周国瑛
- 作品数：18 被引量：147H指数：7
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 用基因枪将外源DNA成功导入中国对虾(Penaeus chinensis)
- 首次用基因枪的方法,以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,将带有抗对虾白斑病基因的质粒pG DNA-RZ1导入中国对虾受精卵中,利用荧光显微镜分别对各个不同发育时期对虾幼体的处理组和对照组作了检测.绿色荧光蛋白在无节...
- 刘志毅相建海周国瑛龚祖埙
- 关键词：基因枪绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链I诊断试剂，主要包括人心肌肌球蛋白轻链I基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法，即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原——...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 含四个串联核酶和GFP基因的转基因质粒的构建
- 2001年
- 以含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的质粒pSK10 0 DS、含切割对虾杆状病毒基因的核酶Rz1的质粒pRGRz1、含核酶Rz2的质粒pRGRz2和转基因空质粒pcDNA3为基础 ,把绿色荧光蛋白GFP基因克隆于pcDNA3的SV40启动了下面 ,由SV40启动子控制 :含四个两种核酸基因的四联体克隆于pcDNA3的多克隆位点区 ,由T7启动子控制 ,构建成含两个Rz1、两个Rz2和GFP基因的转基因质粒pGTR ,以用于转基因抗病毒对虾的研究。
- 邹键沈学仁吴建华周国瑛龚祖埙
- 关键词：核酶绿色荧光蛋白
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂,主要包括人心肌肌球蛋白轻链Ⅰ基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法,即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原—心...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 水稻齿叶矮缩病毒Segment 9 dsRNA的序列分析及其在大肠杆菌DE3中的表达被引量：7
- 1997年
- 通过有机试剂抽提，ＣＦ－１１纤维素柱层析，从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株（ＲｉｃｅＲａｇｇｅｄＳｔｕｎｔＶｉｒｕｓ，Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｉｓｏｌａｔｅ，简称ＲＲＳＶ－Ｐ）的水稻植株中获取该病毒的全基因组，即获得从Ｓｅｇｍｅｎｔ１到Ｓｅｇｍｅｎｔ１０（Ｓ１－Ｓ１０）的１０条双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ），然后设计合适的引物，用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到Ｓ９的ｃＤＮＡ并将其克隆到ｐＵＣ１１９质粒上扩增，以双链测序法测定该ｃＤＮＡ的全序列。同时又将此ｃＤＮＡ克隆到大肠杆菌表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ上，在大肠杆菌菌株ＤＥ３中用ＩＰＴＧ诱导表达，经超声波破菌、离心、Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，得到纯化的分子量为６４ｋＤ的融合蛋白。
- 卢雄斌周国瑛吴建华龚祖埙
- 关键词：植物病毒水稻
- 骨骼肌损伤修复过程中组织胰岛素样生长因子的表达被引量：11
- 2001年
- 目的 :观察Sprague -Dawley (SD)大鼠骨骼肌钝挫伤后组织修复过程中局部内源性胰岛素样生长因子mR NA的表达情况。方法 :雄性SD大鼠腓肠肌钝挫伤后不同时期处死取材 ,分别进行组织学和超微结构观察 ,作逆转录-聚合酶链反应 (RT -PCR)分析。结果 :IGF -ImRNA含量在伤后 2、3、4、6、9、14天升高 ,IGF -II 3、4、6、9天升高 ;光镜及电镜发现大鼠腓肠肌局部充血、水肿、变性 ,部分肌纤维和肌丝紊乱、断裂。伤后 1天 ,肌纤维崩解、碎裂 ,许多炎症细胞吞噬碎片。 4天 ,出现大量成肌细胞核 ,有肌管形成。 14天 ,肌管融合成肌纤维 ,有部分胶原纤维疤痕形成。结论 :SD大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中有内源性IGFmRNA的表达 ,与修复有关。
- 李云霞陈世益马昕陈劲松周国瑛龚祖埙
- 关键词：胰岛素样生长因子骨骼肌损伤
- 外源性胰岛素样生长因子-1促进骨骼肌损伤修复的实验研究被引量：22
- 2002年
- 目的 研究局部使用外源性胰岛素样生长因子 1(Insulin likegrowthfactor 1,IGF 1)对骨骼肌钝性打击伤后愈合速度、质量和对内源性IGF 1和IGF 2的基因转录的影响。方法 1%硫喷妥钠 (每 10 0g体重 0 .5ml)麻醉后 ,对大鼠右下肢腓肠肌内侧面中段实施钝性打击伤 ,而后在创伤局部实施皮下肌膜外注射药物 ,以此分为 :生理盐水组 (对照组 )和IGF 11.5 μg组 (对照组 ) ,每组均作以下分析 :mRNA分析 ;组织学分析 ;电镜超微结构分析。 结果 伤后实验组比对照组更早形成基底板层保护膜 ,更早更多地激活成肌细胞、生成肌丝、形成肌管、融合成肌纤维 ,愈合质量也较好 ,实验组内源性IGF 1及IGF 2的mRNA含量均较对照组提早升高。结论 局部注射外源性胰岛素样生长因子 1可以使内源性的IGF 1和IGF 2的基因转录提早 ;可以刺激成肌细胞增生 ,促进肌管形成 ,加速肌管融合成肌纤维 ,加速骨骼肌创伤后修复过程 。
- 李云霞陈世益马昕陈劲松周国瑛龚祖埙
- 关键词：骨骼肌胰岛素样生长因子-1骨骼肌损伤动物实验
- 对虾杆状病毒新的聚合酶链式反应检测方法
- 一种对虾杆状病毒新的PCR检测方法，是根据对虾病毒本身的基因结构，建立的一种新型的检测对虾病毒的快速、微量PCR方法，具有专一性强，灵敏度高的优点。此方法适用于对亲虾、虾苗是否带毒，对虾病毒病的发生及发病过程进行追踪；对...
- 龚祖埙周国瑛沈菊英彭宝珍
- 文献传递
- 对虾杆状病毒新的聚合酶链式反应检测方法
- 一种对虾杆状病毒新的PCR检测方法,是根据对虾病毒本身的基因结构,建立的一种新型的检测对虾病毒的快速、微量PCR方法,具有专一性强,灵敏度高的优点。此方法适用于对亲虾、虾苗是否带毒,对虾病毒病的发生及发病过程进行追踪;对...
- 龚祖埙周国瑛沈菊英彭宝珍
- 文献传递
- 用基因枪将外源DNA导入中国对虾被引量：37
- 2000年
- 用基因枪的方法, 以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)基因作为报告基因, 和带有切割对虾白斑病病毒基因的核酶基因质粒pGDNA-RZ1导入中国对虾受精卵中, 利用荧光显微镜分别对各个不同发育时期对虾幼体的处理组和对照组做了检测. 绿色荧光蛋白在无节幼体和蚤状幼体中的瞬间表达强烈. 对成体的RT-PCR和PCR检测表明, 外源的GFP基因已转移到中国对虾体内并有相应的基因产物表达. 初步建立了转基因虾的操作方法, 为今后虾类基因工程育种在生产实践中的应用奠定了实验基础.
- 刘志毅相建海周国瑛龚祖埙
- 关键词：基因枪绿色荧光蛋白中国对虾外源DNA导入
