张秀花
- 作品数：8 被引量：16H指数：2
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 改进构建后的全生物化组织工程血管的组织结构与生物力学特性
- 2006年
- 目的改进体外构建的生物化组织工程血管(TEBV),研究其生物力学特性,获得能承载生理血流力学作用的血管替代物。方法用酶消化法制备猪颈总动脉脱细胞支架,加压灌注结合散点注射种植犬胸主动脉平滑肌细胞(VSMC),用自制的血管自动旋转流体培养系统培养3周,随后再用加压灌注法种植犬胸主动脉内皮细胞(EC),继续培养至4周,取材做HE染色。光镜和电镜观察VSMC及EC在支架内的生长情况。用力学测试仪器检测TEBV的应力-应变关系、拉伸弹性回复率以及最大断裂强度和长度。结果在血管自动旋转流体培养系统,VSMC种植3周在中膜层已经大量均匀分布,EC种植7天后已形成连续完整的EC单层;而应用单独的加压灌注法VSMC种植3周时仍不能均匀分布,EC种植1周后仍分布不均匀,未能形成连续的EC单层。TEBV培养至第4周,中膜层有大量VSMC生长,内膜层则形成连续的EC单层;透射电镜下可见VSMC、EC亚微结构与生理状态的细胞结构相似,可见缝隙连接等细胞连接方式,VSMC可产生新的胶原蛋白。扫描电镜可见EC在支架上生长良好,细胞轮廓清晰,形成连续的单层。力学特性检测结果显示:TEBV的粘弹性、拉伸弹性回复率以及最大断裂强度均接近生理血管。结论血管自动旋转流体培养系统在脱细胞血管支架上联合种植VSMC和EC,有利于种子细胞在支架腔面和管壁内均匀生长,改进了TEBV的组织结构。改进构建的TEBV生物力学特性接近生理血管,将有利于TEBV更好地承载血流动力学的作用。
- 张秀花张炎李玉泉杨向群张林
- 关键词：组织工程血管生物力学平滑肌细胞内皮细胞
- 动脉脱细胞三维胶原支架的制备和血管平滑肌细胞种植
- ＜正＞ 构建全生物化组织工程血管是血管组织工程研究中最有吸引力的研究方向之一。本文采用猪颈总动脉脱细胞胶原作三维支架构建全生物化组织工程血管,取得了初步成功。取成年雄性金华猪颈总动脉8-10cm,剥离外膜,两端修整齐,T...
- 张炎刘太华刘波李玉泉张秀花姜宗来
- 文献传递
- 动脉脱细胞三维胶原支架主要组织相容复合体I（MHC I）抗原的免疫组化观察
- ＜正＞ 采用异种动物血管制作组织工程血管的支架,再种植宿主自体平滑肌细胞和内皮细胞,是目前较理想的构建组织工程血管的模型。然而,胶原纤维、弹力纤维、细胞外基质和脱细胞后残留的细胞碎片都具有抗原性,尤其是细胞膜上的MHC是...
- 刘太华张炎李玉泉刘波张秀花姜宗来
- 文献传递
- 全生物化组织工程血管构建的初步研究被引量：3
- 2005年
- 为探索在体外初步构建全生物化组织工程血管,采用以酶消化为主的方法制备猪颈总动脉脱细胞支架,再种植犬胸主动脉的平滑肌细胞,培养四周。经组织学染色和电镜观察显示:在猪颈总动脉脱细胞支架上,犬血管平滑肌细胞大量生长,组织学和电镜结构与正常血管壁结构类似。结果表明,我们初步成功地构建了全生物化组织工程血管,为临床血管替代物的基础研究提供了有意义的实验资料。
- 张炎刘太华姜宗来张秀花刘波李玉泉
- 关键词：血管构建血管替代物血管壁
- 生物组织工程血管的体外构建及其生物力学特性的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:探索生物组织工程血管(TEBV)的体外构建,观察血管壁形成过程中血管平滑肌细胞的变化,检测TEBV的生物力学特性,为构建理想的临床血管替代物提供资料。方法采用酶消化法制备猪颈总动脉脱细胞支架,再种植犬胸主动脉的平滑肌细胞,体外培养4周,分别于2周和4周取材作形态结构观察和平滑肌肌动蛋白-α(SMA)、金属蛋白酶-2(MMP-2)及血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)的免疫组化染色并作图象分析。将幼年犬和成年犬的胸主动脉作对照。用INSTRON1122型万能电子强力仪检测TEBV的断裂强度、应力应变关系和松弛试验。结果体外培养2周和4周,血管平滑肌细胞大量增殖并迁移至支架全层,细胞间出现桥粒、缝隙连接。TEBV培养2周和4周,SMA的表达高于幼年犬,但明显低于成年犬;PDGF-AA的表达低于幼年犬,但明显高于成年犬;MMP-2高于成年犬,培养4周时MMP-2的表达接近幼年犬。TEBV的应力应变曲线呈典型的粘弹性特征,松弛应力和断裂强度均与生理血管相似。结论生物组织工程血管体外构建中平滑肌细胞分泌PDGF-AA、SMA的表达逐渐减少,平滑肌细胞由收缩表型逐渐转变为合成表型,大量增殖和分泌胶原,有细胞连接形成;同时MMP-2分泌增加,细胞发生迁移,重建TEBV的管壁结构,且血管壁的生物力学特性逐渐接近于生理血管。
- 张炎刘太华姜宗来刘波李玉泉张秀花
- 关键词：血管重建金属蛋白酶-2生物力学
- 全生物化组织工程血管SMA、PDGF-AA及MMP-2的表达
- 2006年
- 目的探讨血管平滑肌细胞的α-actin(SMA)、血小板源性生长因子-AA(PDGF-AA)及金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达情况。方法采用以酶消化为主的方法制备猪颈总动脉脱细胞支架,再种植犬胸主动脉的平滑肌细胞,培养4周,分别于2周和4周取材作形态学观察和SMA、MMP-2及PDGF-AA的免疫组化染色及图象分析,并以幼年犬和成年犬的胸主动脉作对照。结果组织工程血管培养2周和4周,α-actin的表达高于幼年犬,但明显低于成年犬;PDGF-AA表达低于幼年犬,但明显高于成年犬;MMP-2高于成年犬,培养4周时MMP-2的表达接近幼年犬。结论全生物化组织工程血管体外构建中VSMC的PDGF-AA和ECM的表达逐渐增多,SMA的表达逐渐减少,VSMC由收缩表型逐渐转变为合成表型,VSMC大量增殖,伴有新的细胞外基质产生,同时MMP-2分泌增加,促进种植细胞的迁移,重建了组织工程血管的管壁结构。
- 刘太华张炎姜宗来李玉泉刘波张秀花
- 关键词：血管重建血小板源性生长因子金属蛋白酶
- 组织工程血管脱细胞支架主要组织相容性复合体Ⅰ抗原性的免疫组化观察被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性复合体 (MHC )的变化情况 ,并将检测结果作图像分析。 结果 :对照组血管壁 MHC 高表达 ,脱细胞处理后 MHC 明显减少。图像分析得出阳性颗粒面积与视场面积比 :对照组为 (2 4 .0 9± 6 .0 9) % ,脱细胞组为 (6 .71± 2 .1 8) % ,脱细胞加碱处理组为 (1 .6 2± 0 .76 ) % ,组间比较差别均有显著意义 (P<0 .0 1 )。 结论 :MHC
- 刘太华张炎姜宗来李玉泉刘波张秀花
- 关键词：免疫原性免疫排斥反应
- 生物化组织工程血管的构建及相关的基础研究
- 本文采用酶消化法获取的猪颈总动脉脱细胞基质作为组织工程血管支架，采用组织贴块法培养幼年家犬胸主动脉VSMC，胶原酶消化法培养EC，传代纯化，获得了足够数量、高纯度的家犬VSMC和EC种子细胞，将VSMC种植在制备好的脱细...
- 张秀花
- 关键词：血管构建内皮细胞生物力学细胞功能
- 文献传递
