张艳梅
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学理学更多>>
- D1蛋白酶的高效毛细管电泳检测
- 2010年
- 在低温条件下表达的两种融合蛋白pET-28a ctpA与pET-23a-ctpA通过亲和色谱纯化、层析柱脱盐及浓缩,获得大量较高纯度的可溶性融合蛋白;并用高效毛细管电泳(HPCE)技术对两种融合蛋白进行分离检测,同时用荧光法配合确证.高效毛细管电泳分离检测结果显示,运行缓冲液的pH值相同时,两种融合蛋白的迁移时间存在显著差异;运行缓冲液的pH值在一定范围内变化时,同种蛋白的迁移时间无显著变化,表明蛋白结构是影响蛋白迁移的主要因素,两种蛋白的结构存在差异.
- 张艳梅陈腊月李伟国郭建军刘中来姚汉超刘艳丽祁超
- 关键词：融合蛋白高效毛细管电泳
- GST-Dot4融合蛋白的表达·纯化及鉴定
- 2009年
- [目的]为了提高Dot4蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达并获得较高纯度的蛋白。[方法]以pGEX-KG-Dot4重组质粒转化E.coliBL21后,用IPTG诱导重组菌表达GST-Dot4融合蛋白,采用SDS-PAGE及W estern B lot法鉴定表达产物,用G lutathione Sepharose4B亲和层析柱分离纯化。[结果]pGEX-KG-Dot4重组表达载体在大肠杆菌中获得高效表达;经G lutathione Sepharose4B亲和层析柱纯化获得了高纯度的Dot4融合蛋白;W estern B lot表明,该蛋白可与GST标签抗体反应,表明获得了目的蛋白。[结论]在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Dot4融合蛋白,为Dot4蛋白的结构、功能及作用机制研究奠定了基础。
- 张艳梅丛文娟郭建军刘中来
- 关键词：融合蛋白可溶性表达蛋白纯化
