刘运龙
- 作品数:35 被引量:71H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 黑熊无管引流取胆术后继发症的治疗
- 2007年
- 王焕章刘运龙路一平尹珊珊刘学龙
- 关键词:引流黑熊继发症手术疗法临床症状胆汁
- 黑熊胆囊息肉的诊断与防治
- 2008年
- 刘运龙曲平赵鹏赵慧刘学龙
- 关键词:胆囊黑熊手术治疗良性肿瘤发病率
- LC-MS/MS测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体浓度及其药代动力学研究被引量:3
- 2015年
- 目的:建立测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体的高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法,并进行荷瘤裸鼠体内药代动力学研究。方法:采用YMC C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相B为0.025%氨水乙腈,A为0.025%氨水,在线脱气,流速0.8 m L/min。梯度洗脱:0~2 min,B相85%~85%;2~4 min,B相85%~10%;4~6 min,B相10%~85%;6~8 min,B相85%~85%,柱温40℃。进样量10μL。质谱条件:离子源电喷雾电离源(ESI),负离子电离模式,扫描方式多级反应监测(MRM),监测离子对m/z和厚朴酚(265.0→223.0)和内标(253.0→225.0)。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品的分析时间为8 min;和厚朴酚在0.500~1000 ng/m L呈良好的线性关系,定量下限为0.500 ng/m L,日内、日间精密度RSD均小于15%,低、中、高3种浓度的提取回收率〉64.71%。稳定性实验中,在各种贮存条件下血浆中和厚朴酚均较稳定。结论:本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于和厚朴酚脂质体的药代动力学研究,以期为临床应用提供参考。
- 丁士雯马红霞李娴刘运龙陈知航单成启程远国陈俐娟
- 关键词:液质联用梯度洗脱药代动力学
- 重组人鼠嵌合抗CD20单克隆抗体免疫原性检测方法的建立被引量:3
- 2015年
- 目的:建立一种灵敏、特异、操作简单的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中抗CD20单克隆抗体的免疫原性。方法:首先采用桥连ELISA法对抗药物抗体(ADA)进行定性筛选,以抗CD20单克隆抗体作为包被抗体,以生物素标记的抗CD20单克隆抗体作为检测抗体,二者共同结合血清中存在的ADA,以D450/560nm值超过临界值作为阳性判断标准;初筛为阳性的样本采用免疫清除法进一步确证,并同时进行免疫交叉试验考察ADA对供试品和原研对照品的免疫反应有无差异。结果:建立了检测ADA的筛选方法和确证方法,确定了检测的临界值和归一化因子,血清中抗药物抗体的检测灵敏度达3.5 ng/m L,批内/批间精密度介于3.1%~7.4%,准确度介于-1.2%~9.5%;食蟹猴连续给药后,部分个体产生特异性抗体,且抗体滴度随时间延长而增高。结论:建立的ADA筛选方法和确证方法可用于毒性试验的免疫原性检测;动物给药剂量对抗体的产生有较大影响,低剂量连续给药更易诱发特异性抗体产生。
- 孟庆芳马志强陈知航李丽刘运龙单成启钱小红程远国
- 关键词:抗CD20单克隆抗体免疫原性
- 检测HSA-GLP-1融合蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立被引量:2
- 2013年
- 目的:为检测血清中HSA-GLP-1融合蛋白整体分子的浓度,建立一种特异、灵敏的定量检测食蟹猴体内HSA-GLP-1融合蛋白浓度的双抗体夹心ELISA的方法。方法:采用双抗体夹心ELISA方法,以GLP-1单克隆抗体为包被抗体、HSA-GLP-1融合蛋白为夹心抗原、anti-HSA-Biotin为检测抗体,用Streptavidin-HRP进行免疫放大,TMB显色。结果:建立了检测HSA-GLP-1融合蛋白的ELISA方法,其线性范围为15.6~1000 ng/mL,最低检测限为15.6 ng/mL,与GLP-1、HSA、IL2-HSA均无交叉反应,板内和板间精密度均小于15%,准确度为±15%,冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论:建立的HSA-GLP-1蛋白检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于HSA-GLP-1融合蛋白在临床前药代动力学试验的定量检测。
- 王秋实刘运龙张玉民陈知航钱爱东程远国
- 关键词:双抗体夹心ELISA
- 抗DR5单克隆抗体ELISA检测新方法的建立
- 2013年
- 目的:建立一种灵敏、特异、快速的ELISA方法,用于猕猴血清中抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体的检测。方法:采用双抗夹心ELlSA法,用猴血清吸附的羊抗入IgG包被于96孔酶标板,加入待测样品,用HRP标记的猴血清吸附的羊抗人IgG进行检测,加底物显色,读取D450值。结果:建立了检测抗DR5单克隆抗体的ELISA方法并进行了确证,方法的线性范围为12.5-800ng/mL,定量下限为12.5ng/mL,板内和板间精密度均小于15%,准确度为-4-15%,冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立的抗DR5单克隆抗体检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于抗DR5单克隆抗体的检测。
- 郭聪陈知航许先兴刘运龙车津晶董俊兴程远国
- 关键词:死亡受体5单克隆抗体酶联免疫吸附试验法药代动力学
- 重组抗CD52人源化单克隆抗体ELISA检测方法的建立
- 2015年
- 目的:建立一种灵敏、特异、快速的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中重组抗CD52单克隆抗体的含量。方法:采用双抗夹心ELISA法对重组抗CD52单克隆抗体进行定量。以猴血清吸附的羊抗人Ig G作为包被抗体,稀释的猴血清吸附的羊抗人Ig G-HRP(二抗)作为检测抗体,加入底物显色剂后在酶标仪上读取D450nm值。结果:建立并确证了检测重组抗CD52单克隆抗体的ELISA方法,方法的线性范围为7.81~500 ng/m L,定量下限为7.81 ng/m L,板内及板间精密度和准确度均在±15%以内,室温、冻融、稀释效应稳定性良好。结论:方法学验证表明ELISA法测定食蟹猴血清中重组抗CD52单克隆抗体浓度的特异性、精密度和准确度均满足新生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于重组抗CD52单克隆抗体的检测。
- 李金龙胡百卉许先兴张代超刘运龙陈知航程远国
- 关键词:酶联免疫吸附法药代动力学
- 定量检测重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的ELISA方法的建立及确证
- 2015年
- 目的:建立一种灵敏、特异、快速、经济的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的含量。方法:对ELISA与生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)方法进行比较,最终采用BA-ELISA法对HS628进行定量。包被抗体为羊抗人Ig G单抗,以生物素标记的重组白介素6受体作为检测抗原,以HRP标记的链霉亲和素作为放大剂,最终用单组分显色液(TMB)显色。结果:建立了特异性检测HS628的ELISA方法并完成方法学确证,该方法的线性范围为1.64~400 ng/m L,灵敏度为1.64 ng/m L,精密度、准确度、回收率及稳定性符合要求,与对照品校正标准曲线吻合。结论:用建立的ELISA方法测定猴血清中HS628的含量能满足新生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于HS628的检测。
- 张代超魏峰毛素梅刘运龙任欣怡李金龙陈知航程远国
- 关键词:间接ELISA法
- 定量检测IL-2-HSA融合蛋白双抗体夹心ELISA法的建立被引量:1
- 2013年
- 目的:通过抗体配对方法,建立能高特异、高灵敏地定量检测食蟹猴体内IL-2-HSA融合蛋白浓度的双抗体夹心ELISA法。方法:以IL-2单克隆抗体为包被抗体、IL-2-HSA融合蛋白为夹心抗原、生物素标记的HSA为检测抗体,一抗和二抗的工作浓度分别为8Ixg/mL和1:5000,HRP标记的亲和素为1:200。结果:IL-2-HSA融合蛋白标准品的曲线范围为3.9-250ng/mL,最低检测限为3.9ng/mL,-9IL-2、HSA、GLP-1/HSA和CD20单抗均无交叉反应,方法的回收率为98.9%~101.5%,批内和批间准确度分别为96.1%~98.3%和93.9%~105.4%。结论:本方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则的要求,可用于IL-2-HSA融合蛋白在临床前药代动力学试验的定量检测。
- 张玉民刘运龙陈知航李丽刘学龙程远国
- 关键词:双抗体夹心ELISA药代动力学
- 犬脂肪中毒诊治
- 2007年
- 脂肪是日粮中的重要组成成分,它不仅是可消化能的来源,而且脂肪中还含有抗氧化剂和脂溶性维生素(A、D、E、K)。供给犬优质脂肪,对于促进生长和提高经济效益具有重要作用。但长期饲喂高含量的脂肪,会引起中毒。2006年6月份,延吉市某一饲养肉食犬专业户由于长期食用含有高脂肪的羊肝、羊油、羊肠饲喂犬,引起犬发生中毒。鉴于国内有关犬脂肪中毒综合症资料少见,现将柳河县动物医院犬脂肪中毒综合症病例报告如下。
- 金成浩刘运龙张明华路一平尹珊珊王焕章孙丽丽刘学龙
- 关键词:高脂肪肉食犬诊治脂溶性维生素长期饲喂组成成分