薛水星
- 作品数：15 被引量：48H指数：5
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用 gp41蛋白的合成肽抗原检测 HIV-1抗体
- 1992年
- 采用固相多肽合成技术对人免疫缺损病毒-1型(HIV-1)gp41蛋白的一段代表优势抗原表位的22肽进行了化学合成,经反相高效液相层析(HPLC)和多肽序列测定表明,合成肽成品均质性良好,其氨基酸序列与设计相符。利用该合成肽作为包被抗原,以间接 ELISA 法检测 HIV-1血清抗体,其特异性、灵敏性和重复性均达到与国外生产的 gp41合成肽抗原相同的水平.
- 金冬雁王哲薛水星吴长龙邵一鸣曾毅侯云德
- 关键词：艾滋病毒合成肽抗原抗体GP41
- 大肠杆菌增强子样序列的发现及其在医学基因工程中应用
- 吴淑华潘卫谢明薛水星韩峰张丽兰万晓余刘哲伟侯云德
- 增强子是真核基因表达调节中的一个必需的元件，但是，在原核细胞中究竞有无调节基因转录的增强子序列，本工作开始时尚无定论。1984年我们首先发现SV40HindIIIB片段能在大肠杆菌系统增强人αβ干扰素cDNA的表达，随后...
- 关键词：
- 关键词：大肠杆菌
- 人免疫缺损病毒1型gp41蛋白N端优势抗原表位相应肽段的化学合成
- 1992年
- 利用代表优势抗原表位的合成寡肽作为抗原,检测人免疫缺损病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)的血清抗体,是近年来在HIV检测方面的重要发展趋势。与病毒裂解物及基因工程表达产物等抗原相比,合成肽抗原在特异性、重复性及HIV-1与HIV-2的鉴别诊断等方面具有一定的优点。众多的研究资料表明,HIV穿膜蛋白gp41的N端显然含有比较保守的优势抗原表位,因此,目前文献中用于检测HIV抗体的合成肽多数都在这一区段内进行设计。
- 薛水星金冬雁王哲项文凯吴长龙邵一鸣曾毅侯云德
- 关键词：艾滋病毒多肽
- 大肠杆菌原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究被引量：3
- 2000年
- 利用氯霉素乙酰转移酶(cat)以及β半乳糖苷酶(lacZ)基因作为报告基因,从大肠杆菌MC1061株染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列———MC2,MC8,MC9,这3个片段均具有正反向增强活性,对β半乳糖苷酶基因的增强活性(正向)在2～55倍之间。采用体内转录,RNADotblot杂交的方法对MC8的功能进行了研究,结果表明,MC8片段对于基因表达的调控发生在转录水平上。用核酸外切酶III末端缺失的方法对MC8的功能区进行了定位。结果显示,MC8的功能区位于距其正向克隆5′端450～950bp长约500bp的区段内。在450～600bp以及840～950bp区段内至少分别含有一个功能位点。序列分析的结果表明,MC8功能区有3个AT丰富区,其中2个分别位于450～600bp以及840～950bp区段内。
- 朱民吴淑华秘晓林薛水星韩峰
- 关键词：大肠杆菌原核增强子样序列基因调控
- 丙型肝炎病毒核壳蛋白抗原的化学合成及其在血清学诊断中的应用被引量：7
- 1992年
- 选取丙型肝炎病毒(HCV)核壳蛋白区两个可能含有优势抗原表位的19和16氨基酸的肽殴(C-19肽和C-16肽),利用固相多肽合成技术进行了化学合成。经用反相高压液相层析(HPLC)及脉冲液相多肽测序技术检定合成肽产品的纯度及序列后,以C-19和C-16肽作为包被抗原组装成检测HCV血清抗体的ELISA诊断试剂。用所组装的合成肽试剂检测中国药品生物制品检定所提供的HCV标准参比血清,并比较利用该试剂和美国Abbott实验室生产的HCV第二代EIA诊断试剂平行检测109份献血员血清的结果,表明C-19肽能够特异、重复、灵敏地检出HCV血清抗体,可以作为我国第一代HCV诊断试剂的合成肽抗原。
- 金冬雁李景源杨永平薛水星吴长龙刘崇柏李玉英侯云德
- 关键词：丙型肝炎病毒ELISA肝炎病毒
- 噬菌体表面表达人干扰素αlc/86D被引量：1
- 1998年
- 目的为今后干扰素αｌｃ／８６Ｄ突变体文库的建立和筛选高活性的新型干扰素分子打下基础。方法利用ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ技术表达人ＩＦＮαｌｃ／８６Ｄ基因。结果酶联免疫吸附试验、点杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ均证明重组噬菌体颗粒具有干扰素的免疫反应性，生物学活性测定表明，当重组噬菌体为５×１０１０ＴＵ时，与４ＩＵ的重组ＩＦＮαｌｂ活性相当。结论人ＩＦＮαｌｃ／８６Ｄ在噬菌体表面能正确折叠和功能性表达。
- 马学军胡荣吕海吕海魏开坤薛水星张丽兰
- 关键词：噬菌体干扰素ELISAWESTERNBLOT
- 新型基因工程干扰素受体结合域的改造及其生物活性测定被引量：7
- 2002年
- 目的 改造干扰素功能结合域 ,以提高干扰素的生物学活性。方法 在新型基因工程干扰素 (IFNα1c 86D)AB环内通过点突变技术引入 2个独立酶切位点EcoRⅤ和EstEⅡ ,用聚合酶链反应 (PCR)技术在干扰素cDNA水平对母体干扰素LoopAB的 31位甲硫氨酸换成天冬氨酸 (M D) ,32位天冬氨酸换成脯氨酸 (D P) ,将重组基因在大肠埃希菌中表达 ,用滤泡口炎病毒 (VSV) 人羊膜传代细胞 (WISH)系统检测抗病毒活性。用比色MTT实验检测抗增殖活性。结果 通过突变 ,31和 32位氨基酸获得重组突变体 31 32IFNα1c 86D ,经限制性内切酶图分析、DNA序列和抗病毒活性测定 ,初步表明 31 32IFNα1c 86D是母体干扰素IFNα1c 86D抗病毒活性的 8倍 ,抗增殖作用与母体干扰素相比差异无显著性。结论 改造干扰素受体结合域 。
- 胡荣马学军魏开坤王虹薛水星段招军侯云德钱振超
- 关键词：干扰素Α病毒抗体DNA突变分析
- 在大肠杆菌中高效表达人α1b型基因工程干扰素被引量：5
- 1997年
- 将重组人α１ｂ墼纱基因插入带有原核增强子样序列的新型载体ＰＢＶ３２２，使干扰素在大肠杆菌中的表达水平明显高于原表达载体，达到１．６×１０＾８Ｕ／Ｌ培养液，利用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，ＣＭ＝Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离了交换层析及单克隆抗体亲和的纯化重组人α１ｂ型干扰素，获得了电泳纯产品，其比活性为２×１０Ｚ＾７Ｕ／ｍｇ，分子量为１９ｋｍ。
- 薛水星吴淑华韩峰韩玉龙魏佳侯云德
- 关键词：干扰素大肠杆菌基因工程
- 中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达被引量：9
- 1996年
- 利用PCR技术,以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组,克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸,不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即pSV2-dhfr/F1,pSV2/N2,pSV2-dhfr/F3,pSV2-dhfr/P4,pSV2-dhfr/G1和pSV2-dhfr/G3。将它们分别转染导入COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。
- 韩峰吴淑华薛水星黄利文马学军
- 关键词：促红细胞生成素CDNA基因工程
- 在大肠杆菌中提高人α1b型基因工程干扰素的表达被引量：6
- 1996年
- 将人α１ｂ型干扰素（ＩＦＮα１ｂ）基因插入带有原核增强子样序列的新型载体ｐＢＶ３２２，使干扰素在大肠杆菌中的表达水平明显高于原表达载体，达到１６×１０８ｕ／Ｌ培养液。重组质粒的特点是：含增强子序列Ｘ，ｔｒｐ启动子控制。利用ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ、ＣＭＳｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析及单克隆抗体亲和层析纯化ＩＦＮα１ｂ，获得了电泳纯产品，其比活性为２×１０７ｕ／ｍｇ，分子量为１９ｋＤａ。此外，用ｐＡＴ１５３代替ｐＢＶ３２２，构建了带有和不带有Ｘ序列的两种表达载体。
- 薛水星吴淑华韩峰魏佳侯云德
- 关键词：原核增强子样序列蛋白质纯化
