秦毅斌
- 作品数：169 被引量：422H指数：11
- 供职机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析
- 为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,以2011年至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩...
- 李莹莹何颖李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸赵武周英宁陆芹章
- 关键词：猪支原体肺炎基因克隆
- 文献传递
- 猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析被引量：5
- 2016年
- 本研究从某猪场发病保育猪的脓肿肺脏器官中分离到1株革兰阳性杆状菌,并进行形态特征、培养特性、生化特性、药敏试验、致病性试验及16S rRNA基因克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在兔血琼脂平板和马血清胰蛋白胨大豆琼脂平板有氧条件下生长良好,可以致小鼠死亡,对头孢类抗生素和喹诺酮类抗菌药敏感;系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S rRNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在91.7%～98.3%之间,表明分离菌为棒状杆菌（Corynebacterium）。
- 秦毅斌何苹萍卢冰霞何颖李斌梁家幸段群棚陈忠伟闭炳芬周英宁苏乾莲蒋冬福黎珂钰卢敬专赵武
- 关键词：棒状杆菌RRNA基因分析
- 一株鸡源发酵乳杆菌益生菌的分离鉴定被引量：2
- 2020年
- 筛选优质鸡源益生菌菌种,为畜禽微生态制剂的研发提供优质的菌株来源,为开发禽用微生态制剂提供安全高效菌种资源和理论支撑。试验以健康鸡肠道为分离材料,使用MRS培养基(乳酸菌细菌培养基)进行分离培养,并对分离菌株进行形态特征、生理生化鉴定及分子生物学鉴定。试验研究发现在鸡盲肠中分离获得一株细菌,鉴定为发酵乳杆菌,编号为J4。分离获得的菌株具有耐热、耐酸、耐胆盐等特点,同时对动物机体安全无毒,可作为鸡源发酵乳杆菌益生菌的优良候选株。
- 卢冰霞周英宁梁家幸赵硕蒋冬福陈忠伟何颖秦毅斌李斌段群棚刘磊赵武
- 关键词：益生菌乳酸杆菌
- 广西陆川猪猪肺炎支原体P97基因R1区克隆及序列分析被引量：5
- 2015年
- 本试验通过深入了解广西陆川猪猪肺炎支原体（Mhp）地方流行毒株的黏附因子P97基因R1区的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,为广西地方品种陆川猪猪支原体肺炎（MPS）有效的综合防控措施提供理论依据,并为进一步研究广西陆川猪Mhp地方流行毒株特性打下坚实的基础。参考Mhp基因组序列设计扩增P97基因R1区的1对引物,以2011年—2014年广西陆川猪MPS阳性病料为研究对象,提取基因组DNA,PCR扩增P97基因R1区,对PCR产物进行测序,将广西陆川猪Mhp不同地方流行毒株的P97基因R1区序列的碱基组成和推导的氨基酸序列进行比对。DNAStar软件分析结果表明,所获得的15株广西陆川猪Mhp毒株（GXLC-1、GXLC-2、GXLC-3、GXLC-4、GXLC-5、GXLC-6、GXLC-7、GXLC-8、GXLC-9、GXLC-10、GXLC-11、GXLC-12、GXLC-13、GXLC-14、GXLC-15）和3株广西其他品种猪Mhp毒株（GX227、GX595、GX674）的P97基因R1区的多处碱基发生变异。通过推导氨基酸序列统计P97R1区五氨基酸（AAKPV/E）重复数为9~18,平均值为12,TN重复数为1~4,结果发现广西陆川猪Mhp流行毒株变异使其毒力和黏附能力增强,再加上陆川猪呼吸道短小狭窄的特殊结构,更易导致广西陆川猪MPS的发生。
- 黎珂钰赵武李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸何颖周英宁韦英益
- 关键词：猪肺炎支原体克隆
- 猪丁型冠状病毒TaqMan实时定量RT-PCR检测方法的建立和应用被引量：9
- 2018年
- 根据GenBank中登录的猪丁型冠状病毒（PDCoV）N基因序列在保守区设计合成特异性引物和TaqMan探针,构建含有PDCoVN基因的重组质粒作为阳性标准品,通过优化各项反应条件,建立了检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法进行特异性、定量线性范围、敏感性和重复性等试验。结果显示,该方法仅对PDCoV出现特异性扩增反应,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒及猪细小病毒均无交叉反应。该方法的标准曲线Ct值与2.2×10 9-2.2×10 1copies/L之间的质粒浓度具有良好的线性关系,标准曲线方程为Ct=-3.539×lg X＋38.95,线性相关系数（R2）为1.0,检测下限为2.2 copies/L。对3个不同浓度（2.2×10 2、2.2×10 4、2.2×10 6copies/L）的pMD18-PDCoV-N进行2次重复检测,每个浓度重复试验的Ct值的变异系数均小于1.0%,表明该方法具有良好的重复性。应用建立的方法对64份广西临床腹泻样品进行检测,结果从其中18份样品中检出PDCo V,样品阳性率为28.1%,说明广西猪群存在PDCoV感染。结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法为PDCoV的检测和定量分析提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。
- 秦毅斌何苹萍卢冰霞韦嫔媛何颖李斌苏乾莲段群棚周英宁赵武
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 一种快速区分PCV2和Mhp的二重PCR检测引物组及试剂盒
- 本发明公开一种快速区分PCV2和Mhp的二重PCR检测引物组及试剂盒，属于动物病学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1‑4所示的引物序列，还包括10×Multi HoeStart Buffer、Super P...
- 秦毅斌卢冰霞周英宁何颖赵武刘磊李斌段群棚张宁陈忠伟梁家幸苏乾莲蓝常力冯建远蒋冬福卢敬专郭旋
- 文献传递
- 一种鸽子养殖消毒处理装置
- 一种鸽子养殖消毒处理装置，可以及时对粪便进行清理消毒，无需人工操作消毒，从而在节约人力的同时给鸽子提供良好的生长环境，其包括：固定架、鸽笼、消毒清扫装置，鸽笼一侧设有饲喂槽，其下方设有一防护板，消毒清扫装置包括：与储液瓶...
- 何颖卢冰霞陈忠伟赵武梁家幸周英宁段群棚蒋冬福卢敬专杨思仪秦毅斌刘伟李斌许心婷全琛宇
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒CH/GX/2015/750A株的分离及全基因序列分析
- 猪流行性腹泻病毒是猪流行性腹泻的病原体,是危害世界养猪业的重要病原.获得可以在细胞培养中稳定有效生长和增殖的分离毒株,是研究其致病性、开展病毒学和血清学研究以及开发疫苗的基础.本研究应用Vero细胞从广西腹泻仔猪肠道内容...
- 秦毅斌卢冰霞何颖段群棚李斌陈忠伟梁家幸周英宁苏乾莲蒋冬福赵武
- 关键词：猪流行性腹泻病毒毒株分离全基因序列分析亲缘关系
- 猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP 4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc 1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos 2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。
- 李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因克隆生物信息学
- 一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒
- 本发明公开一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒，属于动物病学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1‑6所示的引物序列，还包括10×Multi HoeStart Buffer、Su...
- 刘磊段群棚周英宁赵武李斌何颖秦毅斌卢冰霞陈忠伟张宁梁家幸苏乾莲蓝常力冯建远蒋冬福卢敬专郭旋
- 文献传递
