战美娜
- 作品数：13 被引量：41H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省农业科技攻关项目陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 布鲁菌病多重PCR快速检测方法的建立及应用被引量：11
- 2010年
- 根据GenBank中登录的布鲁菌(Brucella)omp31、bp26、omp10外膜蛋白基因序列,针对同一种病原,各设计合成了一对特异性引物,通过优化引物浓度组合,建立了检测布鲁菌472 bp、290 bp、162 bp片段的多重PCR快速检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性试验,结果显示,该方法从布鲁菌标准菌株中扩增出了特异性的目的片段,而对大肠埃希菌等细菌的扩增结果均为阴性。经过对10倍倍比稀释的模板进行检测,多重PCR的敏感度为最低可检出1.1×10-3ng的DNA,在感染布鲁菌病奶牛乳汁模拟标本中最低可检出细菌数为80 cfu/mL。不同人员用该方法重复检测,结果均一致,表明重复性好。应用该方法对88份临床疑似布鲁菌感染的奶牛乳样进行了检测,结果检出17份阳性,阳性检出率约为19.3%。检测结果表明,该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于奶牛布鲁菌病的临床检测及流行病学监测等。
- 王晶钰张三东刘红彦李河林程媛媛李宇立战美娜
- 关键词：布鲁菌外膜蛋白基因多重PCR
- 布鲁菌病多重PCR快速检测方法的建立及应用
- 根据GenBank中登录的布鲁菌(Brucella)omp31、bp26、omp10外膜蛋白基因序列,针对同一种病原,各设计合成了一对特异性引物,通过优化引物浓度组合,建立了检测布鲁菌472 bp、290 bp、162 ...
- 王晶钰张三东刘红彦李河林程媛媛李宇立战美娜
- 关键词：布鲁菌外膜蛋白基因多重PCR
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫YL株3-1E和TA4基因的原核共表达
- 艾美耳属（Eimeria）的寄生原虫常常会给家禽养殖业造成巨大的经济损失。柔嫩艾美耳球虫（E. tenella）是感染鸡的7种艾美耳球虫中毒力最强的一种。它寄生于盲肠内,可引起盲肠出血,严重的则因为失血和休克而造成贫血甚...
- 战美娜
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫基因原核表达
- 文献传递
- 应用ELISA检测紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株虫苗抗体
- 将无球虫雏鸡随机分为2组,在9日龄和16日龄分别进行首免和二免。用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清抗球虫抗体的变化情况。结果显示,雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势,并且在二免后第11天出现峰值（0.398）...
- 李健宋军科战美娜林青于三科
- 关键词：ELISA柔嫩艾美耳球虫抗体
- 文献传递
- 一种抗鸡球虫病的融合蛋白及其制备和应用
- 本发明公开了一种抗鸡球虫病的融合蛋白及其制备和应用。本发明提供一种融合基因及其表达的融合蛋白，所述融合基因为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明还构建了包含上述融合基因的重组质粒。本发明提供的融合蛋白可用于制备...
- 林青战美娜于三科宋军科李健
- 应用ELISA检测紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株虫苗抗体被引量：3
- 2010年
- 将无球虫雏鸡随机分为2组,在9日龄和16日龄分别进行首免和二免。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗球虫抗体的变化情况。结果显示,雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势,并且在二免后第11天出现峰值(0.398),其后稳定地维持在较高水平;对照组抗体水平稳中有降。抗体水平动态变化表明,紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株有较强的免疫保护力。
- 李健宋军科战美娜林青于三科
- 关键词：ELISA柔嫩艾美耳球虫抗体
- 柔嫩艾美耳球虫杨凌株TA4基因的克隆和原核表达
- 2010年
- 根据国外报道的序列设计1对引物,以纯化的柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌(YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的TA4基因。序列分析表明,该序列全长741bp,开放阅读框(ORF)为651bp,共编码217个氨基酸,与E.tenella HT株、E.tenella BJ株和E.tenella ZJ株的TA4基因ORF序列同源性分别为99.8%、99.8%和99.27%。由此确定所获得的目的基因为E.tenella YL株TA4基因。利用生物信息学和分子生物学软件对TA4基因编码的蛋白进行结构预测,结果表明,该蛋白为一结构松散的球状蛋白。将TA4基因克隆到表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-TA4并在大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物的SDS-PAGE分析结果表明,成功地表达了分子质量为41ku的融合蛋白。
- 林青王卉于三科战美娜宋军科
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫克隆
- 鸡E.tenella YL株紫外线致弱虫苗的制备及致病性研究
- 对E.tenella YL株进行以紫外线照射为主的6种方法进行致弱,然后将这6种方法致弱的和未照射的E.tenella YL株孢子化卵囊,分别经口接种8日龄无球虫感染的健康尼克红小公雏,剂量为1×10个/羽,对肠道病变记...
- 于三科刘蕾林青宋军科战美娜
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验被引量：7
- 2010年
- 【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的SO7基因,对其测序后进行序列分析。将SO7基因克隆到表达载体pET-32a中,构建pET-SO7重组质粒,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,评价其免疫效果。【结果】鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因序列的开放阅读框(ORF)为651个碱基,共编码217个氨基酸。E.tenella YL株SO7基因与E.tenella LS18株、E.tenella BJ株、E.tenella GD株SO7基因ORF区序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%,其氨基酸序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%。SDS-PAGE分析表明,表达产物成功地表达出了分子质量为45ku的融合蛋白。各种抗球虫指标的测定结果显示,该蛋白对球虫感染鸡体具有一定的保护性。【结论】SO7基因具有很强的保守性,各虫株之间差异不大;重组蛋白具有一定的保护效果,适合用来制备基因疫苗。
- 王卉林青战美娜于三科
- 关键词：克隆表达
- 一种抗鸡球虫病的融合蛋白及其制备和应用
- 本发明公开了一种抗鸡球虫病的融合蛋白及其制备和应用。本发明提供一种融合基因及其表达的融合蛋白，所述融合基因为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明还构建了包含上述融合基因的重组质粒。本发明提供的融合蛋白可用于制备...
- 林青战美娜于三科宋军科李健
- 文献传递
