赵欣
- 作品数:29 被引量:19H指数:4
- 供职机构:华东师范大学更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学文化科学哲学宗教经济管理更多>>
- 一种重组含双发色团光受体蛋白古紫质4及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种重组含双发色团光受体蛋白古紫质4及其构建方法和应用,所述光受体蛋白古紫质4是将<I>aR4</I>基因克隆入pMPK66表达载体构建表达质粒pMPK66‑<I>aR4</I>,随后将其转入嗜盐杆菌MPK4...
- 赵欣孙超丁小燕崔浩琳
- 文献传递
- 一种G蛋白‑偶联受体活体示踪方法及应用
- 本发明涉及分子影像学领域,具体地说是一种G蛋白‑偶联受体GPCR活体示踪方法,即在GPCR的非功能区插入一分子增强型绿色荧光蛋白eGFP,构建出一种新型的GPCR‑eGFP融合蛋白,以用于GPCR分子的成像和追踪。本发明...
- 赵欣孙超姜彩虹
- 文献传递
- 由两种交联剂合成的孔性疏水共聚物的溶胀和吸附性能研究
- 赵欣
- 小学汉语拼音测试题库及评价量表的编制
- 汉语拼音是小学语文学习的基础,是帮助小学生认识汉字、学习普通话的工具。学好汉语拼音是小学语文教学的重要要求之一。目前,对汉语拼音的教学研究主要集中在汉语拼音的教学定位、教学方法、教学内容、教学时间等方面,而对汉语拼音测量...
- 赵欣
- 关键词:小学语文教学汉语拼音教学评价量表教学方法
- 正电性氨基酸残基K129对细菌视紫红质光循环动力学的影响
- 2022年
- 光驱动质子泵细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是存在于嗜盐杆菌(Halobacterium salinarum)细胞膜上的一种七-跨膜蛋白,其视黄醛发色团与螺旋F上的赖氨酸216(K216)共价结合形成希夫碱。光激发后,视黄醛由全反式构型向13-顺式构型的异构化驱动蛋白进入光循环,在经历了一系列具有特定紫外吸收的光循环中间态后将质子由胞内泵出到胞外,形成质子梯度差驱动ATP酶合成ATP。荷正电的赖氨酸129(K129)是bR胞外界面上唯一的一个赖氨酸残基,它对胞外侧质子传输半通道氢键网络以及整个光循环的调控作用目前仍不甚明了。为弥补这一研究上的空白,本研究通过基因定点突变技术并结合紫外-可见光吸收光谱、动力学闪光光解光谱、酸碱滴定等手段,通过与重组表达的野生型bR的对比,深入探究不同极性的K129E和K129L突变对bR质子释放基团(proton release complex,PRC)的调制作用以及对整个光循环的影响。研究结果表明,K129作为胞外侧的荷正电性氨基酸残基,对于稳定质子释放基团的电荷和质子传输通道氢键网络具有重要的调控作用,直接影响着bR的光循环动力学和质子泵功能。
- 孟馨茹董欣怡赵欣
- 关键词:细菌视紫红质定点突变
- W182在细菌视紫红质光循环中的分子作用机制研究
- 2021年
- 细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是嗜盐杆菌R1M1(Halobacterium salinarum R1M1)紫膜上以视黄醛(Retinal)为发色团的七次跨膜光敏受体蛋白,具有质子泵功能。位于视黄醛键合区胞内侧的色氨酸残基182(tryptophan 182,W182)在整个微生物视紫红质家族中极具保守性,通过与视黄醛多烯侧链的相互作用影响着b R光循环和质子泵浦能力。本研究采用定点突变技术,利用原位紫外-可见光吸收光谱、闪光动力学光谱和p H滴定等手段并结合分子动力学模拟,对W182F和W182A突变体的吸收光谱特性、光循环特征、质子泵的泵浦能力、关键基团的pKa值等改变的分子机制进行了深入探究,从而阐明W182在bR光循环中的功能。研究结果表明,W182F突变对视黄醛键合区造成的扰动较大,而W182A突变则对蛋白胞内半通道造成了较大影响;两种突变对胞外半通道的影响存在不同分子作用机制,致使M中间态的衰减呈现出较大的区别。
- 王铭陈思瑾赵欣
- 关键词:细菌视紫红质定点突变
- 用于人胚胎肾细胞高密度大规模悬浮培养的培养基及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种用于人胚胎肾细胞高密度大规模悬浮培养的培养基及其制备方法和用途,其包括多种氨基酸、维生素、无机盐和其他等组成成分,促使HEK293S GnTl<Sup>-</Sup>细胞的高密度旺盛生长,既降低样品制备成...
- 赵欣曹胜魁
- 文献传递
- W86F/W86A突变对细菌视紫红质光循环影响的差异性分析被引量:1
- 2021年
- 细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是一种光驱受体蛋白,每个活性单元由3个单体组成,每个单体由一分子视蛋白和一分子的视黄醛发色团共价结合而成,其功能为从胞内向胞外定向传输质子,利用形成的质子浓度梯度将光能转化为化学能。光照后视黄醛发色团构型发生all-trans向13-cis转变,蛋白的构象也随之发生了一系列具有稳定中间态的变化并驱动质子的定向传递。为探讨bR视黄醛键合区保守性氨基酸色氨酸86(Tryptophan 86,W86)对其光循环中间态和质子泵功能的影响,本研究采用定点突变技术将W86突变为侧链大小不同的F86和A86,通过原位紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱、pH滴定、固体核磁共振等技术手段,探究W86F和W86A突变对bR光循环及质子泵功能影响差异性的分子机制。结果表明,W86F和W86A突变均造成了bR暗适应状态下视黄醛顺反异构平衡向顺式构型占优的方向移动,且W86F突变可造成反式构型的完全消失。此外,无论是W86F还是W86A突变都造成了蛋白光循环中间态的减弱且衰减延长,以及质子泵功能减弱,但影响机制各有所不同,这可能与这两个突变对视黄醛多烯链上电子云的分布以及周围残基造成的扰动程度不同有关。
- 董欣怡丁小燕孙超崔浩琳赵欣
- 关键词:细菌视紫红质定点突变
- 一种重组古紫质4蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种重组古紫质4蛋白,其编码核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了重组古紫质4蛋白的制备方法,利用基因工程方法对AR4基因进行适当修饰,并转入嗜盐杆菌...
- 赵欣曹振
- 文献传递
- 天冬氨酸116在光驱质子泵古紫质-4中的作用研究
- 2022年
- 古紫质-4(archaerhodopsin-4,aR4)是一种存在于嗜盐菌(Halobacterium sp.)XZ515细胞膜上含有类胡萝卜素发色团的细菌类光敏受体蛋白,与细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)具有类似的三聚结构和光驱质子泵功能。已有研究表明,bR蛋白D螺旋上具有保守性的天冬氨酸115(aspartic acid 115,D115)的去质子化会影响其质子泵功能,但其等位残基D116在aR4中的作用尚未见报道,特别是与D螺旋存在相互作用的类胡萝卜素发色团是否会对其功能存在影响更不得而知。本研究通过基因定点突变技术将aR4中的D116突变为极性不同的N116和A116以及bR的等位突变,采用紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱和酸碱滴定等方法对比研究D115/D116突变对bR和aR4结构及光循环动力学的影响。研究结果表明,D116在aR4中的作用与D115在bR中的作用有所不同,且受类胡萝卜素发色团菌红素的影响。本研究有助于进一步认识含类胡萝卜素发色团的光敏受体蛋白D螺旋和菌红素的作用,同时也为研究其他双发色团微生物视紫红质家族蛋白的结构功能提供依据。
- 王菲赵欣