进行分子杂交反应。比较了不同品系和个体间的限制性酶切片段长度多态性(RFLP),结果表明:(1)经各种单酶消化后分子杂交反应中。产生1~5条大小不等的片段。长度范围介于9.0~1.0kb之间;(2)在使用4种酶单独消化时。1头二花脸公猪不仅与2头梅山母猪显示不同的RFLP带型,而且与2头二花脸母猪也显示完全不同的带型;(3)在使用4种酶单独消化时,2头梅山母猪表现完全相同的RFLP带型;(4)在使用 EcoRI、BamHI、Pstl 3种酶单独消化时。2头二花脸母猪呈现完全相同的RFLP带型,但在用HindⅢ酶消化时,虽然都有一条共同带,但其中1头多一条带。(5)如果比较2头梅山母猪及2头二花脸母猪,它们的基因组DNA的EcoRI和BamHI消化的带型完全一致;但它们的HindⅢ和PstI消化的带型不同,显然有一条共同的带。用SLA基因克隆PDI-A作为探针,结果表明。不仅二花脸猪的RFLP表现与梅山猪有所区别,而且似乎二花脸猪更易表现个体间差异。 段玉友 王林云 崔治中关键词:基因组 DNA 基因 多态性 雏鸡传染性脑脊髓炎病毒的分离与初步鉴定 被引量:7 1993年 用神经胶质细胞培养和6日龄SPF鸡胚卵黄囊接种,分离出一株病毒,经免疫荧光及琼脂扩散试验,证明该病毒为禽传染性脑脊髓炎病毒. 秦爱建 段玉友 沈保山 周阳生 李厚达 崔治中 段素华 郁培华关键词:鸡病 雏鸡 传染病 脑脊髓炎 病毒 鹅细小病毒核酸探针的制备及应用 被引量:23 1993年 由纯化的鹅细小病毒(即小鹅瘟病毒,GPV)提取病毒核酸,经琼脂糖凝胶电泳,在以 Lambda DNA-HindⅢ消化物作为标记时,病毒核酸条带位于4.3~6.5kb 之同。约5.0kb.由制备性凝胶电泳纯化的病毒核酸在非变性条件下同非放射性 digoxigenin 进行标记而制备 DNA探针.在特异性检测中.该探针仅与小鹅瘟病毒核酸发生阳性反应,而不与正常鹅胚组织、鹅胚尿囊液、鹅肝组织、鹅肠组织及其他病毒核酸抽提物发生反应.该探针能有效地检出通过 Southern blot 和 dot blot 固定到硝酸纤维素膜上的同源 DNA(能检出0.1pg).对送检的疑患小鹅瘟的病鹅肝脏、肠及其内容物抽提的核酸检测的结果与临床诊断和荧光抗体检测的结果完成一致.整个检测过程快速、准确和方便。 段玉友 崔治中 王永坤关键词:鹅病 细小病毒 核酸探针 鹅源腺病毒基因组DNA物理图谱的构建 被引量:7 2000年 将鹅源腺病毒Y81G4 株全基因组DNA的HindⅢ酶切片段分别插入质粒 pUC18,成功构建了全基因组DNA文库。在此基础上 ,将重组质粒携带的插入片段切出、回收并分别用地高辛标记后作为探针 ,与经限制酶BamHI、EcoRI、PstI、EcoRV消化的病毒基因组DNA进行SouthernBlotting ,杂交结果经比较综合后获得了该病毒基因组DNA的HindⅢ、BamHI、EcoRI、PstI、EcoRV限制性内切酶的物理图谱。利用已发表的含有鸡EDS76病毒AA 2株基因组DNA右末端的重组质粒pBE4 2作为探针 ,与本病毒两末端重组质粒进行SouthernBlotting ,根据同源性杂交结果确定了本病毒基因组DNA物理图谱与EDSVAA 2株相应的方向。本病毒基础因组DNA物理图谱的精确构建 ,为进行基因组结构分析 ,筛选复制非必需区 。 徐福洲 崔治中 刘岳龙 段玉友 孙怀昌关键词:基因组DNA 物理图谱 鹅源腺病毒Y21G4株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析 对鹅源腺病毒株Y81G4基因组二侧末端序列测定和比较,鉴定出其ITR区。Y81G4株ITR全长为125bp,远长于其它禽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群腺病毒ITR长度。在Y81G4株ITR中有一些腺病毒ITR序列特征:①5′-C(A/T)... 刘岳龙 崔治中 徐福洲 段玉友 孙怀昌 秦爱建 何良梅文献传递 鹅源腺病毒全基因组DNA酶切片段的克隆 被引量:5 2001年 利用 1株鹅源腺病毒 Y81G4 株 ,经鹅胚增殖后收获尿囊液 ,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组 DNA.病毒 DNA经 H ind 酶切后共产生 1 0个片段 ,分别回收各酶切片段 ,与经 H ind 单酶切的p UC1 8连接 ,获得 8个不同的重组质粒 .对于未克隆到的两末端片段 ,经碱处理去除末端蛋白后 ,以平端和 H ind 粘端与经 Sma 和 H ind 双酶切的 p UC1 8连接 ,获得了重组质粒 p GAHC和 p GAHI.克隆的各酶切片段 ,通过酶切电泳和 Southern blotting结果鉴定 ,证明已分别克隆到该病毒基因组 DNA H ind 酶切片段 ,且各酶切片段大小之和约为 3 2 . 徐福洲 崔治中 段玉友 刘岳龙 孙怀昌 何良梅关键词:基因组 克隆