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高脂饮食对幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达的影响被引量：4: 2014年; 目的检测幼年大鼠在应答高脂饮食时,小肠组织FABP2 mRNA的表达情况,探讨FABP2的表达与幼年大鼠肥胖发生、发展的相关性。方法建立幼年大鼠肥胖模型,采用SYBR Green I荧光染料实时荧光定量PCR方法检测、分析幼年大鼠十二指肠、空肠和回肠组织中FABP2 mRNA的表达情况;全自动生化分析仪检测血清生化指标的变化。结果无论是对照组还是肥胖组大鼠,FABP2 mRNA的表达水平在回肠最高,空肠次之,十二指肠最低,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,肥胖组大鼠十二指肠、空肠和回肠组织中FABP2 mRNA表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且肥胖组大鼠血清TG和血糖水平显著升高(P<0.05)。结论 FABP2基因在小肠组织不同区段表达量不同;高脂饮食使幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达水平降低,体重增加,血清TG水平升高,提示FABP2参与了脂类代谢,与幼年肥胖的发生、发展可能具有一定的关系。; 徐云鹏王文栋郝敏张晓磊高雪常晓彤; 关键词：高脂饮食实时荧光定量PCR 肥胖

高脂饮食对幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达的影响: 目的检测幼年大鼠在应答高脂饮食时,小肠组织FABP2 mRNA的表达情况,探讨FABP2的表达与幼年大鼠肥胖发生、发展的相关性。方法建立幼年大鼠肥胖模型,采用SYBR Green I荧光染料实时荧光定量PCR方法检测、分...; 徐云鹏王文栋郝敏张晓磊高雪常晓彤; 关键词：高脂饮食实时荧光定量PCR 肥胖

高脂饮食对幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达的影响: 目的检测幼年大鼠在应答高脂饮食时,小肠组织FABP2 mRNA的表达情况,探讨FABP2的表达与幼年大鼠肥胖发生、发展的相关性。方法建立幼年大鼠肥胖模型,采用SYBR Green I荧光染料实时荧光定量PCR方法检测、分...; 徐云鹏王文栋郝敏张晓磊高雪常晓彤; 关键词：高脂饮食实时荧光定量PCR 肥胖; 文献传递

流感嗜血杆菌生物膜形成对抗生素的耐药性变化被引量：3: 2014年; 目的体外建立流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)生物膜(BF),观察细菌形成BF后对抗生素敏感性的变化。方法从腺样体肥大患儿的离体腺样体组织中分离30株流感嗜血杆菌,并以96微孔板培养,采用结晶紫染色和扫描电镜(SEM)鉴定BF形成;分别测定氨苄西林(AMP)、头孢曲松(CRO)、左氧沙星(LVFX)和阿奇霉素(AZM)4种抗菌药物浮游菌的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)以及生物膜菌最低生物膜清除浓度(MBEC)。结果 30株流感嗜血杆菌体外都有不同程度BF形成。当BF形成后,不同抗生素的MBEC较其MIC、MBC增高程度大小不一,差异有统计学意义(MBEC/MBC:H=91.54,MBEC/MIC:H=87.91;P均<0.001)。AMP的MBEC最高,可高达MBC和MIC的100多倍;CRO的MBEC较MBC和MIC可增高数十倍,LVFX和AZM对BF的MBEC最接近于MBC和MIC。结论 BF形成后,流感嗜血杆菌耐药性增强;氟喹诺酮类LVFX和大环内酯类AZM对流感嗜血杆菌BF作用相对良好。; 高雪尚小领乔海霞张彦霞张存晖张玉妥; 关键词：流感嗜血杆菌生物膜抗生素

抗流感嗜血杆菌外膜蛋白P6单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4: 2014年; 目的制备抗流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组P6蛋白腹腔免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合技术制备杂交瘤细胞株;间接ELISA筛选阳性细胞克隆并检测染色体数目;测定细胞培养上清的mAb效价及特异性,鉴定mAb的免疫球蛋白类、亚类及抗原结合表位。结果获得2株抗流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的杂交瘤细胞株α2G3和γ2C4,染色体众数分别为103与95;间接ELISA结果证明细胞培养上清最高效价分别为1∶256和1∶512,未出现与其他种类细菌的交叉反应;α2G3为IgG2b、γ2C4为IgM,均为κ型;两者可能识别P6蛋白不同表位。结论成功制备了抗流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的mAb。; 温晓艳周芳张彦霞乔海霞高雪贾晓晖张玉妥; 关键词：流感嗜血杆菌杂交瘤单克隆抗体

流感嗜血杆菌自身因子在生物膜形成过程中的作用被引量：1: 2015年; 流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是人体上呼吸道常见寄生菌,当机体免疫力低下时,可引起发病;当Hi在感染部位形成生物膜(Biofilm,BF)后,对抗生素的敏感性下降,常引起疾病慢性化,使临床治疗变得棘手。近年来,Hi BF的致病性和BF形成相关自身因子已渐渐成为临床和基础研究学者关注的热点,本文就近年来国内外的报道综述如下。; 高雪尚小领张玉妥; 关键词：嗜血菌流感生物膜药物耐受性

氨溴索对流感嗜血杆菌生物膜清除和膜内杀菌作用研究被引量：2: 2014年; 目的:观察氨溴索(AMB)对流感嗜血杆菌生物膜(BF)的作用以及对BF菌的杀菌作用。方法:30株流感嗜血杆菌菌株从腺样体肥大患儿术中切除的腺样体组织分离,选取具有较强成膜能力的2株细菌,96微孔板法培养细菌形成BF,结晶紫染色法测定不同浓度AMB对2株细菌BF的影响,并用扫描电镜观察细菌BF形态结构的改变;平板计数法检测AMB对BF菌杀菌作用。结果:结晶紫染色法示,当AMB浓度分别达到0.25mg/ml和0.49mg/ml时,2株细菌BF吸光度值较对照组差异有统计学意义(P<0.01),扫描电镜发现BF结构受到破坏;菌落计数显示AMB对流感嗜血杆菌BF菌有杀菌作用,且剂量依赖效果明显。结论:AMB在体外对流感嗜血杆菌BF具有破坏和清除功能,并对BF菌具有杀菌作用。; 高雪张玉妥林彦涛李海峰辛运超张晓磊徐云鹏尚小领; 关键词：流感嗜血杆菌生物膜氨溴索杀菌作用

刚地弓形虫RH株ROP11基因的克隆与真核表达载体的构建被引量：7: 2013年; 目的构建刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白11(ROP11)的真核表达重组质粒并在真核细胞中表达目的蛋白。方法设计合成弓形虫ROP11基因引物,运用RT-PCR方法扩增ROP11基因并克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建重组表达质粒pcDNA3.1-ROP11。将重组质粒转染HeLa细胞,采用间接免疫荧光法检测目的蛋白表达。结果 RT-PCR扩增弓形虫ROP11基因片段为1 548bp,与预期大小相符。构建的重组质粒pcDNA3.1-ROP11经PCR及EcoRⅠ和NotⅠ双酶切鉴定正确。重组质粒测序后与GenBank报道的ROP11基因比对,核苷酸序列同源性和推导氨基酸序列同源性均为99%。免疫荧光检测显示,在重组质粒转染的HeLa细胞胞浆观察到黄绿色荧光,对照组无荧光。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-ROP11,该重组质粒能够在真核细胞中表达目的蛋白,为弓形虫核酸疫苗的研制奠定了基础。; 张晓磊张进顺朱晓波王春苗贾晓晖贾天军徐云鹏高雪; 关键词：刚地弓形虫真核表达质粒

氨溴索对流感嗜血杆菌生物膜的作用研究: 细菌生物膜（Biofilm，BF）最早由1987年美国Costerton教授提出，是细菌在某些惰性实体表面形成的多细胞复合体的生存方式,是具有一定空间构型的细菌群体,由被覆细菌、细菌脂多糖、纤维蛋白、DNA、RNA等成分...; 高雪; 关键词：流感嗜血杆菌生物膜抗生素氨溴索氨苄西林; 文献传递

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高雪