张玉杰
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:江苏省人民医院更多>>
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- 水通道蛋白4基因对慢性高眼压小鼠视网膜中胶质纤维酸性蛋白表达的调控
- 2014年
- 背景 本课题组先前的研究发现,神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在慢性高眼压模型小鼠视网膜星形胶质细胞和Müller细胞中表达增加,这一改变与视网膜神经节细胞(RGCs)的改变及疾病的发生及发展密切相关.水通道蛋白4(AQP4)在视网膜主要存在于神经胶质细胞中,青光眼发病过程中AQP4与GFAP表达的关系尚不清楚. 目的 研究慢性高眼压状态下AQP4基因在慢性高眼压情况下是否能够调控视网膜神经胶质细胞中GFAP的表达,探讨AQP4基因在青光眼RGCs损害中的作用.方法 利用小鼠巩膜外静脉烧烙法(烧烙静脉3~4支)建立雄性小鼠AQP4基因敲除(AQP4-/-)小鼠及其同背景雄性野生型(WT)小鼠左眼慢性高眼压模型,均取右眼作为对照眼.选择造模成功的两种小鼠各30只,分别于术后1、3、7、14和28 d各取6只小鼠用Icare回弹式眼压计测量小鼠眼压,分别于相应时间点分离取小鼠视网膜,通过Western blot 法检测AQP4-/-小鼠及WT小鼠视网膜神经胶质细胞中GFAP水平的变化,用t检验、三因素方差分析及SNK-q检验分析实验数据.结果 造模后1、3、7、14和28 d,AQP4-/-小鼠实验眼眼压均明显高于对照眼,差异均有统计学意义(t=15.29、16.02、13.77、14.34、12.40,均P<0.05);上述各时间点WT小鼠实验眼眼压均明显高于对照眼,差异均有统计学意义(t=17.65、14.91、15.97、13.41、12.53,均P<0.05).正常情况下AQP4-/-小鼠与WT小鼠视网膜组织中均有GFAP表达,WT小鼠对照眼、实验眼造模后1、3、7、14和28 d,视网膜中GFAP的表达量(GFAP/β-actin)分别为1.00±0.00、1.99 ±0.29、4.05±0.69、4.47±0.48、3.21±0.35、3.25±0.53;AQP4-/-小鼠对照眼、实验眼术后1、3、7、14和28 d视网膜中GFAP相对表达量(GFAP/β-actin)分别为1.00±0.00、1.69±0.31、2.27±0.55、2.79±0.39、1.93±0.31和1.54±0.40;造模后不同时间点小鼠视网膜中GFAP表达量差异有统计学意义�
- 姚静虹罗莎莎张玉杰袁志兰
- 关键词:水通道蛋白4神经胶质细胞胶质纤维酸性蛋白慢性高眼压
- 11β-HSD1及皮质类固醇受体在兔糖皮质激素性高眼压模型睫状体组织中的表达被引量:2
- 2014年
- 背景糖皮质激素的长期应用可能诱发敏感个体的眼压升高,研究证实11β羟类固醇脱氢酶1(11β—HSD1)及糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)可能影响房水的产生,这种机制是否与糖皮质激素性高眼压的发生有关目前国内外研究甚少。目的检测11β-HSDl及GR、MR在兔糖皮质激素性高眼压模型睫状体组织中的表达变化,探讨其在糖皮质激素性高眼压发病中的作用。方法采用随机数字表法将12~16周龄新西兰白兔13只随机分为对照组5只和实验组8只。实验组兔隔日在固定时间及固定地点于左眼球结膜下注射质量分数0.5%地塞米松磷酸钠注射液5mg(1ml),注射次日用质量分数0.5%地塞米松滴眼液点眼3次。每次注射后用氧氟沙星滴眼液点眼3次以预防感染,持续2个月;对照组兔以同法注射等容积无菌生理盐水,实验组兔眼压升高至18mmHg(1mmHg=0.133kPa)以上并能持续1周者为造模成功。实验组注射5周后以过量麻醉法处死各组实验兔,分离模型眼睫状体组织,采用免疫组织化学法检测和定位11β-HSD1蛋白在兔模型眼睫状体中的表达;采用逆转录-PCR(RT—PCR)法定量检测11β-HSDlmRNA、GRmRNA及MRmRNA在实验组兔模型眼睫状体组织中的表达,并与对照组兔眼进行比较。结果实验组采用地塞米松局部注射联合点眼后前2周眼压无明显升高,第1周与第2周问眼压差异无统计学意义(q=0.469,P〉0.05);第3、4、5周眼压逐渐升高,与对照组比较差异均有统计学意义(q=10.535、20.353、28.681,P〈0.01),第5周时达(18.87±0.77)mmHg。免疫组织化学法检测显示,11β—HSDl蛋白在睫状体中呈阳性表达,位于非色素上皮细胞,但模型眼11β—HSDl的阳性染色强度明显弱于对照组。RT—PCR法检测显示,实验:组兔模型眼睫状体中MRmRNA、GRmRNA及11β-HSDlmRNA的相对表达量
- 刘溢张玉杰夏丹姚志峰袁志兰
- 关键词:高眼压药物诱导