李铁军
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南通大学医学院更多>>
- 发文基金：江苏省产学研前瞻性联合研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多靶向RNA干扰技术在基因治疗中的应用与前景被引量：3
- 2015年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)通过转录后基因沉默效应特异性抑制靶基因的表达,其沉默机制的高效性、特异性及稳定性使这项技术成为生物医学领域研究基因治疗的重要工具。阐述RNAi技术的特点和RNAi疗法的现状,特别是多靶小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)目前的发展态势及其各种结构性修饰,通过使用这些结构修饰的siRNA提高基因沉默的效率,将有助于提高疗效。但该技术在广泛应用于临床之前,仍存在一些亟待解决的问题与面临的挑战,需进一步研究。
- 薛玉文李铁军周家名陈莉
- 关键词：SIRNARNA干扰(RNAI)修饰基因治疗
- 大规模合成长链RNA的简易低成本工艺
- 2013年
- 由于现有技术所限,RNA分子长度和二级结构往往成为RNA合成困难的主要原因。提供了一种简单低成本大规模制备和纯化长链RNA药物的新工艺,尤其针对具有稳定二级结构的长链RNA药物。采用引物延伸方法替代PCR和线性质粒DNA方法制备线性DNA模板可减少步骤及降低污染,然后用T7 RNA聚合酶转录制备的甲氧基修饰的线性DNA模板获得高均一度的长链RNA,转录粗产物直接用source 15Q阴离子HPLC分离T7 RNA聚合酶、rNTP、转录中断产物、内毒素和模板DNA等,从而获得高纯度RNA终产物。该工艺无需繁琐的酚/氯仿抽提和RNA变性,尤其适用于RNA的大量制备。
- 张平静李铁军周宋峰朱远源陈建新陆毅祥文锋
- 关键词：长链RNA转录纯化
- Bcl-2基因siRNA的筛选及对胃癌细胞MGC-803增殖的影响作用被引量：1
- 2011年
- 目的:筛选有效抑制Bcl-2基因表达的siRNA序列,研究Bcl-2特异性siRNA对胃癌细胞的抑制作用。方法:设计并合成4对针对Bcl-2的siRNA序列,通过LipofectamineTM2000转染入人胃癌细胞MGC-803后,应用实时定量PCR和Western Blot法分别检测siRNA对细胞内Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平抑制效果,且经CCK-8法检测siRNA对胃癌细胞增值影响。结果:与对照组相比,所设计4对siRNA中siBcl-2抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达效果最佳,抑制率分别为88%和63%,且siBcl-2在转染后第96 h对癌细胞增殖有显著抑制效果。结论:成功筛选出1对能有效抑制Bcl-2基因表达的siRNA序列,为胃癌基因治疗提供实验依据。
- 李杏玉李铁军易楠陈莉
- 关键词：胃癌BCL-2SIRNARNA干扰聚合酶链反应
