方丽 作品数:90 被引量:676 H指数:18 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
山羊BMP15基因FecX^L突变的检测 被引量:13 2008年 采用PCR-SSCP方法在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊、波尔山羊和文登奶山羊)和低繁殖力山羊品种(内蒙古绒山羊、安哥拉山羊和辽宁绒山羊)中检测骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因的FecXL突变,同时研究该基因突变对济宁青山羊高繁殖力的影响。结果表明这6个山羊品种都没有发生与Lacaune绵羊相同的FecXL突变(C53Y)。可见BMP15基因中影响Lacaune绵羊高繁殖力的突变位点对济宁青山羊的高繁殖力没有显著影响。 肖杰文 储明星 李学伟 方丽关键词:山羊 高繁殖力 PCR-SSCP 荷斯坦母牛AHCY基因PCR-SSCP分析 2009年 根据已发表的牛AHCY基因序列设计13对引物,采用PCR-SSCP方法在210头荷斯坦母牛中检测S-腺苷高半胱氨酸水解酶(S-adenosylhomocysteine hydrolase,AHCY)基因全部10个外显子的单核苷酸多态性,同时分析该基因对荷斯坦母牛乳房炎抗性的影响。结果表明,AHCY基因的10个外显子在检测的荷斯坦母牛中都不存在多态性,AHCY基因外显子区域可能不存在影响乳房炎抗性的遗传标记。 李拓 储明星 王金玉 安永福 狄冉 方丽关键词:荷斯坦母牛 PCR-SSCP 山羊促甲状腺素β亚基基因(TSHB)cDNA克隆与组织表达研究 被引量:2 2012年 促甲状腺素β亚基基因(TSHB)主要表达于动物垂体腺,其表达受到光照周期调控并且与动物季节性繁殖活动密切相关。本实验以济宁青山羊和辽宁绒山羊为研究对象,运用RT-PCR方法克隆获得山羊TSHB基因部分cDNA序列(GenBank No.:JQ937288),并使用RT-PCR与荧光定量PCR技术检测TSHB基因在济宁青山羊与辽宁绒山羊下丘脑-垂体-卵巢繁殖轴及其他组织的表达分布情况。结果表明,山羊TSHB基因编码区417 bp,编码含有138个氨基酸的蛋白质;各哺乳动物间TSHB基因高度保守,山羊与绵羊、牛TSHB基因同源性最高,达99%;另外,两品种山羊TSHB基因均在垂体中高表达,在济宁青山羊下丘脑、卵巢及海马等组织低度表达,而在辽宁绒山羊下丘脑低度表达,两品种其他组织均没有表达。非繁殖季节济宁青山羊垂体TSHB基因表达水平是辽宁绒山羊的1.6倍(P=0.061),其对季节性繁殖的调控功能值得进一步研究。本研究首次对山羊TSHB基因cDNA序列进行了克隆和表达分析,研究结果对山羊繁殖调控具有重要意义。 黄冬维 曹贵玲 储明星 唐倩倩 狄冉 方丽关键词:山羊 CDNA克隆 荧光定量 基因表达 石岐黄肉鸡前期日粮适宜的能量和蛋白质水平的研究 被引量:36 1998年 本试验旨在研究优质石岐黄肉鸡前期日粮适宜的能量(ME)和蛋白质(CP)水平。试验共设4(ME)×5(CP)共20个处理,各5个重复,每重复16只母雏。ME(MJ/kg)水平分别为11.3,11.9,12.6,13.2,CP(%)分别为16.0,17.5,19.0,20.5,22.0。结果表明,以增重为衡量指标,石岐黄肉鸡生长前期日粮适宜的ME和CP水平分别为12.6MJ/kg和19.0%;以能量存留率、氮存留率和饲料转化率为衡量指标,则适宜水平分别为13.2MJ/kg和20.5%。 陈继兰 吕连山 赵玲 喻俊英 方丽关键词:代谢能 粗蛋白质 日粮 荷斯坦母牛PPARGC1A基因多态性与产奶性状关联分析 被引量:1 2010年 设计18对引物,采用PCR-RFLP、PCR-PAGE及PCR-SSCP技术检测过氧化物酶增殖激活受体γ辅激活蛋白1α(peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator 1 alpha,PPARGC1A)基因在435头荷斯坦母牛中的多态性,分析该基因对荷斯坦母牛5个产奶性状(305 d产奶量、蛋白率、乳脂率、乳糖率、干物质率)的影响。结果表明仅引物P1、P2、P16和P18扩增片段存在多态性。引物P1扩增片段经HaeⅢ酶切产生CC、CT、TT3种基因型;TT和CT基因型乳脂率最小二乘均值显著高于CC基因型所对应的值(P<0.05),TT和CT基因型乳脂率最小二乘均值差异不显著(P>0.05)。引物P2扩增片段经NheⅠ酶切产生AA、AC、CC 3种基因型;AA和AC基因型蛋白率最小二乘均值显著高于CC基因型所对应的值(P<0.05),AA和AC基因型蛋白率最小二乘均值差异不显著(P>0.05)。对于引物P16扩增片段,检测到EE、EF、FF 3种基因型;EE、EF和FF基因型5个产奶性状最小二乘均值差异均不显著(P>0.05)。对于引物P18扩增片段,检测到GG、GH、HH3种基因型;GG、GH和HH基因型5个产奶性状最小二乘均值差异均不显著(P>0.05)。本研究结果初步表明PPARGC1A基因C85330T多态位点的T等位基因是提高奶牛乳脂率的一个潜在DNA标记,A103592C多态位点的A等位基因是提高奶牛乳蛋白率的一个潜在DNA标记。 王凭青 何玺 储明星 方丽 狄冉 安永福关键词:荷斯坦母牛 多态性 产奶性状 绵羊GDF9基因FecTT突变检测 被引量:6 2011年 FecTT是冰岛Thoka绵羊GDF9基因外显子2编码区1279位发生的A→C突变(A1279C),导致编码GDF9蛋白C末端成熟肽第109位丝氨酸改变为精氨酸(S109R),该突变纯合子母羊不育,杂合子母羊产羔数比野生型多0.6只。本研究采用PCR-RFLP方法分析了GDF9基因FecTT突变在小尾寒羊、洼地绵羊、湖羊、考力代、白萨福克、黑萨福克、东弗里生、杜泊绵羊、特克塞尔、多赛特和中国美利奴11个绵羊品种中的分布。结果表明在11个绵羊品种中都没有检测到GDF9基因的FecTT突变,提示GDF9基因影响Thoka绵羊高繁殖力的FecTT突变对以上11个绵羊品种的繁殖力均没有显著影响。 耿彩霞 冯涛 储明星 方丽 狄冉 曹贵玲 黄冬维 唐倩倩 陈宏权关键词:绵羊 GDF9基因 孕酮受体基因多态性及其与济宁青山羊产羔数关系 被引量:8 2009年 【目的】寻找与产羔数相关的遗传标记,为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在济宁青山羊、波尔山羊、辽宁绒山羊和安哥拉山羊中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对山羊繁殖力的影响。【结果】只有引物P1、P8与P9扩增片段具有多态性。对于P1扩增片段,济宁青山羊中检测到AA、AB和BB型,其余山羊中均检测到AA和AB型;测序表明BB与AA型相比有一处突变(31G→A),并导致丙氨酸变为苏氨酸;BB基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型多0.52只(P<0.05),比AA基因型多0.98只(P<0.001),AB基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AA基因型多0.46只(P<0.05)。对于P8扩增片段,济宁青山羊中只检测到CC型,波尔山羊中检测到CC和CD型,其余山羊中检测到CC、CD和DD型;测序表明DD型和CC型相比有一处突变(2810C→G),未导致氨基酸改变。对于P9扩增片段,济宁青山羊和波尔山羊中检测到FF和FG型,其余山羊中检测到FF、FG和GG型;测序表明GG型和FF型相比有一处碱基突变(60128T→A),未导致氨基酸改变;FF基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比FG基因型多0.32只(P>0.05)。【结论】本试验结果初步表明,PGR基因可能是控制济宁青山羊多羔性的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。 王凭青 鲁浪 储明星 狄冉 张宝云 方丽 马月辉 李奎关键词:山羊 繁殖力 PCR-SSCP 济宁青山羊MTNR1A基因外显子2的克隆与序列分析 被引量:4 2006年 对常年发情的山羊品种济宁青山羊和季节性发情的山羊品种辽宁绒山羊共20只母羊的褪黑激素受体1A(melatonin receptor 1A,MTNR1A)基因外显子2的824 bp扩增产物进行了克隆测序及序列比较分析.结果表明,济宁青山羊MTNR1A基因外显子2的核苷酸序列与已发表的山羊序列(GenBank登录号AF419334)完全相同.济宁青山羊与辽宁绒山羊MTNR1A基因外显子2的差异由11个核苷酸变化(A52G、T232C、T253C、A256G、T358G、T410A、A414T、C424T、A554G、T559C和C589A)组成,核苷酸同源性为98.7%.济宁青山羊与绵羊、母牛、猪、人、小鼠、挪威大鼠、西伯利亚仓鼠、鸡之间MTNR1A基因外显子2的核苷酸序列同源性为73.5%~98.4%,氨基酸序列同源性为79.2%~98.5%. 何远清 储明星 王金玉 方丽 叶素成关键词:山羊 克隆 促黄体素β基因多态性及其与济宁青山羊产羔数的关系 被引量:5 2009年 为了解促黄体素β基因多态性与济宁青山羊产羔数的关系,采用PCR-SSCP技术检测促黄体素β亚基(Luteinizing hormone beta-subunit,LHβ)基因5′调控区和3个外显子在高繁殖力(济宁青山羊)、中等繁殖力(波尔山羊)和低繁殖力山羊品种(辽宁绒山羊和安哥拉山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。结果表明:山羊与绵羊的LHβ基因核苷酸序列相似性为98%。6对引物中,仅引物P1和P5扩增片段存在多态性。对于P1扩增片段,在4个山羊品种中均检测到AA、AB和BB 3种基因型;测序分析发现BB与AA基因型相比在5′调控区存在2处突变202C→A和210C→T;济宁青山羊3种基因型之间产羔数差异均不显著(P>0.05)。对于P5扩增片段,在济宁青山羊中检测到CC、CD和DD 3种基因型,辽宁绒山羊中检测到CC和CD2种基因型,波尔山羊和安哥拉山羊中都只检测到CC基因型;测序分析发现DD与CC基因型相比在外显子2存在单碱基突变1124C→T;济宁青山羊CC、CD和DD基因型频率分别为0.38、0.44和0.18;DD和CD基因型济宁青山羊平均产羔数分别比CC基因型的多0.99(P<0.01)和0.87只(P<0.01)。济宁青山羊在P1、P5两个座位上都处于哈迪-温伯格平衡状态(P1座位:χ2=1.66,P=0.437;P5座位:χ2=1.22,P=0.544)。 狄冉 梁琛 储明星 刘文忠 方丽 马月辉 李奎关键词:山羊 繁殖力 小尾寒羊和湖羊高繁殖力候选基因BMP15的研究 被引量:38 2005年 以控制RomneyInverdale绵羊和RomneyHanna绵羊高繁殖力的骨形态发生蛋白15(bonemorphoge-neticprotein15,BMP15)基因为候选基因,采用PCR-RFLP方法检测BMP15基因在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊、湖羊)以及低繁殖力绵羊品种(道赛特羊、萨福克羊)中的多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明,BMP15基因在小尾寒羊、湖羊、道赛特和萨福克绵羊中既没有发生与Inverdale绵羊相同的V31D突变,也没有发生与Hanna绵羊相同的Q23Ter突变。还表明BMP15基因中影响Inverdale绵羊和Hanna绵羊高繁殖力的突变位点对小尾寒羊和湖羊的高繁殖力没有显著影响。 储明星 成荣 陈国宏 方丽 叶素成关键词:高繁殖力 PCR-RFLP