张海峰
- 作品数：17 被引量：30H指数：3
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- ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩被引量：4
- 2011年
- 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。
- 叶东张海峰朱林燕王立伟陈丽新
- 关键词：SIRNA鼻咽癌细胞细胞容积
- ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩
- Cl通道在细胞的调节性容积回缩(RVD)功能中起重要作用,但参与RVD的Cl通道的蛋白分子本质目前还不清楚,本文用siRNA沉默ClC-3 Cl通道,探讨ClC-3 Cl通道是否参与鼻咽癌CNE-2Z细胞RVD。实验使用...
- 叶东张海峰王立伟陈丽新
- 关键词：SIRNA鼻咽癌细胞细胞容积
- 文献传递
- 低渗诱导高分化鼻咽癌细胞CNE-1容积激活性氯电流被引量：4
- 2009年
- 目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%低渗刺激后电流迅速增大,呈外向优势,对阴离子通透性的大小为:I->Br->Cl->葡萄糖酸。氯通道阻断剂ATP和NPPB可逆性地抑制此电流,ATP的抑制作用在外向电流显著强于内向电流。此电流对细胞容积改变敏感,细胞肿胀时被激活,细胞发生皱缩时则被抑制。结论:细胞外低渗诱导CNE-1细胞产生氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,在CNE-1细胞容积调节中起重要作用。
- 朱林燕左婉红张海峰陈丽新王立伟
- 关键词：鼻咽肿瘤氯化物通道膜片钳术
- 细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。
- 柏志全张海峰陈丽新朱林燕左婉红和树同王立伟
- 关键词：细胞周期蛋白D1绿色荧光蛋白质粒构建免疫荧光免疫印迹
- 氯通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度依赖性,IC50为3.1μmol/L;8μmol/L藤黄酸诱导细胞凋亡作用可被氯离子通道阻断剂NPPB和Tamoxifen抑制。藤黄酸诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的氯电流,可被NPPB明显抑制。结论藤黄酸可能通过激活氯离子通道而诱导CNE-2Z细胞凋亡和抑制细胞增殖,提示氯通道参与藤黄酸诱导的细胞凋亡。
- 柏志全李华荣张海峰刘善文朱林燕叶文才陈丽新王立伟
- 关键词：藤黄酸鼻咽癌细胞凋亡氯离子通道膜片钳技术
- ClC-3氯通道在细胞增殖、周期、凋亡中的作用
- 氯通道是生物体内最重要的阴离子通道,广泛分布于各种组织,参与机体多种生理和病理生理过程。我们的研究主要着眼于氯通道在细胞增殖、周期、凋亡等各种与肿瘤发生发展密切相关的生物学过程中的作用。首先,与相同组织起源的正常人鼻咽上...
- 朱林燕张海峰左婉红马莲顺陈丽新王立伟
- 文献传递
- 港澳台侨与大陆大学生学习风格差异研究被引量：9
- 2009年
- 本研究对暨南大学的港澳台侨学生与大陆学生的学习风格进行调查,分析他们的学习风格差异,为深化教育改革提供第一手材料,以使我们的教学更适应不同类型学生的特点。本研究向暨南大学医学类专业2005、2006年级港澳台侨学生和大陆学生发放所罗门学习风格量表进行问卷调查,结果表明这两类学生在信息加工、理解方面存在差异,外招生偏于活跃和综合型,而内招生偏于沉思与序列型,而两类学生在信息感知和输入方面没有显著差异,都偏于感悟型与视觉型。
- 陈丽新张海峰朱林燕柏志全王立伟
- 关键词：医学生
- 细胞周期蛋白D1对氯通道ClC-3的影响
- 目的:探讨高表达cyclin D1对氯通道蛋白ClC-3的影响及其作用机制。方法:利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增cyclin D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1...
- 张海峰朱林燕陈丽新王立伟
- 关键词：荧光共振能量转移
- 文献传递
- Polarized calcium signaling in directional migration of human hepatocellular carcinoma cells
- Directional migration is a property common to malignant carcinoma cells and is critical for cancer metastasis....
- 杨林杰张海峰叶东罗海朱林燕陈丽新王立伟
- 文献传递
- Polarized calcium signaling in directional migration of human hepatocellular carcinoma cells
- 杨林杰张海峰叶东罗海朱林燕陈丽新王立伟
