尹隽 作品数:22 被引量:41 H指数:4 供职机构: 复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市基础研究重大(重点)项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 交通运输工程 机械工程 更多>>
AcMNPV bro基因的表达和作用研究 被引量:3 2016年 bro基因(baculovirus repeated orf)是杆状病毒编码的一个独特的基因家族,一些病毒的基因组中编码有多个该基因家族的成员.研究分析了苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组仅有的一个bro基因,结果表明:AcMNPVbro基因(ac-bro)在感染后6h就开始转录,并在8h时检测到BRO表达;ac-bro基因敲除的重组病毒感染后子代病毒的效价略低于野生型病毒,且其DNA复制明显推迟.利用大肠杆菌中重组表达的Ac-BRO蛋白进行的体外实验提示其具有结合DNA的能力.这些结果提示ac-bro基因在病毒的复制中有一定的作用. 张楠 葛晶 周子谦 尹隽 钟江关键词:杆状病毒 DNA结合 基因敲除 一种提高载体转导和基因表达效率的病毒载体及其应用 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种提高在动物细胞中转导和表达外源基因效率的病毒载体及其应用方法。本发明提供了一种提高载体转导和基因表达效率的病毒载体,包括病毒的核衣壳蛋白启动子序列、核衣壳蛋白编码序列、带启动子的目... 钟江 王鑫 李俪 尹隽文献传递 粉纹夜蛾颗粒体病毒增强蛋白锌离子结合域定点突变 被引量:8 2007年 粉纹夜蛾颗粒体病毒(Trichoplusia ni granulovirus,TnGV)增强蛋白(enhancin)具有增强病毒感染力的作用。该蛋白包含一个多种杆状病毒增强蛋白都具有的保守结构域HELGH,是典型的金属蛋白酶锌离子结合域,但该结构域对增强蛋白生物活性的重要性尚未得到研究。本研究通过定点突变构建了该结构域的5个氨基酸分别突变为2种不同氨基酸的共10种增强蛋白突变体基因,并用杆状病毒载体进行了重组表达。活性测定发现,10种突变型增强蛋白大部分都丧失了野生型增强蛋白所具有的降解粉纹夜蛾幼虫围食膜粘蛋白的生物学功能,只有1种(第4位G突变为A)保留该生物学活性。这一结果表明锌离子结合域对增强蛋白生物活性具有重要作用,也提示增强蛋白确是一种金属蛋白酶。 尹隽 单梁 宋大新 钟江关键词:杆状病毒 增强蛋白 金属蛋白酶 围食膜 定点突变 毛壳素显著抑制柯萨奇病毒B3的体外复制 2013年 柯萨奇病毒B3(CVB3)是一种常见的人类病原体,与多种疾病有关。本研究旨在探讨球毛壳菌代谢产物毛壳素对CVB3在体外培养细胞系中复制的影响。结果显示,毛壳素显著抑制CVB3在体外培养细胞系中的复制。250nmol/L毛壳素可使CVB3感染的HeLa细胞相对存活率从未加毛壳素时的(21.9±1.8)%提高至(70.1±4.3)%。同时,毛壳素处理的HeLa细胞中病毒产量仅为对照组的(5.3±0.8)%,而病毒RNA水平也仅为对照组的(13.0±8.3)%。毛壳素也可使CVB3感染的Vero细胞相对存活率从(64.6±1.7)%提高至(87.2±4.8)%。毛壳素的这种抑制作用可被抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸部分抑制。研究毛壳素抑制病毒复制的具体作用机制将有助于新型抗病毒药物的研制。 张世仑 张媛媛 尹隽 钟江关键词:柯萨奇病毒B3 抗病毒药物 我国自由生活中气门目螨类科属分类 被引量:1 1994年 对我国已知自由生活中气门目螨类15科、51属列出科、属检索表。 粱来荣 胡成业 尹隽关键词:中气门目 螨类 一株在HA831中复制并能提高绿色荧光蛋白表达水平的AcMNPV突变体的初步研究 2009年 棉铃虫卵巢细胞系HA831是一株对AcMNPV不敏感的细胞系.用AcMNPV突变体库中分离到的病毒突变体感染HA831细胞时,得到了一株绿色荧光蛋白基因表达水平明显提高的AcMNPV突变体.分析该突变体基因组,发现其orf18基因被Tn5转座子插入.利用同源重组重新构建了一株在同样位置带有同样插入突变的突变体,命名为AcGFP-i18.AcGFP-i18在Sf9细胞中能正常复制,其感染HA831细胞后,细胞中绿色荧光蛋白的表达水平明显高于对照病毒AcGFP,同时有一定水平的子代病毒产生.这一结果提示orf18位点的插入突变可以一定程度上扩展AcMNPV的宿主细胞范围. 夏霏 张琦 尹隽 钟江关键词:病毒复制 宿主范围 杆状病毒突变体库的构建及三个突变株的初步研究 杆状病毒是一种重要的生物杀虫剂和基因工程的表达系统,在基因治疗中也可能发挥重要的作用。目前对杆状病毒基因组和重要基因的分子生物学已经有了一定的认识,但是病毒基因组中大部分基因仍然有待深入研究。建立一种高效的方法来研究这些... 尹隽关键词:杆状病毒 基因工程 文献传递 利用Tn5转座子构建杆状病毒AcMNPV随机突变体的初步研究 被引量:8 2005年 以杆状病毒模式种AcMNPV为研究对象,应用基于Tn5转座子的随机转座的方法,构建杆状病毒突变体库.将果蝇hsp70启动子后接绿色荧光蛋白基因后插入Tn5转座子,构建了可以在昆虫细胞中表达,易于跟踪的转座载体.利用体外转座系统将转座子随机插入AcMNPV基因组,并用转座反应液转染Sf21细胞,得到了表达绿色荧光蛋白的病毒突变体库.进一步纯化了两株病毒B9F和Li6A,进行了转座子插入位点的分析,确定两株病毒中,转座子分别插入了94K基因和p10基因.该方法将为杆状病毒功能基因组研究提供重要的手段. 李惠 赵明磊 尹隽 钟江关键词:ACMNPV 转座酶 突变体 一种新的乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因的克隆和表达 2006年 目的获得新的降解革兰阴性细菌数量阈值感应信号分子乙酰高丝氨酸内酯类化合物(AHL)的水解酶基因。方法选择性富集和培养土壤中耐热细菌,抽取细菌总DNA作为模板,特异性聚合酶链反应扩增乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因,进行克隆和DNA序列分析及原核表达。结果得到1个新的AHL水解酶基因,该基因与已知基因的核苷酸序列和对应的氨基酸序列同源性最高分别为87%和94%。该基因在原核表达系统中表达,得到了与预期相对分子质鲢(Mr)一致的蛋白质。结论证实乙酰高丝氨酸内酯水解酶广泛存在于环境微生物中。为进一步研究提供条件。 陈嗣新 尹隽 钟江乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达 被引量:1 2004年 乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义. 杨国 尹隽 吕佳清 钟江关键词:乙型肝炎病毒 乙肝病毒 HBV 病毒复制 HEK293细胞