顾燕
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术金属学及工艺更多>>
- MTHFR,OLR1,PON1基因多态性与传统危险因素的交互作用在冠状动脉粥样硬化中的研究
- 目的：探讨一组中国汉族人群中亚甲基四氢叶酸还原酶、氧化低密度脂蛋白受体1及对氧磷脂酶1三个基因中的6个位点与冠状动脉粥样硬化严重程度之间的关系,进一步探讨在冠心病的发病过程中传统危险因素与基因多态性之间有无交互作用。 ...
- 顾燕
- 关键词：冠状动脉粥样硬化基因多态性
- 蚊抗药性相关新基因NYD-Ch和NYD-Tr的初步功能研究
- 【目的】研究抗药性相关糜蛋白酶基因/(NYD-Ch/)和胰蛋白酶基因/(NYD-Tr/)与抗药性之间的关系。
【材料和方法】采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗性品系...
- 顾燕
- 关键词：抗药性稳定转染MTT细胞存活率
- 文献传递
- 一种基于肌电信号反馈的闭环疼痛超声理疗系统
- 一种基于肌电信号反馈的闭环疼痛超声理疗系统，其特征在于，包括如下步骤：步骤1)、对受试者进行超声理疗并安放肌电电极；步骤2)、实时采集肌电信号，小波分解并提取500Hz以内的肌电信号；步骤3)、使用巴特沃斯滤波器提取50...
- 吴小玲王伟刘志鹏 于建伟顾燕 杜政亮孙慧婷
- 文献传递
- 蚊抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的建立抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cD NA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的糜蛋白酶基因编码区;经T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到真核表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/chy,经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1neo质粒共转染蚊细胞C6/36,通过G418选择培养,建立转染细胞系;用RT PCR、Westernblotting鉴定糜蛋白酶基因的转录表达。结果成功构建了真核表达载体pIE13/chy,证明糜蛋白酶基因已转入C6/36细胞,建立了稳定转染细胞系,表达产物分子质量单位约30ku,与理论值相符。结论稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究糜蛋白酶基因与抗药性的关系奠定了基础。
- 顾燕公茂庆胡小邦孙艳马磊李秀兰朱昌亮
- 关键词：抗药性基因转染C6/36细胞
- 外源性双链RNA在蚊虫细胞中介导的基因沉默(英文)被引量：1
- 2004年
- 目的 近年来 ,双链RNA介导的基因沉默 (RNA干扰 )已在许多动植物中发现 ,并成为研究基因功能的强有力的工具。为确定蚊虫细胞中是否有RNA干扰现象 ,以期为利用RNAi效应消除蚊虫抗药性研究奠定基础。 方法 设计 5′端带T7启动子的绿色荧光蛋白 (GFP)及糜蛋白酶特异性引物 ,PCR扩增目的基因获得 5′端带有T7启动子DNA片段 ,体外转录成单链RNA ,退火后形成双链RNA。转染带有GFP基因的昆虫细胞表达载体 pAct .GFP和双链RNA进入C6/ 3 6蚊虫细胞 ,72h后收集细胞 ,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达差异 ,用半定量RT PCR检测GFP的mRNA的表达水平。 结果 转染糜蛋白酶基因双链RNA和 pAct .GFP质粒的细胞及仅转染pAct .GFP的细胞的GFP表达水平没有明显差异 ;转染GFP基因的双链RNA和pAct .GFP质粒的细胞的GFP表达水平显著下降 ,达 40 %～ 5 0 % ,GFP的mRNA的表达水平也相应下降了 60 %。 结论在蚊虫细胞内 ,双链RNA能特异性的抑制相应的同源性基因的表达 ,引起基因沉默 。
- 公茂庆顾燕马磊李秀兰胡小邦孙艳孙立新孙静钱瑾朱昌亮
- 关键词：白纹伊蚊RNA干扰基因沉默C6/36细胞
- 一种超声药物辅助治疗装置
- 本发明公开了一种超声药物辅助治疗装置，包括集成在一起的超声激励脉冲产生电路、电致孔脉冲产生电路、电刺激信号产生电路和单片机，集超声激励脉冲、电致孔脉冲、电刺激信号三者为一体，并根据需要通过单片机选择超声激励脉冲、电致孔脉...
- 王伟吴小玲刘志鹏 于建伟顾燕 杜政亮孙慧婷
- 文献传递
- 一种超声药物辅助治疗装置
- 本实用新型公开了一种超声药物辅助治疗装置，包括集成在一起的超声激励脉冲产生电路、电致孔脉冲产生电路、电刺激信号产生电路和单片机，集超声激励脉冲、电致孔脉冲、电刺激信号三者为一体，并根据需要通过单片机选择超声激励脉冲、电致...
- 王伟吴小玲刘志鹏于建伟顾燕杜政亮孙慧婷
- 文献传递
- 淡色库蚊抗药性相关胰蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区。T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/try。经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1neo质粒共转染蚊虫细胞C6/36,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞。用RTPCR、Westernblotting鉴定胰蛋白酶基因的转录表达。结果酶切和PCR鉴定表明,成功构建昆虫细胞表达载体pIE13/try;证实胰蛋白酶基因已转入C6/36细胞,并建立稳定转染细胞系,成功地表达目的基因。结论稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究胰蛋白酶与抗药性的关系提供了良好的实验基础。
- 公茂庆顾燕胡小邦孙艳马磊李秀兰朱昌亮
- 关键词：抗药性基因转染C6/36细胞
- 淡色库蚊细胞色素P450基因的克隆、序列分析及表达差异的鉴定被引量：6
- 2007年
- 目的克隆淡色库蚊细胞色素P450(CYP6F1)基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT-PCR技术和RACE策略,从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系4龄幼虫中克隆细胞色素P450基因(CYP6F1),用相应的软件进行生物信息学分析,并用实时定量PCR和RT-PCR分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因,基因全长1639bp,开放阅读框为1527bp,编码508个氨基酸(GenBank登录号:AY662654)。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因(AB001324)有99%的同源性,并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征,1个膜锚定信号、2个还原酶结合位点、1个典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT-PCR结果表明,CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关,并且在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。
- 公茂庆顾燕胡小邦孙艳李秀兰马磊孙立新孙静钱瑾朱昌亮
- 关键词：淡色库蚊抗药性细胞色素P450基因克隆
- 淡色库蚊抗药性相关新基因——视蛋白基因的克隆与分析被引量：3
- 2005年
- 目的:获取淡色库蚊抗药性相关视蛋白基因(NYD鄄OP)全长cDNA序列。方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗药性相关视蛋白基因的289bp片段,设计上、下游引物,分别以cDNA文库和反转录二链产物为模板,采用快速扩增cDNA末端法(rapidamplificationofcDNAend,RACE)扩增视蛋白基因5'、3'端,经对位拼接获得全长序列,并用相应的软件进行分析。结果:获得6个淡色库蚊视蛋白基因全长序列,开放阅读框分别为1116bp(GeneBank/NCBIAY297441,AY297442)及1119bp(GeneBank/NCBIAY297443,AY297444,AY299337,AY299338),以上序列经推导分别编码371及372个氨基酸。进行蛋白质序列分析,与烟草天蛾视蛋白的同源性是77%。结论:获得6个淡色库蚊抗药性相关视蛋白基因全长cDNA序列。
- 孙艳杨明夏马磊李秀兰公茂庆胡小邦顾燕朱昌亮
- 关键词：淡色库蚊抗药性克隆
