尹延梅
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 慢病毒介导的RNAi对人胃癌细胞VEGF表达的影响被引量:7
- 2009年
- 目的探讨慢病毒介导的RNAi对人胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将构建的pGCL-GFP重组载体、phelper 1.0载体、phelper 2.0载体共转染293T细胞,包装产生重组慢病毒颗粒VEGF-RNAi-LV,并进行其病毒滴度测定。转染胃癌SGC7901细胞96 h后,用RT-PCR法检测细胞VEGF基因表达,ELISA法检测细胞培养液上清VEGF蛋白表达,四甲基偶氮唑盐比色法检测RNAi对胃癌细胞增殖的影响。结果重组慢病毒包装滴度为2×109TU/ml,VEGF-RNAi-LV转染胃癌细胞96 h后,其VEGF基因及培养液上清VEGF蛋白表达均明显下降,细胞生长缓慢,增殖受到抑制。结论慢病毒介导的RNAi可明显抑制人胃癌细胞VEGF基因和蛋白表达,抑制细胞增殖。
- 尹延梅于红周岩冰张文卿吕锐
- 关键词:内皮生长因子RNAI技术慢病毒属
- 重组蓝藻抗病毒蛋白N的纯化复性及其抗单纯疱疹病毒1型活性的研究被引量:1
- 2008年
- 目的纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性。方法将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes si mplex virus type1,HSV-1)活性的研究。通过观察细胞病变效应(CPE)及MTT比色法检测细胞活性,以判断CV-N的抗病毒效应。结果重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化后,SDS-PAGE显示11KDa处清晰的单一条带,复性的重组CV-N对Vero细胞毒性极低,对HSV-1无直接灭活作用,CV-N对病毒的吸附及生物合成均有抑制作用,且强于阳性对照药物阿昔洛韦。结论经纯化复性的CV-N具有良好的抗HSV-1活性,值得进一步研究和开发。
- 刘宗涛于红尹延梅李丹张文卿
- 关键词:纯化复性单纯疱疹病毒1型抗病毒
- 靶向VEGF的siRNA联合紫杉醇抑制胃癌细胞增殖的研究
- 探讨慢病毒载体介导的RNAi对人胃癌细胞SGC7901血管内皮生长因子(VEGF)基因表达、细胞增殖、细胞凋亡及紫杉醇药物敏感性的影响。本研究设计针对VEGF基因的siRNA寡核苷酸序列,与pGCL-GFP载体连接,构建...
- 于红尹延梅孙鹏张文卿吕锐
- 靶向VEGF的siRNA联合紫杉醇抑制胃癌细胞增殖的研究
- 目的探讨慢病毒载体介导的RNAi对人胃癌细胞SGC7901血管内皮生长因子/(VEGF/)基因表达、细胞增殖、细胞凋亡及紫杉醇药物敏感性的影响。
方法设计针对VEGF基因/(NM003376/)的siRNA寡...
- 尹延梅
- 关键词:VEGFRNA干涉慢病毒紫杉醇
- 文献传递
- 慢病毒介导的siRNA联合紫杉醇抑制胃癌细胞增殖的研究
- 2010年
- 目的:探讨慢病毒介导的靶向血管内皮生长因子(VEGF)的RNAi对人胃癌细胞SGC7901增殖、细胞凋亡及紫杉醇药物敏感性的影响。方法:慢病毒VEGF-RNAi-LV感染SGC7901细胞后,MTT法检测RNAi及RNAi联合紫杉醇对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化,Hoechst33258染色观察细胞的凋亡。结果:MTT结果显示:与未感染病毒的SGC7901细胞及感染阴性病毒对照NC-LV的胃癌细胞比较,VEGF-RNAi-LV感染后的胃癌细胞生长缓慢,对紫杉醇的敏感性增加;流式细胞周期分析结果表明VEGF-RNAi-LV转染后的细胞G0/G1期比例升高,S期和G2/M期比例降低;Hoechst33258染色结果证实VEGF-RNAi-LV组细胞核出现典型的凋亡形态学改变。结论:慢病毒介导的RNAi可明显抑制人胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,提高胃癌细胞对紫杉醇的敏感性。
- 阎博民于红尹延梅张文卿吕锐
- 关键词:RNA干涉慢病毒紫杉醇