杜英
- 作品数：170 被引量：440H指数：9
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技创新人才工程项目河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 新生豚鼠神经干细胞的分离培养、鉴定及标记被引量：2
- 2006年
- 目的从新生豚鼠海马中分离培养神经干细胞,为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋的实验研究创造条件。方法分离新生豚鼠海马组织,用含碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)无血清培养技术培养神经干细胞,免疫组化技术检测其巢蛋白(Nestin)的表达。采用荧光染料DAPI标记神经干细胞。结果从新生豚鼠海马组织分离出的细胞中可获得呈集落样生长的神经干细胞团,并能表达Nestin;荧光染料的标记效率可达93.4%,细胞传代8次后荧光亮度仍无明显衰减。结论从新生豚鼠海马分离的细胞具有明显的增殖能力,荧光染料的标记可获得较高的标记效率,可作为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋实验研究的供体细胞。
- 王英董明敏杜英高嵩涛
- 关键词：神经干细胞细胞培养细胞标记
- 蛋白质芯片技术对脐血浆生物活性成分的分析被引量：1
- 2009年
- 目的通过高通量筛选、检测脐血中细胞因子的种类和含量,全面了解脐血浆生物活性成分及表达水平。方法取10位健康足月分娩产妇脐静脉血2 ml和健康成年女性志愿者捐献的外周静脉血2 ml,应用抗体芯片RayBio(?) Biotin Label-basedHuman Antibody ArrayⅠ一次性检测507种细胞因子表达水平,两样本中细胞因子比值大于或小于两倍以上者为有显著差异。结果在蛋白质芯片检测所包括的507种细胞因子中,脐血浆中有94种成分显著高于对照组,28种成分显著低于对照组。结论抗体芯片技术能高通量、平行性检测脐血浆生物活性成分及表达水平,为深入研究脐血细胞因子积累了数据。
- 唐悦张静杜英杨波吴世凯李国喜胡祥
- 关键词：脐血细胞因子抗体芯片
- 人胚脑源性神经干细胞特性及免疫原性研究被引量：18
- 2004年
- 目的:探讨人胚脑源性神经干细胞特性及免疫原性,为神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)移植治疗神经系统损伤奠定基础。方法:取孕14周流产胚胎,无菌分离制备大脑神经细胞悬液,用CD133标记的免疫磁珠分选NSC,提取NSCRNA,进行RT-PCR探测MHC-I,MHC-II类分子mRNA转录;用流式细胞术检测细胞表面MHC-I,MHC-II类分子的表达;用正常成人外周血单个核细胞与培养NSC共培养和MTT比色分析法观察淋巴细胞增殖反应;将NSC小鼠脑内接种,进行组织染色观察细胞移植部位的组织学变化。结果:新分离和传代的NSC均发生MHC-I,MHC-II类分子mRNA转录,MHC-I类分子在NSC表面的表达百分率为(5.66±0.37)%,NSC在体外能诱发淋巴细胞增殖反应,A值为1.09±0.48和1.15±0.29,与阴性对照比差异有显著性意义(P<0.05)。NSC小鼠脑内移植具有修复神经损伤作用,局部无淋巴细胞浸润和炎症。结论:人胚脑源性神经干细胞具有免疫原性,但直接脑内接种未发现引起明显的移植排斥反应。
- 马希峰阮丽荣杜英李宏伟杨波
- 关键词：NSC人胚免疫原性研究淋巴细胞增殖反应MRNA转录
- 重症肌无力患者胸腺组织非编码RNA差异基因及其靶基因的初步分析
- 研究背景和研究目的:重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是抗体介导、T细胞依赖的自身免疫性疾病。70%—80%MG患者存在胸腺增生、胸腺瘤等病变,多数患者胸腺中可见生发中心,从中能分离出分泌自身抗体的B...
- 赵瑞杜英李倩茹刘萍萍轩小燕闫飞倪文鹏冯煜舒崔新征张清勇高峰
- 关键词：重症肌无力胸腺MIRNA芯片
- 文献传递
- Foxo1-KLF2-S1P1在MG患者胸腺组织的表达被引量：2
- 2015年
- 目的通过探讨Foxo1-KLF2-S1P1在MG患者胸腺的表达,分析其对胸腺T细胞输出的影响。方法取MG患者及对照组胸腺组织,提取总RNA,通过荧光定量RT-PCR检测Foxo1、KLF2、S1P1及CD62L、CCR7、CD69的表达;制作胸腺组织切片,通过免疫组化了解Foxo1、S1P1、CD62L、CD69、CCR7在胸腺组织的分布与表达。结果免疫组化显示Foxo1、S1P1、CCR7在MG患者及对照组胸腺都有表达,主要分布在髓质区,MG患者胸腺组织髓质区扩大,Foxo1、S1P1、CCR7表达显著高于对照组;荧光定量PCR结果显示MG胸腺组织Foxo1、KLF2、S1P1、CCR7、CD69的m RNA的水平表达显著增高(分别是5.36±0.728、1.43±2.71、6.1±1.033、5.0±0.932、4.97±1.112,与对照组相比P<0.05)。结论 MG患者Foxo1-KLF2-S1P1高表达可能是MG患者胸腺细胞的异常输出的原因。
- 张云赵俊涛刘萍萍轩小燕朱郑坤马莹莹李倩如杜英
- 关键词：重症肌无力胸腺FOXO1
- FOXO1对Jurkat细胞S1P1和CD62L表达的影响
- 背景:叉头蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)是一种重要的转录因子,主要参与细胞凋亡、肿瘤发生和糖代谢等生命过程。我们前期研究中,发现重症肌无力(mysthenia gravis,MG)...
- 闫飞刘萍萍杜英赵瑞倪文鹏李倩如张建
- 关键词：FOXO1CD62L
- 文献传递
- 多步离心法提取K526细胞外泌体被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨多步离心提取K526细胞外泌体的实验方法。方法:选用白血病细胞株K562细胞为研究对象,取其培养上清液,经多步骤离心获取提取物,然后进行形态和蛋白成分分析。结果:形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是K526细胞外泌体。结论:多步离心是一种方便实用的提取外泌体的方法。
- 陈绍倩杜英王鑫顾巧丽黄玉敏董子明
- 关键词：外泌体K562细胞离心
- K562细胞外泌体诱导特异性CTL生成的研究被引量：7
- 2006年
- 为了研究人白血病细胞株K562细胞分泌的外泌体(exosomes)及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞(DC)分泌的外泌体能否诱导出K562细胞特异性CTL,采用四步离心法提取K562细胞及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞的培养上清液中的外泌体,并诱导CTL生成,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对K562细胞的杀伤作用。结果显示K562细胞外泌体和K562细胞RNA刺激的DC和外泌体均能明显促进对K562细胞的杀伤活性,与未经外泌体作用的对照组相比有显著性差异(P<0.05)。外泌体作用后对K562细胞的杀伤作用明显比对HL-60细胞的杀伤作用强,其差异有显著性(P<0.05)。结论K562细胞外泌体能够诱导出特异性抗白血病细胞的免疫反应。
- 陈绍倩杜英王鑫顾巧丽黄玉敏董子明
- 关键词：K562细胞树突状细胞外泌体细胞毒T淋巴细胞
- 慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA与e抗原含量的关系被引量：6
- 2016年
- 目的探讨慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清乙肝病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)与乙肝病毒e抗原(HBe Ag)含量的关系。方法 424例慢性乙肝患者,以定量聚合酶链反应、美国Abbott微粒子酶免疫荧光法对患者血清HBV-DNA含量及e抗原含量进行检测,探讨二者之间的关系。结果 e系统双阳性患者HBV-DNA含量明显低于血清HBe Ag(+)患者(P<0.05);HBe Ag定量与血清HBV-DNA呈现一定相关性,但e抗原转阴并不代表病毒复制全部终止;慢性乙肝患者病情越严重,血清HBV-DNA含量越低,病毒量与病变程度呈负相关。结论 e系统双阳性患者HBV-DNA含量明显低于血清HBe Ag(+)患者,HBe Ag定量与血清HBV-DNA呈现一定相关性,慢性乙肝患者病毒量与病变程度呈负相关。
- 马骉陈恋恋朱春凯杜英
- 关键词：慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒E抗原
- 重症肌无力胸腺组织蛋白质组双向电泳方法的建立被引量：3
- 2007年
- 目的:建立和优化重症肌无力(MG)胸腺组织蛋白质组双向电泳技术方法。方法:提取MG患者(n=3)增生型胸腺组织蛋白,以固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦电泳,SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳为第二向。在以上过程中分别对蛋白提取、等电聚焦程序(A、B、C、D)和凝胶染色方法等各个实验环节进行控制和优化,利用PDQuest7.1.1软件分析获得的二维凝胶图像。结果:①采用一步法提取胸腺组织蛋白质,第一向等电聚焦采用7cmIPG胶条,聚焦程序选择B,硝酸银染色。3例标本重复4次,共获12幅二维凝胶图像。随机选取1例标本的2幅图像,利用软件对2幅中的蛋白点进行匹配,匹配率为82.1%;3份样品共12幅凝胶图像的对比,获得3个共同存在的标志蛋白点,相对分子质量和等电点分别为:A点(82700,7.0)、B点(50700,5.76)和C点(33300,5.02)。②进一步优化上述实验条件,选择1例标本,采用两步法提取胸腺组织蛋白质,选用17cmIPG胶条,聚焦采用程序D,考马斯亮蓝染色,获得的二维凝胶图像与一步法(其他条件相同)比较。一步法可检测到蛋白质点326个,两步法可检测到562个蛋白点。结论:①建立了MG胸腺组织蛋白质组提取的方法。采用两步法可以更有效地提取胸腺组织蛋白质组。②利用优化后的实验方法,获得了MG胸腺组织蛋白二维凝胶图像,为开展MG胸腺组织蛋白质组学研究打下了基础。
- 高峰杨继要崔新征郭亮杜英张清勇
- 关键词：重症肌无力胸腺蛋白质组双向电泳
