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雷帕霉素诱导细胞自噬促进乙型肝炎病毒的复制被引量：3: 2014年; 目的研究雷帕霉素诱导细胞产生自噬对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响。方法通过雷帕霉素诱导人肝癌细胞HepG2 2.15产生自噬,荧光显微镜和透射电镜下观察自噬小体形成,Western blot检测诱导后HepG2 2.15细胞自噬标志蛋白LC3-II/LC3-I的表达水平;荧光定量PCR检测HBV mRNA水平;加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),Western blot检测自噬抑制后LC3-II/LC3-I的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的表达,Southern blot检测HBV DNA水平,验证HBV复制情况。结果雷帕霉素诱导后,HepG2 2.15细胞在荧光显微镜和透射电镜下观察到自噬小体的形成,LC3-II/LC3-I比值显著上升(P<0.05);细胞诱导自噬后HBsAg和HBV mRNA显著增加(P<0.05),而加入自噬抑制剂3-MA后,HBsAg和HBV DNA均显著减少(P<0.05)。结论雷帕霉素可能通过诱导细胞自噬促进HBV的复制。; 李霞黄文娟朱素菲陈维贤; 关键词：雷帕霉素自噬乙型肝炎病毒

丙型肝炎病毒核心蛋白对Dicer切割功能的影响: 2013年; 目的探讨核心蛋白与Dicer的相互作用及其对Dicer功能的影响。方法构建丙型肝炎病毒核心蛋白真核表达质粒,采用免疫荧光染色和Western blot检测核心蛋白的表达,Western blot检测核心蛋白对细胞内Dicer表达的影响,免疫共沉淀技术检测真核细胞内核心蛋白与Dicer的相互作用。体外转录合成dsRNA,检测核心蛋白对Dicer切割dsRNA作用的影响。结果在细胞内,核心蛋白能够明显恢复被shRNA抑制的虫荧光素酶基因的表达(P<0.05),而对siRNA引发的RNAi无拮抗作用。在真核细胞内,加入核心蛋白后,Dicer的表达量无明显改变,并能检测到两者相互结合。在体外抑制实验中,重组表达的Dicer能切割dsRNA产生siRNA;核心蛋白加入后,dsRNA的切割受到抑制。结论核心蛋白在真核细胞内可以结合Dicer,并通过抑制Dicer对dsRNA的切割作用,抑制RNA干扰作用。; 黄文娟李霞胡琴陈维贤; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白 DICER酶免疫共沉淀

ATG4A及ATG16L1基因多态性与肺结核易感性的关系被引量：2: 2015年; 目的:探讨自噬相关基因4A(autophagy related 4A,ATG4A)及自噬相关基因16L1(autophagy related 16 like 1,ATG16L1)的多态性位点与中国西南地区人群肺结核易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测218例肺结核患者及248例健康对照者ATG4A基因rs807185位点及ATG16L1基因rs2241880位点的基因型,用logistic回归分析上述2个位点与肺结核病易感的相关性。结果:2组人群中rs807185位点的A等位基因、AT基因型及显性模型AA+AT vs.TT的频率分布存在统计学差异(P<0.05),且在女性中差异更突出。而rs2241880位点的各指标频率分布差异均不明显(P>0.05)。结论:ATG4A基因rs807185位点多态性与中国西南地区人群肺结核易感性呈负相关,而ATG16L1基因rs2241880位点多态性则与该地区人群肺结核易感性无明显相关。; 黄秦赵凤容李霞胡少婷贺巧周向东李升锦陈维贤; 关键词：肺结核单核苷酸多态性遗传学

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李霞