王鲁彦 作品数:3 被引量:6 H指数:1 供职机构: 浙江农林大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的克隆和原核表达 被引量:5 2013年 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可引起各种年龄猪的呼吸系统和母猪繁殖机能障碍,导致猪场损失严重,其中GP5蛋白在PRRSV病毒侵入、致病及免疫保护中发挥重要作用。提取猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得GP5基因,片段大小为600bp。将GP5基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,菌落PCR和限制性内切酶双酶切鉴定,重组质粒PGEX-6P-1-GP5构建成功,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot分析重组蛋白的反应原性。结果表明,重组融合蛋白His-GP5分子质量约为41ku,主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体总蛋白的35%以上,纯化后的重组蛋白占总蛋白的75%以上;并且该重组蛋白能与猪的阳性血清反应,说明其具有较好的免疫原性。研究结果为基因工程疫苗的研发和GP5的抗体制备奠定了基础。 袁庄川 王鲁彦 梅匀安 张敏 王晓杜关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 原核表达 纯化 利用杆状病毒表达系统制备猪流行腹泻病毒S1蛋白的方法 本发明属于微生物技术领域,旨在提供一种利用杆状病毒表达系统制备猪流行腹泻病毒S1蛋白的方法。包括以下步骤:PEDV的S1基因克隆和密码子的优化;构建PEDV‑S1基因重组杆状病毒表达载体;表达重组PEDV‑S1蛋白的杆状... 王晓杜 宋厚辉 邵春艳 何海建 王鲁彦 孙静 李群景 姜胜 周莹珊 吴媛文献传递 猪繁殖与呼吸综合征的抗病育种研究进展 被引量:1 2014年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是近期危害养猪业最重要的疾病之一。培育抗病性品种是该病综合防治的一个有效方法。文章围绕该病抗病育种候选基因研究的主要进展进行综述,内容涉及病毒特异性受体基因、先天性免疫相关基因、抗原递呈信号通路相关基因、胞内miRNA等,并重点就今后PRRSV疾病耐受性和提高适应性免疫应答能力的研究进行展望。 王晓杜 镡忠斌 王鲁彦 何珂 李开桢 潘清煜 周圻关键词:猪繁殖与呼吸综合征 抗病育种 候选基因