刘璋寅
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
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- 神经脊来源许旺细胞的体外培养研究
- 2014年
- 目的:探讨坐骨神经中神经脊来源的许旺细胞所占的比率。方法:将Wnt1-Cre+/-与Rosa-EGFP+/-小鼠杂交,获取Wnt1/EGFP小鼠,其所有起源于神经脊的细胞都有EGFP蛋白表达。取其坐骨神经,经过消化分离纯化,获得许旺细胞。进行抗GFP免疫荧光染色和流式分析的检测。结果:根据P1代许旺细胞的形态学观察,其纯度约为60%。抗GFP免疫荧光染色显示,并非所有的许旺细胞均呈阳性。P3代许旺细胞的纯度约为99%,流式细胞术分析显示约65%左右的GFP阳性率。结论:小鼠坐骨神经中的许旺细胞在体外培养提纯后,神经脊起源的许旺细胞占总许旺细胞的比例约为65%。
- 王洋沈尊理金羽青刘璋寅陈露露杨晓楠王刚阳
- 关键词：许旺细胞
- 体外培养过程中许旺细胞S100表达规律研究被引量：1
- 2013年
- 目的:目前研究发现,周围神经中许旺细胞的标志物有很多,S100是其中之一。S100在体内表达的变化规律已有比较深入的研究,但是其在体外培养的许旺细胞的表达规律尚不清楚。因此,本课题研究小鼠许旺细胞在体外培养过程中S100蛋白的表达变化规律。方法:取新生(出生5-7 d)C57BL/6小鼠的坐骨神经,酶消化分离获取细胞后,培养纯化扩增3次。用S100免疫荧光法及RT-PCR技术研究许旺细胞在体外培养过程中S100的表达规律。结果:从坐骨神经消化所得到的许旺细胞,早期并不都表达S100,阳性率约为43.48%,随着培养时间延长(培养8天),所有许旺细胞均表达S100,能够达到阳性率95.66%。结论:体外培养的许旺细胞,其标志物S100阳性率表达随培养时间延长而增加。并且我们发现,S100并不能作为一个可靠的标志物来单独应用鉴定体外培养早期的许旺细胞。
- 刘璋寅沈尊理金羽青程佳陈露露沈华
- 关键词：周围神经许旺细胞S100
- 周围神经再生早期过程中内源性和外源性巨噬细胞数量变化的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的:周围神经再生过程中巨噬细胞发挥了重要的作用,然而目前对于神经内内源性和外源性巨噬细胞的具体作用了解的却很少,因此本实验研究了小鼠坐骨神经损伤后早期再生过程中内源性和外源性巨噬细胞数量比例变化的情况,探索周围神经再生的规律。方法:移植CAG-EGFP转基因小鼠的全骨髓有核细胞到骨髓灭活野生型C57Bl/6小鼠体内建立嵌合体小鼠模型。待移植成功3个月后夹伤小鼠一侧坐骨神经,并在损伤后第2、7、14和28天取材、切片,使用巨噬细胞特异性抗体CD68进行免疫荧光染色,分析损伤神经段中内源性巨噬细胞(CD68+/EGFP-)、外源性巨噬细胞(CD68+/EGFP+)的数量及其比例变化情况。结果:①夹伤骨髓移植模型小鼠坐骨神经后,参与坐骨神经损伤修复的巨噬细胞可分为两类,即内源性巨噬细胞(CD68+/EGFP-)和外源性巨噬细胞(CD68+/EGFP+);②夹伤坐骨神经后,浸润的总巨噬细胞数量从第2天开始逐渐增加,到第14天达到高峰,约为正常情况下的60倍,随后逐渐减少;③起初外、内源性巨噬细胞间的比例是1:1,差值最大出现在损伤后第14天为4:1。结论:小鼠坐骨神经夹伤后,内外源性巨噬细胞共同参与了受损神经组织远心段的修复和再生过程,损伤初期发挥作用的主要是内源性巨噬细胞,随后大量浸润的外源性巨噬细胞占主导作用。本实验首次连续观察并定量分析了神经损伤后早期内源性和外源性巨噬细胞的数量改变,证实了瓦勒氏变性过程中内源性和外源性巨噬细胞在不同阶段对巨噬细胞总量的贡献作用。
- 程佳金羽青刘璋寅杨晓楠葛敏祁佐良
- 关键词：周围神经再生巨噬细胞骨髓移植
- 脂肪组织来源许旺细胞的分离及鉴定
- 目的：许旺细胞是周围神经修复中重要的种子细胞，其来源问题一直是困扰周围神经修复的主要难题，许多学者都在积极寻找新的许旺细胞来源。脂肪组织中分布着很多细小的神经血管网络，因此本实验就试图从中获取许旺细胞，从而找到一种新的许...
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- 周围神经中许旺细胞特异性标记物被引量：1
- 2012年
- 周围神经损伤后,其近、远端神经纤维将发生瓦勒氏变性(Wallerian degeneration)。许旺细胞(Schwann Cell)起源于神经嵴细胞,是周围神经的种子细胞。目前周围神经损伤的修复,主要围绕神经内部结构重建,促进神经纤维再生进行。通过特异性标记物标记、识别移植的许旺细胞,对神经移植效果的评价至关重要。本文就许旺细胞比较常见的特异性标记物进行综述,以期为许旺细胞在周围神经损伤及组织工程方面的应用提供帮助。
- 刘璋寅沈尊理
- 关键词：许旺细胞周围神经损伤特异性标志物
- 脂肪干细胞上清液培养雪旺细胞的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的:研究应用脂肪干细胞上清液培养新生小鼠雪旺细胞的可行性。方法:取新生(出生5-7天)C57BL/6小鼠的坐骨神经,采用0.2%的复合胶原酶NB4消化法分离获取细胞,然后应用雪旺细胞条件培养基(SCCM)和C57BL/6小鼠的脂肪干细胞上清液(ADSC-CM)分别培养雪旺细胞。用0.2%复合胶原酶NB4差速分离纯化这两种方法培养的雪旺细胞,每48 h纯化1次,共进行2次纯化。应用P75免疫荧光染色方法鉴别两组P2代雪旺细胞并比较两组雪旺细胞的纯度和生长情况。结果:脂肪干细胞上清液培养的雪旺细胞纯化两次后,数量明显增多,其纯度与雪旺细胞条件培养基相比没有明显差异(P>0.05)。结论:脂肪干细胞上清液可以较好的培养雪旺细胞,可以作为一种新的廉价方便的培养基代替雪旺细胞条件培养基来培养许雪旺细胞。
- 陈露露沈尊理金羽青刘璋寅沈华
- 关键词：雪旺细胞周围神经
