刘俊琦
- 作品数：30 被引量：73H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：湖南省科技重大专项湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生经济管理更多>>
- 猪瘟病毒NS3基因克隆、原核表达及间接ELISA方法初步建立
- 采用PCR方法从猪瘟病毒兔化弱毒(Hog Cholera Lapinized Virus HCLV)疫苗株cDNA中扩增到长度为2000bp左右NS3基因序列,将其克隆进原核表达载体pET32a(+),构建重组原核表达载...
- 蒋大良余兴龙李润成葛猛颜爱李杰刘春红刘俊琦
- 关键词：基因克隆原核表达免疫印迹间接ELISA
- 文献传递
- 产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重PCR检测方法构建
- 2023年
- 为了建立一种可同时检测禽产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和沙门氏菌(Salmonella)的多重PCR方法,针对产肠毒素大肠杆菌致病基因Hly E、沙门氏菌特异基因inv A的基因保守区域合成两对特异性引物(目的片段为550 bp和825 bp),通过优化反应条件建立多重PCR检测方法,并反复验证分析其特异性、灵敏性和重复性,同时应用该方法对临床样本进行初步应用。结果显示:该方法可从同一样品中同时特异性扩增产肠毒素大肠杆菌Hly E基因、沙门氏菌inv A基因目的条带,对其他菌株均不能扩增出目的条带;检测沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌的灵敏度分别为0.078 ng/μL和0.78 ng/μL,且重复性良好。用建立的多重PCR方法对采集的59份粪便样品进行检测,分别检出产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本为13份和7份,同时携带产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本检出7份。该方法特异性、灵敏性、重复性良好,为鉴别诊断这两种细菌所致鸡腹泻病提供了一种快速准确的检测途径。
- 牛灵玥王慧杨俊杜丽飞刘俊琦刘俊琦
- 关键词：大肠杆菌沙门氏菌多重PCR
- 影响永州山羊养殖行业发展的因素
- 2014年
- 永州是养殖大市,生猪与家禽存栏量均排在湖南省前列,但山羊养殖行业却较为落后。因为永州没有发达的种植业来支撑山羊每日的粗饲料供给,所以在永州想实现山羊的大规模圈养是很难做到的;也没有类似草原的大型牧场可提供放牧,想发展以放牧为主的饲养模式也是比较艰难的。目前,永州山羊养殖以农村散养户家庭养殖为主,许多因素都阻碍了山羊养殖的发展。
- 刘俊琦杨斌
- 关键词：山羊养殖
- 副猪嗜血杆菌Neu基因的克隆表达及表达产物的免疫原性被引量：4
- 2010年
- 为研究副猪嗜血杆菌(HPS)基因工程疫苗,以HPS5型毒株为模板,通过PCR扩增获得副猪嗜血杆菌神经氨酸酶(Neu)全基因,将其克隆至pMD18-T载体并对其进行测定和分析。结果表明,Neu全基因含一个2187bp的开放阅读框,编码一含729个氨基酸的蛋白,与Neu基因参考序列(登录号:NZ-ABKM01000006)的同源性为99.0%。以pMD-Neu基因为模板,重新设计引物,扩增得到HPSNeu蛋白的部分编码区,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建得到重组原核表达质粒pET-Neu。将pET-Neu在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行优化表达,经SDS-PAGE分析,重组蛋白Neu主要以包涵体形式表达,分子质量为52ku;Western-blot分析表明,重组蛋白Neu能与阳性血清发生特异性抗原反应。将纯化重组蛋白Neu试验性注射免疫昆明小鼠,攻毒试验结果显示,氢氧化铝佐剂组的保护性较低,仅有10%;而弗氏佐剂组具有较高的保护性,保护率高达60%。
- 刘俊琦余兴龙蒋大良朱小宁李润成肖利军刘春红罗维葛猛
- 关键词：副猪嗜血杆菌神经氨酸酶原核表达免疫原性
- 一起猪喘气病和链球菌病混合感染的诊治
- 2016年
- 2014年12月,湖南省永州市双牌县麻江乡某猪场部分猪出现呼吸困难、皮肤发红、跛行甚至死亡。笔者对发病原因、临床症状、病理剖检进行分析,并结合多种实验室诊断方法确诊该病例为猪喘气病和链球菌病的混合感染。猪场根据药敏试验结果进行针对性用药,并采取综合性防治措施,使得病情得到有效控制。
- 刘凤刘俊琦
- 关键词：猪肺炎支原体链球菌
- 对接生猪产业链,构建协同创新平台的探索与实践被引量：2
- 2016年
- 为了积极对接国家＂2011创新能力提升计划＂,深入贯彻落实湖南省省委、省政府＂对接产业（行业）,工学结合,提升质量,推动职业教育深度融入产业链,有效服务经济社会发展＂的职业教育发展战略,做大做强湖南省生猪产业,并带动相关产业的发展,创新校企合作新模式,破解职业教育校企合作及改革发展的瓶颈,促进湖南省区域经济和生猪产业健康快速发展。
- 于桂阳刘俊琦蒋艾青张伟
- 关键词：创新能力提升教育发展战略服务经济畜牧业发展生猪养殖业
- 一种重组Neu蛋白检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法及其试剂盒
- 本发明涉及抗体的检测领域，尤其涉及一种重组Neu蛋白检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法及其试剂盒，其重组Neu蛋白检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法采用重组表达纯化的副猪嗜血杆菌神经氨酸酶蛋白（Neurami...
- 刘俊琦
- 文献传递
- 永州市鸡蛔虫线粒体cox2基因序列测定与分析
- 2013年
- 该研究旨在阐明永州市鸡蛔虫各分离株线粒体细胞色素c氧化酶第II亚基(cox2)基因部分序列(pcox2)的遗传变异的情况。应用酶链聚合式反应(PCR)扩增鸡蛔虫的pcox2,采用clustalx1.81的程序对目的产物序列进行比对分析,结果表明:所获得的cox2(pcox2)序列完全相同,为450 bp(pcox2)。由于目的产物序列pcox2基因种内的序列相对保守,种间差异比较大,故能作为种间遗传与变异研究的标记,为鸡蛔虫分类和鉴定及流行病学调查奠定基础。
- 刘俊琦
- 关键词：鸡蛔虫线粒体DNA
- 现代农业技术服务专业群建设的探索与实践被引量：1
- 2015年
- 职业院校开展专业群建设有利于形成专业的集群优势,从整体上提升专业群在行业或产业的引导能力;有利于形成实践教学优势,将分散的实验资源整合为专业化的实训基地,降低实训建设成本,实现资源共享;有利于形成师资队伍优势,打造专兼结合的双师素质专业教师团队,增强专业办学实力;有利于形成学院专业特色和品牌优势,提高学院知名度。本文以永州职业技术学院涉农专业为例,介绍整合多专业资源,依托行业企业建设涵盖畜牧兽医、农产品检测、园林技术、绿色食品生产与检验、动物防疫与检疫等涉农专业群的建设思路及实践经验。
- 于桂阳刘俊琦郑春芳
- 关键词：现代农业
- 基于空间教学的高职院校《猪病防治》课程教学研究与实践被引量：1
- 2016年
- 该项目依托世界大学城云空间平台,集合教学课件、视频、3D模拟仿真等多种教学资源,搭建起《猪病防治》课程主题空间,师生通过空间实现互联互通,破解了职业教育中学生自主学习不便以及师生交流不畅的难题,提升了教学效果。利用平台的开放性设计,可以将空间资源向社会其他群体,如基层畜牧兽医技术人员和新型农民等开放,降低其学习成本,为专业知识服务"三农"、服务社会开辟了新途径。
- 刘俊琦
- 关键词：空间教学猪病防治课程资源
