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罗玉均: 作品数：42 被引量：149H指数：7; 供职机构：哈尔滨维科生物技术开发公司更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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一株猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒缺失变异株的分离及鉴定: 根据GenBank中PRRSV EU型和US型的Nsp2序列特点,设计三对RT-PCR引物,对疑似PRRSV感染猪的血液、肺脏和淋巴结进行RT-PCR扩增检测,并对RT-PCR检测为PRRSV阳性的病料进行PRRSV分离...; 孔留五康艳梅罗玉均何逸民李小康潘全会张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合症变异株; 文献传递

2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响被引量：2: 2009年; Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测细胞凋亡的方法。结果表明实验组Caspase3的表达在各时间段里与对照组相比均呈上升趋势,提示了PCV2感染可以上调Caspase3水平,从而增加被病毒感染组织的细胞凋亡,而小鼠心、脑、脾等组织Bak基因表达明显上调,Bcl-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高。这些结果揭示了PCV2感染BALB/c小鼠后,相关细胞凋亡基因在体内的作用与机制,同时为今后细胞凋亡的检测提供了新的方法。; 秦宏阳罗玉均张得玉冯春复何逸民张桂红; 关键词：PCV-2 CASPASE3 BAK

1型鸭肝炎病毒R株全基因组分析与检测技术的研究被引量：11: 2008年; 【目的】测定1型鸭肝炎病毒(DHV1)毒株R全基因组,建立鸭肝炎病毒1型巢式PCR与实时荧光定量RT-PCR。【方法】设计特异性引物测定DHV1毒株R全基因组,以3D为靶基因序列的引物P1和P2,P3和P4进行巢式PCR,引物F和R进行实时荧光定量RT-PCR。【结果】序列分析发现该毒株与其它GenBank上发表的DHV1毒株基因组核苷酸序列同源性为94.2%～99.2%,编码聚合蛋白氨基酸序列同源性为98%～98.8%,表明DHV1-R株与其它DHV1毒株之间病毒基因组一级结构有较高的同源性。基因组结构5′UTR-VP0-VP3-VP1-2A1-2A2-2B-2C-3A-3B-3C-3D-3′UTR在遗传进化关系上与副肠孤病毒属(Parechovirus)亲缘关系较近。参照鸭肝炎病毒1型基因序列设计特异性引物,分别进行巢式PCR和SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测鸭肝炎病毒1型,结果表明巢式PCR敏感性为6pg·ml-1。实时荧光定量RT-PCR确定特异性产物的Tm值,同时做普通RT-PCR。试验结果表明,特异性产物的Tm值为85.6℃,最低能检测到含0.015fg·μl-1阳性质粒标准品。【结论】建立的巢式PCR与SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性,为鸭肝炎病毒1型的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段。; 罗玉均张桂红陈建红廖明徐小芹任涛张济培罗开健; 关键词：全基因组巢式PCR 荧光定量RT-PCR

圆环病毒2型人工感染猪的排毒情况及体内分布规律的初步研究被引量：1: 2009年; 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,它给养猪业带来巨大的经济损失。本研究利用PCR及荧光定量PCR检测猪人工感染猪圆环病毒2型后的排毒及体内分布规律。结果表明,感染猪可以通过呼吸道和消化道进行排毒,而且病毒持续存在;PCV2病毒主要存在于病猪的淋巴结、肾脏、肺脏中,在肝脏和脾脏中也少量存在。; 何逸民罗玉均冯春复阳燕何兆祥张桂红; 关键词：猪圆环病毒2型

一种Ⅰ型鸭肝炎病毒的分子生物学鉴别方法: 本发明公开了一种I型鸭肝炎病毒的分子生物学鉴别方法，包括处理待检样品、制取样品的RNA、反转录得到样品的cDNA、荧光定量RT－PCR或巢式PCR法鉴定I型鸭肝炎病毒等步骤。本发明具有诊断快速、灵敏性高、且适用范围广的有...; 张桂红罗玉均孔留五陈建红徐小芹廖明; 文献传递

免疫抑制的发生及其预防被引量：5: 2005年; 罗玉均张桂红陈建红张济培; 关键词：免疫抑制番鸭细小病毒病网状内皮组织传染性腺胃炎鹅副粘病毒病 J亚群

两株猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆和序列分析被引量：4: 2007年; 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计一对引物,从分离的PCV-2GZ株、HN株的细胞培养物中扩增出ORF2基因(702bp)。将此基因片段克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒pMD-ORF2,并对其测序。结果表明,所克隆的ORF2基因与其他PCV-2的ORF2基因核苷酸序列同源性在90.6%～99.6%之间,推导的氨基酸序列同源性在88.9%～98.7%之间。; 何逸民罗玉均潘全会吴翠花曹宗喜孔留五李少方张桂红; 关键词：圆环病毒2型 ORF2

PRRSV变异株ORF6基因重组杆状病毒的构建及其在昆虫细胞的表达被引量：3: 2009年; 参照GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)XH-GD株ORF6(M蛋白)基因序列,设计合成了一对引物,扩增PRRSV ORF6基因。将该基因克隆于转移质粒载体pFcDNA3.1(+)中,获得重组转移质粒pFcDNA3.1-ORF6并将其转化DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-ORF6,再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBacmid-ORF6,经PCR鉴定证实目的基因正确地插入到杆状病毒基因组的CMV启动子下游;经过间接免疫荧光试验(IFA)检测,M蛋白在Sf9细胞中得到了表达,而且表达的产物具有特异免疫学反应性。; 曹宗喜潘全会齐岩孔留五何逸民罗玉均罗玉均秦宏阳张翔峰张得玉; 关键词：PRRSV 杆状病毒表达

应用RT-PCR检测鸭肝炎病毒Ⅰ型感染被引量：10: 2007年; 鸭肝炎病毒Ⅰ型（duck hepatitis virus Ⅰ，DHVⅠ）感染是雏鸭的一种急性高度致死性传染病，主要侵害4周龄以内的雏鸭，特别是1周龄以下的雏鸭最易感染，死亡率较高，是危害养鸭业最为严重的传染病之。1945年在美国首次发现，我国于1963年在上海首次报道了该病的临床病例，至今，全国各养鸭地区均有不同程度的发生和流行。目前，已有多种检测DHVI抗原的方法，; 罗玉均张桂红陈建红张济培潘全会钟植文何逸民孔留五; 关键词：鸭肝炎病毒 PCR检测 VIRUS 临床病例

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：1: 2009年; 孔留五何逸民康艳梅罗玉均李小康潘全会李少方吴翠花张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株基因组结构开放阅读框呼吸道症状

罗玉均

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