目的:通过计算机虚拟筛选金银花中具有抗人源手足口病毒Human Enterovirus 71(HEV71)的天然抑制剂。方法:以HEV71病毒衣壳蛋白为靶蛋白,通过PyRx运行Auto Dock Vina,对自建数据库中的金银花天然化合物进行虚拟筛选;用Discovery Studio Visualizer对小分子抑制剂与HEV71的结合模式进行3D建模,分析了得到的小分子抑制剂与HEV71之间的结合情况。用同样的方法对茯苓中的化合物进行虚拟筛选,作为对照。结果:虚拟筛选出了3个金银花中具有潜在活性的化合物:loniflavone,3'-Omethyl loniflavone和3,5-dicaffeoylquinic acid。结论:虚拟筛选结果支持金银花具有抑制HEV71病毒活性,并且为金银花抗手足口病的分子机制研究提供了参考。
对利用一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶水解黄芩苷制备黄芩素进行了研究。该酶催化黄芩苷转化为黄芩素的反应能在醋酸-醋酸钠缓冲液中良好地进行,酶的最适p H 5.5,最适反应温度85℃,温度在85℃以下,p H 5~7.5酶的稳定性良好。酶的最大反应速率Vmax为0.41 mmol·L^(-1)·min^(-1),米氏常数Km为3.31 mmol·L^(-1)。不同的金属离子对酶的活性有不同的影响,醋酸-醋酸钠缓冲液中的Na+对酶有活化作用。反应体系中葡萄糖醛酸浓度低于0.6 mol·L-1时,对酶有活化作用,当单糖浓度大于0.6 mol·L^(-1)时,对酶有抑制作用,当单糖浓度达到1.2 mol·L^(-1)时,酶活抑制率为50%,糖耐受性较好。通过实验得出较佳反应条件为黄芩苷-酶液1 g∶0.2 m L,pH 5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液,反应时间为10 h时,反应温度为85℃,酶解率可达97%。
