陈秀珍
- 作品数:25 被引量:31H指数:2
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 里氏木霉高效分泌表达系统研究
- 丝状真菌里氏木霉(7Trichoderma reesei)是纤维素酶、半纤维素酶的主要工业生产菌株,该菌无毒无害,是美国FDA认证的食品安全级的工业生产菌株,具有强大的蛋白分泌能力,其胞外纤维素酶分泌量可达100 g/L...
- 秦丽娜黄振邦陈秀珍吴鸿清马枝枝林洁董志扬
- 文献传递
- 一种重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用。将本发明的Pgod基因导入里氏木霉Tu6△tku70中构建的重组里氏木霉Tu6△tku70::Pgod能够成功地表达重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶,而且表达量较高,发...
- 董志扬马枝枝陈秀珍林洁黄振邦秦丽娜
- 文献传递
- 一种重组菌及其在提高纤维素酶产量中的应用
- 本发明公开了一种重组菌及其在提高纤维素酶产量中的应用。本发明保护的重组菌是将特异DNA分子导入里氏木霉得到的。所述特异DNA分子中具有里氏木霉血红蛋白结构域的编码基因。本发明首次鉴定了里氏木霉血红蛋白结构域,并且首次在里...
- 董志扬林洁陈秀珍宋冰冉张吓妹
- 文献传递
- 一种高产扬奇青霉α-半乳糖苷酶的里氏木霉菌株的制备方法及其应用
- 本发明公开了一株高产扬奇青霉α‑半乳糖苷酶的里氏木霉菌株的制备方法及其应用。本发明的高产扬奇青霉α‑半乳糖苷酶的里氏木霉菌株是将扬奇青霉α‑半乳糖苷酶的编码基因和筛选标记基因导入宿主里氏木霉菌Trichoderma re...
- 董志扬林洁陈秀珍马枝枝黄振邦秦丽娜
- 文献传递
- TrMAK蛋白在调节纤维素酶产量中的应用
- 本发明公开了一种TrMAK蛋白在调节纤维素酶产量中的应用。本发明提供了一种构建工程菌的方法,包括如下步骤:抑制木霉中TrMAK基因的表达,得到工程菌;所述TrMAK基因编码如下(a)或(b)所述的TrMAK蛋白:(a)由...
- 董志扬陈秀珍陈飞
- 文献传递
- 一种重组黑曲霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种重组黑曲霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用。将本发明的Agod基因导入里氏木霉Tu6△tku70中构建的重组里氏木霉Tu6△tku70::Agod能够成功地表达重组黑曲霉葡萄糖氧化酶,而且表达量较高,发酵液...
- 董志扬马枝枝陈秀珍林洁黄振邦秦丽娜
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- 云南腾冲热泉土壤微生物基因组文库的构建与分析被引量:19
- 2006年
- 采用冻融、蛋白酶K、SDS-高盐-加热处理法联合的方法,直接从云南腾冲地区的一个弱碱性高温热泉沉积样品中提取和分离环境混合基因组DNA,产量为每克样品1~2μg DNA,用Promega试剂盒纯化后进行PstⅠ部分酶切处理,电泳回收3~8kb的片段后,构建了pSK(+)为载体的基因组文库,共获得25000个阳性克隆,平均插入片段长度为4.6kb。通过随机DNA序列测定和基因注释,发现外源插入片段含有未见报道的序列。
- 蔡莹陈秀珍杨克迁黄力董志扬
- 关键词:未培养微生物
- TrPK蛋白在调节纤维素酶产量中的应用
- 本发明公开了一种TrPK蛋白在调节纤维素酶产量中的应用。本发明提供了一种构建工程菌的方法,包括如下步骤:抑制木霉中TrPK基因的表达,得到工程菌;所述TrPK基因编码如下(a)或(b)所述的TrPK蛋白:(a)由序列表中...
- 董志扬陈秀珍
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- 里氏木霉双基因同步缺失菌株的构建与甘露聚糖酶表达研究被引量:2
- 2014年
- 在里氏木霉中建立了一个快速的双基因位点同步同源重组新方法,较好解决了里氏木霉基因逐个敲除周期长等问题。研究以里氏木霉自身甘露聚糖酶基因(man5A)为重组表达的报告基因,通过一步转化,将该基因定点整合入纤维二糖水解酶Ⅰ(cbh1)基因位点,同时缺失主要的两个纤维素酶基因(cbh1、cbh2),得到重组工程菌Man12。将重组工程菌Man12与出发菌株Tu6Δku70进行摇瓶发酵,结果显示,重组菌株的甘露聚糖酶产量比出发菌株提高10倍,而纤维素酶产量降低了60%,胞外总蛋白分泌水平降低了40%。Real‐time PCR检测甘露聚糖酶基因(man5A)的转录水平,发现重组菌株较出发菌株提高了25倍。在里氏木霉中首次报道了通过一步转化实现两个基因同步定点整合的方法,对利用基因工程手段构建高效表达重组蛋白的里氏木霉工程菌株具有一定的指导意义。
- 吴鸿清秦丽娜陈秀珍黄建忠董志扬
- 关键词:里氏木霉纤维素酶基因
- 一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基
- 本发明公开了一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基。本发明提供了真菌发酵培养基,含有0.1‑1g/L玉米浆、5‑20g/L蛋白胨和20‑40g/L乳糖(或乳清)。本发明培养基不仅可用于木霉中疏水蛋白的生产,也可...
- 董志扬宋冰冉陈秀珍刘明璐杨丽
- 文献传递