安广宇
- 作品数:43 被引量:92H指数:6
- 供职机构:首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技计划项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- NSCLC患者淋巴细胞亚群在化疗过程中变化的相关研究
- 目的 通过分析NSCLC患者化疗前后及化疗过程中淋巴细胞亚群的变化,探讨化疗对机体免疫功能的动态影响.方法 收集首都医科大学附属北京朝阳医院初次化疗的NSCLC患者37例,应用流式细胞仪检测化疗过程中9个时间点的13项淋...
- 王倩安广宇马迎民
- 抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21基因克隆及单链抗体的构建和表达被引量:13
- 2001年
- 目的将能与血小板膜糖蛋白 a特异结合的单克隆抗体 SZ- 2 1构建成单链抗体 ,为其临床应用奠定基础。方法通过逆转录及多聚酶链反应 ,扩增并克隆 SZ- 2 1的可变区基因 VH、VL ,经测序后构建 SZ- 2 1单链抗体 (SZ- 2 1Sc Fv) ,在大肠杆菌中进行表达。EL ISA和 Western印迹检测其与血小板的结合特性。结果 VH、VL 可变区基因符合小鼠抗体可变区特征 ,SZ- 2 1Sc Fv基因拼接正确。表达产物除少量为分泌型外 ,主要以包涵体形式存在 ,表达量占菌体蛋白的 2 1%。经过变性和复性后 ,该单链抗体保留了与血小板特异结合的能力。结论成功表达了 SZ- 2 1单链抗体 ,该小分子抗体具有特异结合血小板的能力 ,有望用于抗血栓治疗。
- 安广宇董宁征阮长耿
- 关键词:单链抗体SCFV原核表达单克隆抗体抗血小板膜糖蛋白
- 白血病患者骨髓基质细胞上清TNF-α含量的测定被引量:3
- 2000年
- 安广宇宋振岚王晓波
- 关键词:白血病骨髓基质细胞肿瘤坏死因子
- 免疫磁珠与激活的单核-巨噬细胞对白血病细胞体外净化作用的研究被引量:6
- 1999年
- 已知激活的单核巨噬细胞(MΦ)能选择性消除残存的肿瘤细胞,在抗复发、抗转移诸方面具重要价值。我们用免疫磁珠与分别经凝集素美洲商陆(PWM)+IL2及新城鸡瘟病毒(NDV)激活的MΦ对18例急性白血病的骨髓或外周血进行体外净化,效果明显,现报告如下...
- 宋振岚董学斌安广宇练诗梅富丽慕俐君董海东钱振超
- 关键词:白血病骨髓体外净化免疫磁珠MΦ
- 人脐血来源CD34^+内皮祖细胞的分离、培养、鉴定及集落形成特性被引量:1
- 2013年
- 目的:分离、培养及鉴定人脐血来源的内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs),对内皮克隆形成细胞(Endothelial colony-forming cells,ECFCs)与内皮细胞集落形成单元(Endothelial cell colony-forming units,CFU-ECs)进行鉴别和界定。方法:应用流式细胞术、RT-PCR、免疫荧光、Dil-Ac-LDL摄取、集落形成和成血管实验等多种方法对两类细胞进行鉴别及界定。结果:ECFCs和CFU-ECs表达相同内皮细胞表面抗原,如VEGFR-2、CD31、CD144、CD105和CD146。而CD45和CD14在两者的表达存在差异,CFU-ECs表面强表达,ECFCs表面几乎检测不到。另外两者在集落形态、细胞增殖能力、Dil-Ac-LDL摄取和体外成血管能力等方面均存在明显差异。结论:CFU-ECs可能是造血干细胞源性的细胞集落,并非真正的EPCs。而ECFCs为真正意义上的EPCs,在组织工程和临床等方面有极大的应用前景。
- 李国强刘珍珍孙晟轩安广宇周海斌
- 关键词:内皮祖细胞细胞分离脐血细胞鉴定
- 抗血小板GP Ⅲa单克隆抗体SZ-21单链抗体片断的表达和特性
- 2001年
- 将能与血小板膜糖蛋白IIIa特异结合的单克隆抗体SZ 2 1构建成单链抗体。应用RT PCR技术 ,从分泌SZ 2 1单克隆抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH 和VL 可变区基因 ,并构建成SZ 2 1单链抗体 (SZ 2 1ScFv)。将该单链抗体基因亚克隆到高效表达质粒pET2 0b ,得到pET2 0b 2 1ScFv。通过IPTG诱导在大肠杆菌EcoliBL2 1(DE3)PlysS中表达了功能分子。表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量占菌体蛋白的 2 1%。经过包涵体的溶解、Ni NTA树脂亲和吸附纯化和蛋白质的体外重折叠等一系列的变性和复性过程 ,获得具有生物活性的高纯度单链抗体片段。ELISA和Westernblot证实该融合蛋白保留了与亲本抗体同样的血小板结合特性。SZ 2 1单链抗体体外能够抑制ADP诱导的血小板聚集 ,其抑制能力呈剂量依赖性 ,在浓度为 2 0mg/L时达到最大抑制率。流式细胞仪检测证实该单链抗体能与内皮细胞反应。该单链抗体有望用于血栓性疾病的治疗。
- 安广宇董宁征阮长耿
- 关键词:血小板单链抗体原核表达
- 肥胖对女性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的影响被引量:8
- 2018年
- 目的探讨肥胖对女性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的影响及其与临床特征的关系。方法回顾性分析225例女性乳腺癌患者的病历资料,收集患者术前的身高、体重、月经状态、既往病史等临床数据,同时采集术后组织病理分级、分期及免疫组化各指标的情况等信息。根据中国体重指数(BMI)参考标准将患者分为超重肥胖组(n=134)和非超重肥胖组(n=91),分析BMI与女性乳腺癌患者临床特征的关系及其对腋窝淋巴结转移的影响。结果 225例女性乳腺癌患者的平均BMI为24.94 kg/m^2。超重肥胖组患者的平均腋窝淋巴结转移数目多于非超重肥胖组(P=0.047)。两组患者的腋窝淋巴结平均切除数量及淋巴结转移分期比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。非超重肥胖组与超重肥胖组已绝经患者所占比例分别为29.2%、70.8%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);超重肥胖组患者的高血压、2型糖尿病发病率均较非超重肥胖组高(P<0.05);两组患者的冠心病发病率、有肿瘤家族史比例、病理分级、病理分期、肿块大小及脉管癌栓比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。在免疫组化指标中,两组患者的ER、PR、HER2、p53及Ki-67阳性表达情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与非超重肥胖乳腺癌患者相比,超重肥胖患者的平均腋窝淋巴结转移数量偏多,因此超重肥胖可能影响乳腺癌的疾病进展。
- 张晓静杨磊樊翠珍严冬安广宇
- 关键词:体重指数肥胖腋窝淋巴结
- 10基因作为靶标物在开发用于对食管鳞癌患者进行预后的产品中的应用
- 本发明公开了10基因作为靶标物在开发用于对食管鳞癌患者进行预后的产品中的应用。本发明保护用于获得风险评分的产品在制备对食管鳞癌患者进行预后的系统中的应用。风险评分=(0.32596×C1QA水平)+(1.40234×C1...
- 姚健楠葛洋刘健段凌安广宇
- 苯并芘上调食管鳞癌环氧化酶-2表达诱导M2型巨噬细胞浸润增加机制
- 2023年
- 目的研究有吸烟史的食管鳞癌患者肿瘤微环境中M2型肿瘤相关巨噬细胞浸润增加的潜在机制。方法通过免疫组织化学法以及免疫浸润分析(CIBERSORT)数据库分析检测M2型肿瘤相关巨噬细胞在有/无吸烟史的食管鳞癌患者中表达差异。通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库检测有吸烟史的食管鳞癌患者肿瘤组织中参与调控巨噬细胞招募与极化相关的环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX2)表达变化。使用烟草中主要致癌物苯并芘处理食管鳞癌细胞,通过蛋白印迹(Western blotting)与实时荧光定量聚合酶链反应法(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测COX2表达变化。通过Transwell法评估苯并芘刺激前后对肿瘤细胞上清对巨噬细胞招募作用的影响。构建肿瘤细胞上清-巨噬细胞共培养体系,使用Western blotting法与RT-qPCR法评估苯并芘刺激前后肿瘤细胞上清对巨噬细胞M2型标志物表达变化。通过观察巨噬细胞形态变化辅助判断其极化情况。结果有吸烟史的食管鳞癌患者M2型巨噬细胞浸润明显升高;在烟草中主要致癌物苯并芘刺激下,食管鳞癌细胞中COX2明显增多;经苯并芘刺激后肿瘤细胞上清对巨噬细胞招募作用明显增强;经苯并芘刺激后肿瘤细胞上清处理巨噬细胞后可诱导其向M2型巨噬细胞极化。结论在烟草中主要致癌物苯并芘的刺激下,食管鳞癌细胞可诱导巨噬细胞进入肿瘤微环境并诱导其向M2型肿瘤相关巨噬细胞极化。
- 肖泽儒闫锐梁紫葳葛洋安广宇
- 关键词:食管鳞癌吸烟环氧化酶-2肿瘤相关巨噬细胞
- 双肾上腺素样激酶1不同剪接体通过激活JNK通路增强胰腺癌细胞的增生能力被引量:2
- 2019年
- 目的研究双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)长、短亚型对人胰腺癌增生能力的影响,并探讨其分子机制。方法分别将空载(PCMV6-AC-GFP)、DCLK1亚型1和DCLK1亚型4真核表达质粒转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选法构建DCLK1不同亚型稳定过表达的细胞系;通过定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting法鉴定DCLK1长、短亚型的表达情况;实时无标记细胞分析仪(real-time cell analysis,RTCA)技术检测DCLK1长、短亚型表达对PANC-1细胞增生能力的影响; Western blotting法检测DCLK1对丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)通路的影响;利用c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路特异性抑制剂SP600125处理DCLK1稳转细胞,检测JNK通路抑制对胰腺癌细胞增生能力的影响。结果 DCLK1长、短亚型的过表达显著促进胰腺癌细胞的增生能力(P <0. 05),并且促进MAPK通路中JNK的磷酸化水平以及JNK通路靶分子CMYC、CD44和Cyclin D1的表达(P<0. 05),而对MAPK通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和p38的磷酸化无明显影响(P>0. 05); SP600125抑制JNK的磷酸化,可以显著降低DCLK1对JNK通路的激活以及对胰腺癌细胞的促增生能力(P <0. 05)。结论DCLK1长、短亚型均可以通过激活JNK通路促进胰腺癌细胞的增生能力。
- 张媛媛葛洋安广宇
- 关键词:胰腺癌增生JNK通路