姜铮
- 作品数:18 被引量:119H指数:5
- 供职机构:中国人民解放军更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 蛋白质磷酸化修饰的研究进展被引量:74
- 2009年
- 蛋白质磷酸化是最常见、最重要的一种蛋白质翻译后修饰方式,它参与和调控生物体内的许多生命活动。通过蛋白质的磷酸化与去磷酸化,调控信号转导、基因表达、细胞周期等诸多细胞过程。随着蛋白质组学技术的发展和应用,蛋白质磷酸化的研究越来越受到广泛的重视。我们介绍了蛋白质磷酸化修饰的主要类型与功能、磷酸化蛋白质分析样品的富集及制备、磷酸化蛋白的鉴定及磷酸化位点的预测、蛋白分离后磷酸化蛋白的检测,及蛋白质磷酸化的分子机制,并综述了近年来国内外的主要相关研究进展。
- 姜铮王芳何湘刘大伟陈宣男赵红庆黄留玉袁静
- 关键词:磷酸化修饰
- 福氏志贺菌Ⅲ型分泌系统效应子IpaH4.5功能的初步研究被引量:3
- 2009年
- 目的:IpaH家族是福氏志贺菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应子的成员,但功能不清,特别是对IpaH4.5的研究未见报道。本研究拟探讨IpaH4.5的功能。方法:克隆了福氏志贺菌2a 301株的IpaH4.5基因,构建了带Flag和GFP标签的IpaH4.5真核表达载体。通过Western印迹和共聚焦确定IpaH4.5在真核细胞293T中的表达和定位,通过报道基因的方法观察IpaH4.5对宿主细胞NF-κB途径的影响。结果:Western印迹证实IpaH4.5在真核细胞中有表达,激光共聚焦确定IpaH4.5在真核细胞中定位于细胞膜和细胞核,通过报道基因观察到它可以抑制宿主细胞的NF-κB途径。结论:发现IpaH4.5可以抑制NF-κB途径,为进一步研究IpaH4.5的功能奠定了基础。
- 王芳王芳马红芳何湘苑锡铜姜铮刘大伟赵江丽赵红庆袁静钟辉
- 关键词:福氏志贺菌宿主细胞NF-ΚB途径
- 病原微生物胞内寄生机制的研究进展被引量:3
- 2011年
- 近年来随着微生物学和免疫学的发展,病原菌胞内寄生的研究越来越受到广泛的重视。现对病原微生物胞内寄生的侵袭途径、胞内生境以及不同病原体胞内生存致病的特点,以及近年来国内外的主要研究进展做一综述。
- 赵江丽陈宣男姜铮王芳袁静甄清
- pcDNA3转染HPV16E6基因对人宫颈癌细胞C33A细胞生长及周期的影响被引量:2
- 2009年
- 目的探讨HPV16E6对宫颈癌C33A细胞生长增殖的影响。方法通过脂质体法将HPV16E6基因稳定转染宫颈癌C33A细胞,RT-PCR及Western blot分别检测转染细胞中HPV16E6 mRNA和蛋白表达水平,流式细胞仪检测HPV16E6基因转染对C33A细胞生长增殖与细胞周期的影响。结果稳定转染获得了稳定表达pcDNA3-HPV16E6质粒的C33A细胞克隆(C33A-E6细胞,即pcDNA3/HPV16E6/C33A组)及稳定复制空载体质粒的细胞克隆(C33A-P细胞,即pcDNA3/C33A组),并将未转染的C33A细胞作为对照组。pcDNA3/HPV16E6/C33A组细胞的生长速度比pcDNA3/C33A组和对照组明显加快(P<0.05)。在转染了HPV16E6基因的C33A细胞中,其DNA合成前期Gl和静止期G0(G0/G1期)细胞百分率(39.3%)明显低于pcDNA3/C33A组(53.7%)和对照组(55.4%)(P<0.01);而处于S期细胞的百分率(38.3%)、DNA合成后期G2及分裂期M的细胞百分率(G2/M:32.9%),均明显高于pcDNA3/C33A组(S:29.4%;G2/M:17.0%)和对照组(S:28.0%;G2/M:16.6%)(P<0.01)。pcDNA3/C33A组和对照组细胞周期的各期分布无明显差异(P>0.05)。结论HPV16E6可能通过某种途径参与了C33A细胞的周期调控,促进细胞分裂,从而促进C33A细胞的增殖。
- 杨秀坤陈宣男姜铮
- 关键词:人乳头瘤病毒宫颈癌细胞细胞周期
- 驻京部队2003~2004年法定报告传染病疫情分析被引量:5
- 2005年
- 目的了解和掌握部队传染病疫情动态及其影响因素,为部队卫生防病工作管理决策提供相关信息。方法采用流行病学三间分布和医学统计学分析方法对驻京部队报告疫情进行分析。结果通过分析,驻京部队2003~2004年期间细菌性痢疾、病毒性肝炎和感染性腹泻的发病率显著高于其他传染病,占传染病总报告发病例数的79.2%;麻疹、风疹、流行性腮腺炎等时有发病报告。从传播途径上看,肠道传染病和呼吸道传染病所占比例最大,分别占传染病总报告发病数的61.3%和18.5%。结论呼吸道传染病和消化道传染病仍然是威胁部队官兵健康的主要传染病,应加大对官兵传染病知识的宣传力度,控制各种传染病的发生。
- 姜铮贾红李申龙温亮王勇杜昕颖
- 关键词:法定报告传染病驻京部队疫情分析
- 普凡喜预防上呼吸道感染效果现场干预实验研究
- 目的了解鼻用黏膜抗菌剂普凡喜在上呼吸道感染高发季节对健康人群上呼吸道感染的预防效果及其作用特点。方法现场流行病学干预和医学统计学队列研究。结果普凡喜用药组的上感发病率低于安慰剂,明显低于空白对照组;用药组的上感症状轻干安...
- 姜铮王勇贾红李申龙苑锡铜温亮杜昕颖
- 关键词:干预实验
- 文献传递
- 志贺氏菌致病机制研究进展被引量:7
- 2009年
- 志贺氏菌属是一类不形成芽孢的革兰氏阴性致病菌,能够通过侵袭大肠引起患者典型菌痢症状,如发热、腹痛、腹泻等。本文就志贺氏菌质粒和染色体上的毒力相关基因以及志贺氏菌的Ⅲ型分泌系统和侵袭机制等方面的研究进展作一综述。
- 姜铮王芳王芳何湘黄留玉
- 关键词:毒力相关基因
- NOD1真核表达质粒的构建及表达被引量:1
- 2010年
- 目的:构建天然免疫胞内识别受体核苷酸寡聚域1(NOD1)真核表达质粒。方法:NOD1基因片段经PCR扩增获得,经酶切后连接到真核表达载体pcDNA3/flag中,对挑选出的阳性克隆测序,将序列正确的重组质粒pflag-NOD1转染293T细胞,用Western印迹检测目的蛋白的表达,同时用NF-κB的萤光素酶报告基因检测NOD1蛋白的活性。结果:pflag-NOD1可以在真核细胞293T中表达,并可以增强NF-κB报告基因的转录活性。结论:构建了重组质粒pflag-NOD1,在细胞中表达NOD1后能够提高NF-κB转录的生物活性,为进一步研究NOD1的功能奠定了基础。
- 陈宣男何湘姜铮王雪松刘大伟郭燕红袁静甄清
- 关键词:NF-ΚB真核表达萤光素酶报告基因
- 长双歧杆菌NCC2705葡萄糖与果糖代谢的比较蛋白质组学被引量:3
- 2008年
- 为揭示长双歧杆菌NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)果糖代谢途径,建立其果糖发酵模型。以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,进行了果糖和葡萄糖生长的菌体比较蛋白质组学研究,利用MALDI-TOF和ESI-MS/MS鉴定差异蛋白,进一步通过半定量RT-PCR验证二者显著差异表达蛋白。果糖生长的菌体蛋白中鉴定到了所有葡萄糖降解途径中的酶和蛋白质,另外鉴定到3倍以上差异蛋白点9个,其对应的5个蛋白在果糖发酵中上调。半定量RT-PCR验证显著差异蛋白,显示在果糖发酵中具有高水平表达是ABC转运系统的果糖特异性-结合蛋白BL0033和ATP结合蛋白BL0034。果糖的发酵时间和浓度梯度试验显示诱导时间越长、浓度越高,BL0033的表达量越高。第一,比较蛋白谱证明果糖和葡萄糖以相同途径降解。第二,BL0033的表达是受果糖诱导的,果糖的吸收可能是通过一个特殊的转运系统,即ABC转运系统将果糖从胞外转运到胞内,其中BL0033和BL0034共同作为系统元件扮演了重要角色。
- 孙忠科卜歆何湘姜铮王芳赵红庆刘大伟袁静
- 关键词:比较蛋白质组半定量RT-PCR
- 志贺氏菌福氏2a 301株ipaH4.5突变株的构建及生物学功能分析被引量:6
- 2010年
- 利用λ-Red重组系统对福氏2a志贺氏菌301株ipaH4.5基因进行缺失突变,构建了福氏2a志贺氏菌301株ipaH4.5基因缺失突变株?ipaH4.5,利用低拷贝质粒构建ipaH4.5缺失突变株的回复突变株△ipaH4.5HF。PCR方法证实了ipaH4.5基因的缺失和回复。对野生株、突变株和回复突变株的生长代谢及细胞侵袭能力进行比较;ELISA方法检测3株菌侵袭鼠J774巨噬细胞后培养上清中炎性因子的水平。生长代谢实验表明缺失和回复ipaH4.5不影响志贺氏菌的生长速度,侵袭实验表明缺失和回复ipaH4.5也不影响志贺氏菌对HeLa细胞和鼠J774巨噬细胞的侵袭能力,表明ipaH4.5基因与志贺氏菌的生长代谢和侵袭能力无关;鼠J774巨噬细胞培养上清中细胞因子水平的改变提示该基因在志贺氏菌侵入细胞后抑制宿主细胞炎症反应。
- 王芳王芳赵江丽何湘姜铮刘大伟陈宣楠袁静
- 关键词:福氏志贺氏菌基因缺失生物学功能