石燕
- 作品数:26 被引量:50H指数:4
- 供职机构:上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科委科技攻关项目上海市市属博士学科点建设基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- hCGb-CTP多聚体-3C3d融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2006年
- 目的:在巴氏毕赤酵母细胞中表达hCGβ-(CTP)n(n=3,4)-3C3d融合蛋白。方法:将(CTP)n(n=3,4)基因与分子佐剂C3d基因的三聚体连接后,克隆入载体pPIC9K得到表达质粒pPIC9Khis6(CTP)n(n=3,4)3C3d,经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序确认后电转入酵母细胞中进行表达。结果:在酵母细胞内检测到目的基因的表达产物,Westernblot结果显示它们的分子量分别为125kD和138kD左右。结论:运用巴氏毕赤酵母表达系统成功表达了hCGβ-(CTP)n(n=3,4)-3C3d融合蛋白,为进一步研究其免疫原性和用作抗肿瘤疫苗奠定了基础。
- 冯文华石燕喻光荣沈卫英蒋俶申庆祥
- 关键词:C3D毕赤酵母
- 免疫抑制因子MNSFbeta基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用
- 本发明提供了免疫抑制因子MNSFbeta基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用,所述模型是一种非人哺乳动物的雌性生育障碍动物模型。本发明还鉴定了MNSFβ基因的功能。所述动物模型的MNSFβ基因失活,造成所述动物模型中的胚...
- 王健何亚萍孙兆贵蒋雅红石燕
- 文献传递
- 以FSH受体的配体结合部位作为抗原进行主动免疫对大鼠生殖的影响被引量:1
- 2013年
- 目的重组表达FSHR抗原主动免疫SD大鼠,探讨FSHR免疫抑制对大鼠卵巢功能的影响,以构建免疫异常导致的卵巢早衰(POF)大鼠模型。方法以FSHR分子N端配体受体结合区片段为靶位,制备重组抗原,同时针对免疫原性预测位点人工合成3段肽,以佐剂为对照,免疫大鼠,免疫后检测血清中的FSHR抗体滴度。在体外利用免疫荧光技术检测抗血清对卵丘复合体中FSHR的识别能力:并且研究FSHR主动免疫后卵巢对PMSG反应性的变化;检测血清FSH和雌激素水平,并与雄鼠交配,观察FSHR主动免疫对窝仔数的影响。结果主动免疫后血液中产生高滴度水平的抗体,在免疫周期后持续6周无明显下降。主动免疫产生的抗体可以与颗粒细胞特异性结合:同时,卵巢对促性腺激素的反应性降低。重组蛋白免疫组的大鼠动情周期紊乱,发情期缩短,血液FSH水平上升,而雌激素水平降低,与正常雄性交配窝仔数下降。结论人工制备大鼠的FSHR免疫原,主动免疫大鼠,导致大鼠血液出现高水平的FSHR抗体,可以与卵巢颗粒细胞上的FSHR特异结合,导致其对促性腺激素的反应性降低,进而引发大鼠出现卵巢早衰的症状。
- 石燕郁琳朱燕蒋雅红孙兆贵王健
- 关键词:FSHR主动免疫SD大鼠
- Uchl1及其关联蛋白参与小鼠实验性隐睾中精母细胞凋亡(英文)被引量:4
- 2014年
- 以往研究显示Uchl1参与调节生理状况下小鼠精母细胞的凋亡。本文以小鼠实验性单侧隐睾为研究模型,以切除单侧睾丸和假手术作为对照,用苏木精-伊红(HE)染色和DNA末端标记(TUNEL)观察生精细胞的形态和凋亡情况;用免疫组化分析Uchl1及其相关蛋白Jab1和p27kip1在隐睾症的热应激反应导致精母细胞损失过程中的变化情况,并用亲和分析(pull-down)和免疫荧光共定位检测三种蛋白在精母细胞的关联性。结果显示,Jab1和p27kip1,与Uch1平行,在具凋亡形态的精母细胞中响应热应激而含量增加,而在多核巨细胞中无类似变化。Jab1可以与睾丸蛋白提取物中Uchl1结合,并与Uchl1和p27kip1特异性地在具凋亡形态的精母细胞中共定位。以上结果提示,Uchl1蛋白的积累参与隐睾中热应激诱导的生精细胞凋亡过程,但不影响接下来的多核巨细胞的形成,且Uchl1蛋白的作用机制涉及Jab1和p27kip1参与的一种新途径。
- 杜平姚余卫石燕顾正王健孙兆贵左嘉客
- 关键词:隐睾热应激反应精母细胞
- hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4在大肠杆菌中的表达及纯化
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达hCGβ-(CTP)_4、hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4融合蛋白,并对蛋白进行分离纯化。方法:将pBSMR-(CTP)_4中的(CTP)_4基因片断克隆入表达载体pET-28a(+),得到表达质粒pET-28a(+)-(CTP)_4。将PCR获得的补体C3d-P28 DNA序列以头尾串连的方式构建四聚体。将(C3d-P28)_4基因片断克隆入pBSMR-(CTP)_4,得到pBSMR-(CTP)_4-(C3d-P28)_4,进一步得到表达质粒pET-28a(+)*(CTP)_4-(C3d-P28)_4。将表达质粒pET-28a(+)-(CTP)_4和pET-28a(+)-(CTP)_4- (C3d-P28)_4分别转化入大肠杆菌BL21(DE3),表达融合蛋白hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4。采用Ni-NTA-resin和凝胶过滤方法纯化蛋白。结果:菌株经IPTG诱导后检测到目的基因的表达产物, SDS-PAGE和Western blot结果显示融合蛋白的分子量分别为27kD和40kD左右。结论:在BL21 (DE3)中成功表达了hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4融合蛋白,并确立了纯化方法,为进一步研究其免疫原性和应用于抗肿瘤疫苗奠定了基础。
- 石燕蒋椒沈卫英蒋雅红申庆祥
- 关键词:C3D分子佐剂纯化
- 中药干预小鼠模型着床障碍的分子机制初探
- 研究目的:从母体内环境方面研究补肾方和疏肝方对小鼠着床障碍模型干预的疗效差异;从内分泌调控的着床相关基因途径探讨体现补肾法和疏肝法的上述两方作用的机制.研究方法:本课题以张教授临床治疗不孕症常用的两种协定方为基础,以米非...
- 郝立爽曹阳庄梦婓石燕郁琳孙兆贵张婷婷
- 关键词:孕激素PR着床率
- 具有磁场发生装置的动物模型制备装置
- 一种具有磁场发生装置的动物模型制备装置,包括箱体、磁场发生装置、磁场检测装置、温度检测与调控装置、电压控制装置、通风装置、照明装置、和冷却装置;磁场发生装置位于箱体中并具有用于放置实验动物或实验动物饲养容器的空腔;箱体的...
- 孙兆贵袁伟郁林石燕徐彦王伟锋苗茂华施惠娟
- 文献传递
- 一种卵巢早衰非人哺乳动物模型的制备方法及其应用
- 本发明提供了一种卵巢早衰非人哺乳动物模型及其制备方法,所述动物模型在筛选卵巢早衰治疗药物中的应用以及筛选卵巢早衰治疗药物的方法,和三种合成多肽以及包含所述多肽的药物组合物。本发明的非人哺乳动物模型简便易得,能够用于研究性...
- 孙兆贵王健石燕郁琳朱燕蒋雅红
- 文献传递
- 一种啮齿类动物模型的制备与应用
- 本发明涉及一种啮齿类动物模型的制备方法及其应用。具体地说,本发明人利用低频电磁场处理性成熟前以及成年的雌性大鼠和性成熟前以及成年的雄性大鼠,得到发情频率和窝仔数提高的成年雌性大鼠和精子活动性降低以及精子密度降低的成年雄性...
- 孙兆贵袁伟郁林石燕徐彦王伟锋苗茂华施惠娟
- 文献传递
- 具有磁场发生装置的动物模型制备装置
- 一种具有磁场发生装置的动物模型制备装置,包括箱体、磁场发生装置、磁场检测装置、温度检测与调控装置、电压控制装置、通风装置、照明装置、和冷却装置;磁场发生装置位于箱体中并具有用于放置实验动物或实验动物饲养容器的空腔;箱体的...
- 孙兆贵袁伟郁林石燕徐彦王伟锋苗茂华施惠娟
- 文献传递